鎘是一種常見的環(huán)境和工業(yè)重金屬污染物,急性或慢性的鎘蓄積均能引起多種組織和器官的損傷。大腦是鎘毒性作用的重要靶器官之一,現(xiàn)有的研究表明,鎘能夠通過血腦屏障,引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡。Fas/FasL信號通路是最重要的死亡受體通路之一,在細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮重要作用。有研究表明,Fas/FasL信號通路可以介導(dǎo)MAPK通路和線粒體通路引起細(xì)胞凋亡。本課題組前期研究表明,鎘可以通過Fas/FasL信號通路、MAPK通路和線粒體通路引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡,但鎘致神經(jīng)細(xì)胞凋亡Fas/FasL信號通路與MAPK通路、線粒體通路之間的聯(lián)系機制尚不清楚。本試驗以神經(jīng)細(xì)胞株大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（PC12細(xì)胞）為模型,通過體外試驗探究了 Fas/FasL在鎘致PC12細(xì)胞凋亡中的作用以及對MAPK通路和線粒體通路的調(diào)控機制。1.慢病毒介導(dǎo)Fas基因沉默PC12細(xì)胞株的構(gòu)建為獲得Fas基因沉默PC12細(xì)胞株,本試驗通過3種不同干擾靶點的Fas shRNA慢病毒感染PC12細(xì)胞12h,用含有嘌呤霉素（工作濃度為4mg/L）的完全培養(yǎng)液持續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞48h。通過熒光顯微鏡觀察,計數(shù)100個細(xì)胞中表達(dá)綠色熒光蛋白的細(xì)胞個數(shù),... 

【文章來源】：揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１－１慢病毒載體結(jié)構(gòu)示意圖??

Ｆａｓ?ｓｈＦＲＮＡ?２??■??Ｆａｓ?ｓｈＲＮＡ?３?■??Ｈ??圖２－１－２慢病毒對ＰＣ１２細(xì)胞的感染效率??Ｆｉｇ?２－１－２?Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ?ＰＣ?１２?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｌｅｎｔｉｖａｓ基因沉默的鑒定??Ｆａｓ?ｍＲＮＡ表達(dá)量的變化，結(jié)果顯示（圖２－１－３?）的轉(zhuǎn)錄水平無顯著差異（ｐ＞〇．０５）；與ＮＣ組相比，Ｆａｓ下降（ｐ＜〇．〇ｌ）。??％??

陳潔：Ｆａｓ／ＦａｓＬ對鎘致ＰＣ１２細(xì)胞凋亡ＭＡＰＫ通路和線粒體通路的調(diào)控作用ＰＣ１２細(xì)胞Ｆａｓ蛋白沉默的鑒定??Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ檢測Ｆａｓ蛋白表達(dá)量的變化，結(jié)果顯示（圖２－１－４），與Ｃｏｎｔｒｏｌ組組Ｆａｓ蛋白的表達(dá)量無顯著差異（ｐ＞（Ｘ０５）；與ＮＣ組相比，ＦａｓｓｈＲＮＡ組Ｆａｓ量極顯著下降（戶＜〇．〇１）。??§?１５－．??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]jnk3基因在金魚和斑馬魚不同發(fā)育時期胚胎與成體不同組織中的分化表達(dá)[J]. 陳麗莉,鄒立軍,熊振,劉姣,廖高鵬,劉文彬,劉少軍,肖亞梅,李萬程.  水產(chǎn)學(xué)報. 2011(02)
[2]p38絲裂原激活蛋白激酶對人胚胎腎293細(xì)胞一氧化氮合酶基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控[J]. 郭愛華,龔小衛(wèi),闞文宏,秦清和,鄧鵬,王靜珍,姜勇.  第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2003(03)
[3]Mechanisms of caspase activation and inhibition during apoptosis[J].   Cell Research. 2002(Z1)
[4]MAPK signal pathways in the regulation of cell proliferation in mammalian cells[J]. WEI ZHANG, Hui Tu LIU The Key Laboratory of Cell Proliferation and Regulation Biology of Ministry of Education, College of Life Sciences, Beijing Normal University, Beijing 100875, China.  Cell Research. 2002(01)

博士論文
[1]鎘致大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡的線粒體途徑及NAC的保護(hù)作用[D]. 江辰陽.揚州大學(xué) 2014

碩士論文
[1]Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在鎘致神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用及NAC的保護(hù)效應(yīng)[D]. 張雅靜.揚州大學(xué) 2016
[2]鎘對體外培養(yǎng)大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的毒性損傷及NAC保護(hù)效應(yīng)的研究[D]. 張英.揚州大學(xué) 2009



本文編號：3335418