反硝化偶聯(lián)厭氧甲烷氧化（DAMO）菌群廣泛存在于自然厭氧環(huán)境中,對(duì)生態(tài)系統(tǒng)中的碳循環(huán)和氮循環(huán)有重要意義,其發(fā)現(xiàn)和運(yùn)用對(duì)控制環(huán)境富營養(yǎng)化以及甲烷的釋放有重要作用。此外,工業(yè)和農(nóng)業(yè)上抗菌劑的大量使用會(huì)導(dǎo)致含抗菌劑的廢水排出,影響環(huán)境中的反硝化和甲烷厭氧氧化過程。因此,研究抗菌劑對(duì)DAMO菌群的影響可以評(píng)價(jià)抗菌劑的使用對(duì)環(huán)境的影響,并可給運(yùn)用DAMO處理含抗菌劑的廢水提供參考。本論文構(gòu)建了厭氧序批式生物反應(yīng)器（SBR）,并用于富集來自堆積牛糞厭氧層中的DAMO菌群,然后分別研究了抗菌劑金霉素和碲酸鹽對(duì)DAMO菌群的影響,并對(duì)可能的影響機(jī)制進(jìn)行了研究和分析。本文的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下:（1）厭氧序批式生物反應(yīng)器（SBR）的構(gòu)建與DAMO菌群的富集。構(gòu)建了實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的厭氧SBR,并將之運(yùn)用于富集來自農(nóng)業(yè)堆肥厭氧層中的DAMO菌群。在163 d的反應(yīng)器運(yùn)行中,通過分析硝酸鹽與亞硝酸鹽的濃度變化、反硝化效率、氮去除百分比、揮發(fā)性懸浮固體占比,以及運(yùn)用qPCR技術(shù)分析DAMO相關(guān)功能基因的豐度變化來綜合評(píng)估構(gòu)建的SBR富集DAMO的效果。結(jié)果顯示,反應(yīng)器在穩(wěn)定階段的反硝化量分別為0.69±0.40 ... 

【文章來源】：成都理工大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

厭氧SBR組成示意圖

泥均沉降到底部。通過出水管取樣 5mL，5000rpm 離心 10min，然后立即用 0.2μm 的濾頭過濾液體樣品，存于-4℃冰箱用于后續(xù)測(cè)定溶液中的 NO3-和 NO2-的含量（mg-N/L）。通過液面控制泵排出約 300mL 的上清液，使液面控制在 1600mL處。同時(shí)用 pH 計(jì)測(cè)定排出液體的 pH 值，控制反應(yīng)器中溶液的 pH 在 6.9-7.1 之間(Ettwigetal.,2009)。再用 30min 補(bǔ)充已滅菌除氧的 300mL 培養(yǎng)液開始下一個(gè)循環(huán)。操作過程應(yīng)防止溶液倒吸，并且嚴(yán)格控制氧氣的進(jìn)入。反應(yīng)器用錫箔紙嚴(yán)密包裹，避免光合微生物的生長(Ettwig et al., 2009)。整個(gè) SBR 運(yùn)行溫度為23±0.5 ℃。在長時(shí)間的運(yùn)行中，需要定期測(cè)定反應(yīng)器液體中氧氣的含量。因此設(shè)計(jì)了一個(gè)可以連續(xù)測(cè)定液體中氧氣的裝置，如圖 2-2 所示。其有一個(gè)進(jìn)水口和一個(gè)出水口，頂部為溶氧計(jì)的放置口。操作流程大致為，先用高壓氮?dú)獬パb置內(nèi)的氧氣，直到溶氧計(jì)顯示為 0 mg/L。然后將此裝置與 SBR 的出水管連接，當(dāng)液面控制泵連續(xù)排出液體，最后要經(jīng)過溶氧計(jì)裝置的小室，此時(shí)就能測(cè)定溶液中的氧氣含量。氧氣的含量應(yīng)當(dāng)控制在小于 0.2 mg/L(Lai et al., 2016)，并且操作過程應(yīng)該快速，確保裝置密封，無氧氣滲入到排出液中。

第 2 章 厭氧序批式生物反應(yīng)器的構(gòu)建與 DAMO 菌群的富集應(yīng)器指標(biāo)測(cè)試與計(jì)算子色譜 IC 測(cè)定溶液中的 NO3-和 NO2-究采用離子色譜(ICAS22，Dionex，USA)測(cè)定反應(yīng)器溶液中脫液為 4.5 mM Na2CO3和 1.4 mM NaHCO3，流速為 1.0 mL壓強(qiáng)為 1500 pa 到 2000 pa 之間，進(jìn)樣體積為 1 mL。首先O2-的標(biāo)準(zhǔn)濃度，分別為 1、5、10、50、100mg-N/L。IC 測(cè)積后，繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2均為 0.999（圖 2-3）。之后分析測(cè)試。


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