沙門(mén)氏菌作為一種病原微生物,能夠通過(guò)環(huán)境介質(zhì)感染人體引發(fā)腸胃炎、菌血癥和敗血癥、傷寒以及腸熱癥等。其中,傷寒病最為嚴(yán)重是可致命的疾病,潛伏期1¹4天,嚴(yán)重危害人體健康。沙門(mén)氏菌通常是由排放的污水、動(dòng)物的糞便等污染供水系統(tǒng)來(lái)進(jìn)行傳播,人類一旦飲用含有沙門(mén)氏菌的水體會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生嚴(yán)重危害。近年來(lái),水體中沙門(mén)氏菌的檢測(cè)受到國(guó)內(nèi)外的關(guān)注,各種檢測(cè)指標(biāo)相繼出臺(tái),但病原微生物的傳統(tǒng)檢測(cè)方法仍存在一些局限性。因此,發(fā)展快速、準(zhǔn)確的沙門(mén)氏菌檢測(cè)方法對(duì)于環(huán)境安全監(jiān)測(cè)以及疾病診斷等方面都具有十分重要的意義。本論文利用核酸適配體作為分子識(shí)別工具,結(jié)合酶修復(fù)放大、雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和鏈置換放大等核酸等溫放大技術(shù),發(fā)展了幾種簡(jiǎn)單、高效、超靈敏和高特異的沙門(mén)氏菌熒光生物傳感技術(shù)。研究論文的主要內(nèi)容概括如下:首先,本論文構(gòu)建了一種基于酶修復(fù)放大（ERA）的通用型正信號(hào)熒光傳感技術(shù)。利用目標(biāo)分子-核酸適配體之間的特異性結(jié)合,誘導(dǎo)ERA反應(yīng),結(jié)合聚合酶和兩種DNA修復(fù)酶（糖基化酶UDG和核酸內(nèi)切酶IV）的協(xié)同催化作用,實(shí)現(xiàn)循環(huán)酶切放大反應(yīng),從而實(shí)現(xiàn)了超靈敏和高特異的沙門(mén)氏菌檢測(cè)。該方法特殊設(shè)計(jì)多功能發(fā)夾型... 

【文章來(lái)源】：濟(jì)南大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 沙門(mén)氏菌對(duì)環(huán)境的危害及研究現(xiàn)狀
        1.1.1 沙門(mén)氏菌簡(jiǎn)介
        1.1.2 水環(huán)境沙門(mén)氏菌污染現(xiàn)狀
        1.1.3 沙門(mén)氏菌檢測(cè)技術(shù)研究現(xiàn)狀
    1.2 光學(xué)生物傳感技術(shù)的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 熒光檢測(cè)技術(shù)
        1.2.2 表面增強(qiáng)拉曼光譜(Surface-EnhancedRamanScattering,SERS)檢測(cè)技術(shù)
        1.2.3 其他檢測(cè)技術(shù)
    1.3 核酸適配體在光學(xué)生物傳感技術(shù)中的應(yīng)用
        1.3.1 核酸適配體的簡(jiǎn)介
        1.3.2 核酸適配體在生物傳感領(lǐng)域中的優(yōu)勢(shì)
        1.3.3 核酸適配體在生物傳感體系中的應(yīng)用
    1.4 核酸等溫信號(hào)放大技術(shù)
        1.4.1 核酸酶信號(hào)放大技術(shù)
        1.4.2 滾環(huán)復(fù)制放大(RollingCircleAmplification,RCA)技術(shù)
        1.4.3 雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(HybridizationChainReaction,HCR)
        1.4.4 無(wú)酶鏈置換放大技術(shù)
    1.5 本論文研究思路
第二章 基于酶修復(fù)放大(ERA)技術(shù)的通用型正信號(hào)熒光傳感器的構(gòu)建及其在沙門(mén)氏菌檢測(cè)中的應(yīng)用
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 材料和試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 細(xì)菌菌株的培養(yǎng)
        2.2.4 沙門(mén)氏菌檢測(cè)
        2.2.5 凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 熒光傳感器的工作原理
        2.3.2 可行性研究
        2.3.3 凝膠電泳表征
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        2.3.5 沙門(mén)氏菌檢測(cè)的工作曲線
        2.3.6 選擇性考察
        2.3.7 實(shí)際樣品檢測(cè)
    2.4 小結(jié)
第三章 基于光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移的循環(huán)指數(shù)放大策略的超靈敏熒光傳感器的構(gòu)建及其在沙門(mén)氏菌檢測(cè)中的應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 材料和試劑
        3.2.2 儀器
        3.2.3 DNA/AgNCs的合成
        3.2.4 凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 透射電鏡表征
        3.2.6 沙門(mén)氏菌檢測(cè)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 熒光傳感器的工作原理
        3.3.2 PET機(jī)理的驗(yàn)證
        3.3.3 可行性研究
        3.3.4 凝膠電泳表征
        3.3.5 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        3.3.6 選擇性考察
        3.3.7 沙門(mén)氏菌檢測(cè)的工作曲線
        3.3.8 實(shí)際樣品分析
    3.4 小結(jié)
第四章 基于HCR偶聯(lián)G-四聯(lián)體DNAZyme技術(shù)的SERS生物傳感器的構(gòu)建及其在沙門(mén)氏菌檢測(cè)中的應(yīng)用
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 試劑和材料
        4.2.2 儀器
        4.2.3 SERS金納米粒子的制備
        4.2.4 透射電子顯微鏡表征
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 傳感器的工作原理
        4.3.2 透射電鏡表征
        4.3.3 可行性分析
        4.3.4 紫外可見(jiàn)吸收光譜表征
        4.3.5 拉曼染料濃度的優(yōu)化
        4.3.6 選擇性考察
        4.3.7 沙門(mén)氏菌檢測(cè)的工作曲線
        4.3.8 實(shí)際樣品分析
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]光學(xué)生物傳感器的研究進(jìn)展[J]. 王鋒,樊先平,王民權(quán).  材料導(dǎo)報(bào). 2004(07)
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碩士論文
[1]鼠傷寒沙門(mén)氏菌適配體的篩選及應(yīng)用研究[D]. 段穎芬.湖南師范大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3167599