隨著石油工業(yè)的高速發(fā)展,在石油開采加工過程中產(chǎn)生的環(huán)境污染問題日益加劇。原位篩選耐鹽堿石油烴降解菌可以用來修復(fù)受石油污染的鹽堿土壤。本研究從莫莫格濕地石油污染土壤中分離出多環(huán)芳烴降解菌株,并系統(tǒng)研究了該菌株對菲（PHE）的降解特性,為濕地石油污染的治理提供了良好的菌種資源。本研究以吉林油田石油污染土壤為樣本,對土壤的理化性質(zhì)及土壤中微生物種類進(jìn)行檢測與分析,明確該區(qū)域內(nèi)微生物的生長環(huán)境,并通過對微生物種類的分析,有目的的對耐鹽堿菲降解菌株進(jìn)行篩選。本實(shí)驗(yàn)以PHE作為唯一碳源,對采集自莫莫格濕地內(nèi)石油污染土壤中多環(huán)芳烴降解菌進(jìn)行富集,并分離出耐鹽堿的PHE高效降解細(xì)菌。通過形態(tài)學(xué)及16S rRNA基因序列分析,明確其系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化地位;同時,利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）測定培養(yǎng)物中PHE的殘留量,明確菲降解菌株對鹽濃度與酸堿環(huán)境的響應(yīng)特征,以及不同培養(yǎng)溫度、時間、菌液添加量、PHE初始添加量對菌株降解PHE的影響,獲得了菲降解菌株的適宜生長條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本研究成功分離出三株耐鹽堿的PHE降解細(xì)菌S1-8、S2-1、S3-2,三株菌株均屬于鹽單胞菌（Halomonas）;三株... 

【文章來源】：長春理工大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

莫莫格濕地內(nèi)研究區(qū)域示意圖

土壤中微生物群落的分布新鮮土壤經(jīng)干冰保存，寄送至北京諾禾致源科技股份有限公司(Novogene端測序(Single-End)的方法，委托檢測土壤樣本的 16S rRNA V3-V4 區(qū)擴(kuò)。驗(yàn)結(jié)果與分析土壤樣品理化性質(zhì)壤樣品的理化性狀如表 2.2 所示：土壤中石油烴含量為 2.815g·kg-1,遠(yuǎn)高染的臨界值 0.5g·kg-1，故該供試土壤區(qū)域?yàn)槭臀廴緡?yán)重區(qū)域；土壤 pH多數(shù)石油降解菌生長繁殖的 pH 7.0-7.5 的最佳范圍，該區(qū)域?yàn)閴A化土壤量的檢測表明該區(qū)域土壤中鹽分含量過高，作物生長受到抑制的同時，中微生物的生物活性。如圖 2.2-2.4 所示，為采用索氏提取的方法，結(jié)合 G法檢測土壤樣品中 16 種 PAHs 的過程及檢測分析結(jié)果，由圖 2.4 中 16 種離子流譜圖可知各個物質(zhì)的保留時間及峰面積，21 min 時第五個峰出現(xiàn)的 PHE，且經(jīng)過計算其含量高于其余 15 中標(biāo)志性污染物，即可選擇 PH標(biāo)志性石油烴類污染物進(jìn)行微生物實(shí)驗(yàn)。

圖 2.3 PAHs 提取液的濃縮表 2.1 16 種 PAHs 標(biāo)志性污染物的標(biāo)準(zhǔn)曲線 RT 標(biāo)準(zhǔn)曲線 R2 8.878 y = 85,114,728.9754 x - 11,154,388.4672 0.944烯 14.619 y = 88,732,562.1721 x - 12,248,721.7295 0.945 15.339 y = 118,369,439.6721 x - 15,565,373.2295 0.945 17.312 y = 110,308,181.0246 x - 14,998,925.5328 0.946 21.002 y = 89,746,415.7787 x - 15,692,981.2049 0.916 21.200 y = 94,266,953.3197 x - 9,456,949.9262 0.976蒽 25.649 y = 109,679,590.2869 x - 15,727,942.5492 0.946芘 26.444 y = 118,014,621.2295 x - 16,466,358.6393 0.948并(a)蒽 31.223 y = 98,287,989.2213 x - 20,786,086.7951 0.875屈 31.372 y = 110,048,709.4672 x - 17,298,776.1230 0.932苯并(b)熒蒽 35.205 y = 108,378,950.7477 x - 36,444,426.4673 0.895.苯并(k)熒蒽 35.289 y = 95,352,077.8279 x - 16,346,162.2705 0.910

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]鹽土多環(huán)芳烴降解菌篩選分離及其污染修復(fù)應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D]. 宋立超.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]多環(huán)芳烴嗜鹽降解菌的分離及芘降解機(jī)制的研究[D]. 周海燕.清華大學(xué) 2015
[2]勝利油田采油區(qū)土壤石油污染狀況及其微生物群落結(jié)構(gòu)[D]. 劉健.山東大學(xué) 2014
[3]高效石油烴降解菌的分離、鑒定及降解能力研究[D]. 馬強(qiáng).北京化工大學(xué) 2008



本文編號：3031770