目的:以Nrf2敲除小鼠為模型,采用IVC系統(tǒng)模擬外界PM真實(shí)暴露,觀察PM暴露對(duì)小鼠血管損傷及機(jī)制初步探索。方法:在河北省石家莊,利用獨(dú)立通氣籠（IVC系統(tǒng)）,對(duì)小鼠進(jìn)行42天的PM染毒,小鼠PM暴露每天16小時(shí)。Nrf2基因敲除型和野生型小鼠各80只,隨機(jī)分為四組（野生型染毒組（WTE）,野生型對(duì)照組（WTC）,敲除型染毒組（KOE）,敲除型對(duì)照組（KOC））,每組各40只。每天早、中、晚三次用TSI手持式環(huán)境粉塵檢測(cè)儀對(duì)籠內(nèi)和外界大氣中的顆粒物濃度進(jìn)行檢測(cè)并做記錄。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死小鼠,取小鼠主動(dòng)脈做病理切片觀察,采用qRT-PCR方法對(duì)各組小鼠血管組織中基因（ABCA1、Dag1、BMP2、TGFβ、AKT1、MAPK、DDIT3、PRKCB、PPP2CB、ACE、AT1R和AGT）的mRNA表達(dá)水平檢測(cè),酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)血清血管緊張素II（AngII）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）表達(dá)量;采用免疫組化方法檢測(cè)血管組織中的ACE和AT1R蛋白水平;采用Western-blot方法檢測(cè)血管組織AT1R蛋白水平。結(jié)果:1.室外和IVC系統(tǒng)籠內(nèi)PM濃度及粒徑情況,室外... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
實(shí)驗(yàn)材料和方法
    1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 主要儀器和試劑
    3 動(dòng)物飼料配方
    4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理
    5 標(biāo)本的收集與處理
    6 檢測(cè)分析
        6.1 小鼠的一般狀況
        6.2 臟器系數(shù)
        6.3 血常規(guī)檢測(cè)
        6.4 小鼠主動(dòng)脈組織病理切片
        6.5 免疫組化
            6.5.1 蠟塊包埋
            6.5.2 操作步驟
        6.6 熒光實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定主動(dòng)脈血管平滑肌增殖相關(guān)基因mRNA的表達(dá)
            6.6.1 血管總RNA的提取
            6.6.2 mRNA濃度測(cè)定
            6.6.3 RNA完整性檢測(cè)
            6.6.4 逆轉(zhuǎn)錄為cDNA
            6.6.5 熒光實(shí)時(shí)定量PCR（qRT-PCR）
            6.6.6 qRT-PCR結(jié)果計(jì)算
        6.7 Elisa方法對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè)
        6.8 Western-blot法檢測(cè)小鼠血管組織中AT1R蛋白的表達(dá)水平
            6.8.1 主動(dòng)脈血管組織蛋白樣品
            6.8.2 BCA法測(cè)定蛋白濃度
            6.8.3 Western-blot檢測(cè)AT1R蛋白
    7 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1 染毒籠內(nèi)PM顆粒物粒徑分布情況
    2 室外大氣與染毒籠內(nèi)PM2.5 濃度變化
    3 各組小鼠一般狀況
    4 各組小鼠臟器系數(shù)水平
    5 各組小鼠血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果
    6 各組小鼠主動(dòng)脈HE染色結(jié)果
    7 各組小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌增殖相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平
        7.1 ACE mRNA表達(dá)結(jié)果
        7.2 AGT mRNA表達(dá)結(jié)果
        7.3 AT1R mRNA表達(dá)結(jié)果
    8 免疫組化分析血管緊張素相關(guān)因子ACE和 AT1R表達(dá)情況
        8.1 AT1R免疫組化結(jié)果
        8.2 ACE免疫組化結(jié)果
    9 Western-blot法檢測(cè)小鼠組織中AT1R蛋白的表達(dá)
    10 Elisa法檢測(cè)血清中MCP-1和AngII的表達(dá)
        10.1 Elisa法檢測(cè)血清中MCP-1 的表達(dá)
        10.2 Elisa法檢測(cè)血清中AngII的表達(dá)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄 （縮略詞表）
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]乙酰水楊酸姜黃素酯對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響及相關(guān)機(jī)制[J]. 孫四玉,楊冬梅,戴娜,夏伯候,庹勤慧.  湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(11)
[3]PM2.5致心肺損傷的研究[J]. 歐敏,王聰琳,許文祝,吳成年,鄧火金.  醫(yī)學(xué)綜述. 2017(19)
[4]核轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子-2信號(hào)通路對(duì)重金屬中毒調(diào)控作用的研究進(jìn)展[J]. 康嘉懿,鄧宇.  環(huán)境與健康雜志. 2017(08)
[5]血管緊張素Ⅱ與氧化應(yīng)激在阿霉素心臟毒性中的作用[J]. 涂文程,于勤.  大連大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(03)
[6]白藜蘆醇對(duì)PM2.5誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡的保護(hù)作用[J]. 劉方芳,金瑤,李明,吳彤,王芳,鄺棗園,李巖.  中藥新藥與臨床藥理. 2017(03)
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[10]PM2.5暴露誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊失穩(wěn)定發(fā)病機(jī)制及應(yīng)對(duì)策略思考[J]. 李玉潔,陳穎,王婭杰,藥紅梅,楊慶,翁小剛,朱曉新,李漢卿,劉栩岑,周冰冰,郭琰.  中國(guó)中藥雜志. 2014(15)

博士論文
[1]PM2.5成分與高血壓相關(guān)心腦血管疾病急診的關(guān)系及對(duì)RAS基因表達(dá)的影響[D]. 黃志軍.中南大學(xué) 2012
[2]細(xì)胞內(nèi)ROS水平改變對(duì)細(xì)胞活性及相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)途徑的影響[D]. 秦勇.浙江大學(xué) 2012
[3]甲基蓮心堿對(duì)人血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的影響及機(jī)制初探[D]. 李曉春.浙江大學(xué) 2010

碩士論文
[1]PM2.5暴露對(duì)支氣管上皮細(xì)胞線粒體功能的影響及靶基因調(diào)控研究[D]. 張?chǎng)?東南大學(xué) 2016
[2]PM2.5致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及白藜蘆醇的干預(yù)效應(yīng)研究[D]. 李利忠.中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2016
[3]重組人促紅細(xì)胞生成素抑制自噬減輕心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷[D]. 連曉鵬.山西醫(yī)科大學(xué) 2016
[4]煙霧萃取劑和氧化應(yīng)激對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞增殖的影響[D]. 李天佳.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2013
[5]高劑量AngII對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞ACE、ACE2表達(dá)的影響及其分子機(jī)制[D]. 陳歡.南方醫(yī)科大學(xué) 2013
[6]顆粒物和多環(huán)芳烴的暴露在不同F(xiàn)ramingham風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分人群中對(duì)心率變異性的影響[D]. 馮瑩瑩.華中科技大學(xué) 2013
[7]細(xì)顆粒物對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ACE、AT1R基因表達(dá)的影響[D]. 蔡明.中南大學(xué) 2012
[8]皂苷C抑制血管緊張素Ⅱ促血管平滑肌細(xì)胞增殖作用及其機(jī)制研究[D]. 洪丹.中南大學(xué) 2011
[9]復(fù)合抗氧化劑對(duì)動(dòng)物氧化應(yīng)激與自由基代謝的影響[D]. 韓雪.上海交通大學(xué) 2010
[10]血管緊張素-（1-7）對(duì)大鼠血管功能和增殖的調(diào)控[D]. 鐘健.第三軍醫(yī)大學(xué) 2002



本文編號(hào)：3000253