光復(fù)活修復(fù)是生物體的一種重要的DNA損傷修復(fù)機(jī)制,對(duì)保持生物體遺傳信息的延續(xù)性、遺傳結(jié)構(gòu)的完整性有重要作用。所謂光復(fù)活修復(fù),是指在DNA光修復(fù)酶（photolyase）的作用下以光為驅(qū)動(dòng)力來修復(fù)紫外線損傷的DNA。紅球菌Rhodococcus sp.NJ-530是從南極冰水中分離出來的,攜帶光修復(fù)酶基因的細(xì)菌。由于長(zhǎng)期生活在南極強(qiáng)紫外輻射、較低溫度的環(huán)境,修復(fù)紫外造成的DNA損傷成為增強(qiáng)其生存機(jī)制的重要途徑之一,因此,從分子水平上研究紅球菌Rhodococcus sp.NJ-530光復(fù)酶修復(fù)作用是非常有意義的。此外,該研究也可以為南極細(xì)菌和其他南極物種應(yīng)對(duì)強(qiáng)紫外輻射的生存適應(yīng)性的研究提供基礎(chǔ)。本論文主要進(jìn)行了以下研究?jī)?nèi)容:通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）和密碼子優(yōu)化合成紅球菌Rhodococcus sp.NJ-530光修復(fù)酶基因PHR,并對(duì)PHR基因進(jìn)行了生物信息學(xué)分析;應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)對(duì)紅球菌Rhodococcus sp.NJ-530光修復(fù)酶基因PHR的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制進(jìn)行了研究;構(gòu)建了光修復(fù)酶基因PHR的異源表達(dá)系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)了在大腸桿菌BL21（DE3）中的異源表... 

【文章來源】：青島科技大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CPD和（6-4）光修復(fù)酶晶體結(jié)構(gòu)

南極紅球菌 Rhodococcus sp. NJ-530 光修復(fù)酶及其功能特性研究鍵相連生成（6-4）光產(chǎn)物[33]。CPD 和 6-4PP 在體內(nèi)積累可導(dǎo)至皮膚癌[34]。光修復(fù)酶識(shí)別這些受損的胸腺嘧啶二聚體，收藍(lán)光或通過受激天線色素團(tuán)的能量傳遞來修復(fù)這些損傷。酶/隱色素的晶體結(jié)構(gòu)包括 CPD 和（6-4）光修復(fù)酶的 些酶在整個(gè)蛋白家族中，F(xiàn)AD 輔因子以非常規(guī) u 型構(gòu)型非共價(jià)結(jié) lumiflavin（Lf）和 adenine（Ade）的分離距離較短;而在其他常是伸展的、開放的結(jié)構(gòu)。CPD 和（6-4）光修復(fù)酶均含有完呤二核苷酸(FADH)分子作為活性輔助因子。

紅球菌 Rhodococcus sp. NJ-530 光修復(fù)酶及其功能特果結(jié)果中的菌液混勻，用 次性滴管將菌液涂在載玻-1所示，細(xì)菌多為短桿狀或卵圓形，直徑大多大，但不超過 10 μm。

【參考文獻(xiàn)】：
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