鉈是一種劇毒重金屬,在地球上分布廣泛但是含量很低,所以對鉈的關(guān)注度很低。隨著近些年工業(yè)生產(chǎn),鉈做為一種重金屬污染物已經(jīng)在國內(nèi)外多個地方造成了中毒事件,引起了國內(nèi)外的重視。因此對于鉈的毒性研究是必要的。對于重金屬毒性的評價方法,國際上一般采用生物體的毒理實驗。水生生物作為水環(huán)境中重要的組成部分,對水體中重金屬的毒性研究有著重要的指示作用。鉈在自然界中的存在形式常常受礦物所影響,因此選用錳氧化物來模擬自然界中的礦物進行實驗。本文選用兩種水生生物來進行實驗,斑馬魚和小球藻。通過對斑馬魚全身及各個器官(肝、腸、鰓、腦)的積累濃度,分析鉈及錳氧化物對斑馬魚的毒性效應(yīng)。結(jié)果表明,鉈在肝中的積累量最大,因為肝臟是生物體重要的代謝器官。同時,由于錳氧化物對鉈的吸附作用,實驗中添加錳氧化物的復(fù)合體系對斑馬魚的積累濃度均低于單一鉈的體系。通過對斑馬魚各個器官(肝、腸、鰓、腦)的氧化應(yīng)激指標(biāo)(活性氧ROS、超氧化物歧化酶SOD、過氧化氫酶CAT、脂質(zhì)含量MDA)以及對神經(jīng)毒性的測定。結(jié)果表明,重金屬鉈可以誘導(dǎo)斑馬魚各個器官中酶的活性的增加,然而,隨著時間的增加,酶的活性有所下降,但酶活的水平仍然高于空白對照組。單一鉈的體系比錳氧化物和鉈的復(fù)合體系對酶活性刺激性更大。單一鉈體系對ACh E的活性的刺激作用也更大。暴露在鉈溶液中的小球藻,在濃度較低時,重金屬對其生長起促進作用,高濃度則會抑制它的生長。SOD活性的測定和MDA含量的測定與斑馬魚實驗結(jié)果相似。
【學(xué)位單位】：東北石油大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：X171.5
【部分圖文】：

第二章 鉈對斑馬魚的生物積累釋水曝氣至溶解氧濃度達到空氣飽和值（ASV），pH 穩(wěn)定在L 左右（以 CaCO3 計）。配制成 Tl(I)（5、50μg/L）與錳氧化單一 Tl(I) （5、50μg/L）的體系、單一錳氧化物體系（0.1共 6 組實驗。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T13267-1991）中對于靜水規(guī)定，挑選健康且大小均一的斑馬魚進行實驗，一個燒杯中塑料燒杯，192 條斑馬魚。設(shè)置 8 個平行實驗，其中 4 個平行實驗做斑馬魚全身毒性積官（肝臟、魚腸、魚鰓、魚腦）的毒性積累。外界條件干擾對魚造成不必要的擾動，將實驗所用的燒杯置白天/黑天=14/10 小時，溫度為 23 0.5 °C。整個實驗期間不

具體方法為：用 DMSO（二甲基亞砜）將 DCFH-DA 稀釋 1加入 10 mL DMSO 和 10 μL DCFH-DA。在 96 孔板中加入 2入生理鹽水以做空白，然后再加入 100 μLDCFH-DA 稀釋液rpm 避光孵育 20min 后，用多功能微孔板酶標(biāo)儀在 488nm 激檢測熒光。測定方法歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是生物組織和細胞中一生物體內(nèi)的有害物質(zhì)所產(chǎn)生的氧自由基。它能催化過氧陰離2和 O2。用 CuZn/Mn-SOD 活性檢測試劑盒（WST-8 法）（碧云天生），這是一種利用 WST-8 的顯色反應(yīng)，通過吸光度測定來檢D 活性。WST-8 法的原理如下圖 3-1， WST-8 和黃嘌呤氧化子反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲佨染料(formazandye)，該反應(yīng)可以被8 產(chǎn)物的比色分析即可計算 SOD 的酶活力。

1.5 mL 離心管內(nèi)加入 40 μL 過氧化氫酶檢測緩沖液，再加入 10 μL 的上一步終迅速混勻；在 96 孔板中加入 200 μL 顯色工作液，再加入 10 μL 以上體系，同空白。在 25°C 振蕩箱中，以 300rpm 孵育 15min 后，用多功能微孔板酶標(biāo)儀0。同時配制過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)曲線：取 0、10、25、50、75μL5mM 過氧化氫溶液和 75、50、25 μL 過氧化氫酶檢測緩沖液至 1.5 mL，取 4 μL 加入到在 96 孔板中00 μL 顯色工作液。與樣品一起測定。3.4 MDA 的測定方法本實驗采用脂質(zhì)氧化( MDA )檢測試劑盒( Lipid Peroxidation MDA Assay Kit )生物技術(shù)有限公司，中國上海）。這是一種基于 MDA 和硫代巴比妥酸(thiobarb, TBA)反應(yīng)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物的顯色反應(yīng)，通過比色法進行測定，從而確定 alondialdehyde，丙二醛）的含量。MDA 在較高溫度及酸性環(huán)境 pH 低的時候可與 TBA 發(fā)生反應(yīng)，形成紅色的 M 產(chǎn)物，該產(chǎn)物最大吸收波長是 535 nm，相應(yīng)的反應(yīng)原理圖如下圖 3-2：

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐冬梅;王艷花;饒桂維;;四環(huán)素類抗生素對淡水綠藻的毒性作用[J];環(huán)境科學(xué);2013年09期

2 劉娟;王津;陳永亨;吳穎娟;王春霖;蘇龍曉;齊劍英;李祥平;;鉈在礦物膠體和天然有機質(zhì)界面上遷移轉(zhuǎn)化行為的研究進展[J];地球與環(huán)境;2013年03期

3 李輝輝;黃萍;董巍;朱作言;劉東;;斑馬魚研究走向生物醫(yī)學(xué)[J];遺傳;2013年04期

4 郝宗娣;劉洋洋;續(xù)曉光;劉琴;劉平懷;;小球藻(Chlorella)活性成分的研究進展[J];食品工業(yè)科技;2010年12期

5 曲久輝;賀泓;劉會娟;;典型環(huán)境微界面及其對污染物環(huán)境行為的影響[J];環(huán)境科學(xué)學(xué)報;2009年01期

6 欒富波;謝麗;李俊;周琪;;腐殖酸的氧化還原行為及其研究進展[J];化學(xué)通報;2008年11期

7 鄧紅梅;陳永亨;;水中鉈的污染及其生態(tài)效應(yīng)[J];環(huán)境化學(xué);2008年03期

8 湯鴻霄;環(huán)境分子科學(xué)與環(huán)境納米技術(shù)[J];環(huán)境科學(xué)學(xué)報;2005年01期

9 肖唐付,洪業(yè)湯,鄭寶山,洪冰,Dan Boyle,Jayanta Guha;黔西南Au-As-Hg-Tl礦化區(qū)毒害金屬元素的水地球化學(xué)[J];地球化學(xué);2000年06期

10 姜彬慧,林碧琴;重金屬對藻類的毒性作用研究進展[J];遼寧大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2000年03期

本文編號：2831939