發(fā)布時間：2020-09-19 20:57

　　 近年來,熒光探針因具有成本低廉、選擇性高、能夠可視化目標(biāo)區(qū)域、選擇性良好等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)等各個領(lǐng)域。熒光探針中基于羅丹明內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)更是被大量報道�；谠摻Y(jié)構(gòu)的熒光探針對pH敏感的特性也使其常用于生物細(xì)胞內(nèi)pH的實時監(jiān)測,并取得了良好的效果。本論文以羅丹明B為熒光母體,通過對羅丹明B螺內(nèi)酰胺的結(jié)構(gòu)進行修飾,設(shè)計合成了基于羅丹明B內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)的鄰苯二胺系列探針和氨基吡啶系列探針。其中,鄰苯二胺系列探針中對具有不同識別基團的三個探針進行了pH、金屬離子干擾、可逆性的測試。對三個探針的性質(zhì)討論分析后認(rèn)為,三個探針均具有成為pH熒光探針的潛力。氨基吡啶系列探針分為RAP系列和RAPI系列兩組。本論文中對這兩組探針之間也進行了比較,并進行了pH、金屬離子干擾、可逆性、溶劑效應(yīng)、細(xì)胞共定位等一系列測試。得到了對氫離子敏感的具有良好選擇性和抗干擾性的線粒體pH熒光探針。由于對探針pH值的設(shè)計調(diào)控,我們得到了探針RAPI2與RAPI3兩個未見報道的pH不敏感探針,具有一定的研究意義。
【學(xué)位單位】：遼寧大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：X703
【部分圖文】：

針 RDBS 在乙腈-水（4:6,v/v）中的熒光光譜圖（b）探針 RDB（c）探針 RDBS 的紫外吸收光譜圖（d）探針 RDBS 最大吸光度 RDBS 溶液的熒光和吸收光譜如圖 1-4 所示。取熒光強值分別作圖繪制出其與 pH 值之間的關(guān)系曲線，得到（吸收峰在 561 nm 處，在 5-12 的 pH 范圍內(nèi)，熒光強度時，探針 RDBS 的螺環(huán)處于“閉合”狀態(tài)，融也沒有明的狀態(tài)。隨著 pH 的逐漸降低，氫離子誘導(dǎo)螺環(huán)發(fā)生吸光度逐漸增加，溶液逐漸出現(xiàn)粉紅色并隨著 pH 的降光強度最強時約為最弱時的 8 倍，變化明顯。探針 RD光強度、吸光度與 pH 值呈線性相關(guān)（熒光 R2=，擬合后得到 pKa 值為 3.36±0.05。

22針 RDBB 在乙腈-水（4:6,v/v）中的熒光光譜圖（b）探針 RDB（c）探針 RDBB 的紫外吸收光譜圖（d）探針 RDBB 最大吸光度5 所示，探針 RDBB 在乙腈-水溶液體系中隨 pH 的減液顏色也逐漸加深。在 2-6 的 pH 范圍內(nèi)熒光逐漸增

針 RDSR 在乙腈-水（4:6,v/v）中的熒光光譜圖（b）探針 RDS（c）探針 RDSR 的紫外吸收光譜圖（d）探針 RDSR 最大吸光度6 中可以看出，探針 RDBS 還原后得到的探針 RDSR 與值略小于還原前的探針 RDBS。同樣，探針在 2-5 的 p度與 pH 值呈線性相關(guān)（熒光 R2=0.99172,；紫外 R2=0探針沒有明顯熒光和吸收，此時溶液無明顯顏色，探的熒光強度最大時比最小時高約 80 倍，發(fā)生了明顯的應(yīng)用中對 pH 變化的識別。 1-4、圖 1-5 和圖 1-6 可以發(fā)現(xiàn)，外接苯環(huán)上羥基的有 pKa 值有明顯的影響，這可能是外接基團變化影響了但總體上來看，三個探針均表現(xiàn)出了 pH 探針常見的特對 pH 值有明顯響應(yīng)并在一定范圍內(nèi)與 pH 值呈現(xiàn)線性有成為酸性 pH 探針的潛力。

【參考文獻(xiàn)】

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1 黃珊珊;基于新型PET機制的陽離子熒光分子探針[D];天津理工大學(xué);2012年

本文編號：2822982