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硝基苯降解菌的分離及其酶促降解特性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-29 17:24
【摘要】:硝基苯作為一種重要的化工基礎(chǔ)原料,生產(chǎn)量巨大,并且逐年遞增。它是一種劇毒性的環(huán)境有機(jī)污染物,排入水體后,可對(duì)生態(tài)環(huán)境造成危害,破壞水資源,通過(guò)飲用水或食物鏈進(jìn)入人體,可對(duì)人類造成多種疾病。因其具有“三致”特性,已被許多國(guó)家列為“環(huán)境優(yōu)先控制污染物”名單。生物技術(shù)的發(fā)展為有效利用生物酶進(jìn)行有機(jī)污染物的處理技術(shù)提供了技術(shù)保障。微生物及其生物酶的專一性、高效性、低成本等諸多優(yōu)點(diǎn),為利用微生物及其生物酶降解硝基苯提供了全新的思路和方法。本文以渭河沉積物中的微生物為研究對(duì)象,以硝基苯作為目標(biāo)污染物,通過(guò)富集、馴化、分離,篩選出一株硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌,采用微生物生理生化鑒定方法,結(jié)合《常見(jiàn)細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》和《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》初步鑒定該菌株為不動(dòng)桿菌屬;以硝基苯初始濃度、pH值、溫度為影響因子探討硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌降解特性的最適條件,結(jié)果表明,當(dāng)硝基苯初始濃度為50mg/L、pH值為7.0、溫度為30℃時(shí),菌株對(duì)硝基苯的降解率達(dá)到最優(yōu),為99.68%;通過(guò)鹽析法提取該硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌株的胞內(nèi)酶和胞外酶,并對(duì)硝基苯進(jìn)行降解特性研究,結(jié)果表明,該菌株胞內(nèi)酶對(duì)硝基苯的降解起主要作用,胞外酶起輔助作用;以硝基苯初始濃度、pH值、溫度、金屬離子為影響因素,以該菌株的胞內(nèi)酶、胞外酶及胞內(nèi)+外酶為研究對(duì)象,探討該硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌株酶促降解最優(yōu)條件,結(jié)果表明,胞內(nèi)酶、胞外酶和胞內(nèi)+外酶具有共同的降解特性,當(dāng)硝基苯初始濃度為50mg/L、pH值為7.0、溫度為30℃時(shí),該菌株的酶促降解率達(dá)到最佳;通過(guò)金屬離子對(duì)酶活性的影響研究表明,金屬離子Fe~(3+)和Cu~(2+)會(huì)抑制酶的活性,而金屬離子Na~+、K~+、Mg~(2+)、Ca~(2+)對(duì)酶促反應(yīng)基本無(wú)影響,但有一定激活作用;通過(guò)研究不同硝基苯濃度的酶促反應(yīng)速率發(fā)現(xiàn),該硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌株的胞內(nèi)酶、胞外酶和胞內(nèi)+外酶降解硝基苯的過(guò)程遵守米氏方程;用雙倒數(shù)作圖法求出該硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌株胞內(nèi)酶Vmax=1.3387mg/L·h,Km=173.73mg/L,胞外酶Vmax=0.7531mg/L·h,Km=119.54mg/L,胞內(nèi)+外酶Vmax=1.5038mg/L·h,Km=160.56mg/L;通過(guò)優(yōu)勢(shì)降解菌株及其胞內(nèi)酶、胞外酶和胞內(nèi)酶加胞外酶在對(duì)硝基苯最佳降解情況下的降解產(chǎn)物進(jìn)行定性分析表明,降解產(chǎn)物主要為胺基類、醇類、羧酸類、酮類、醛類等。結(jié)合本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論,若發(fā)生類似2005年松花江硝基苯污染事件,建議可采用本研究分離的硝基苯優(yōu)勢(shì)菌S-1來(lái)降解硝基苯。
【學(xué)位授予單位】:長(zhǎng)安大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:X172;X52
【圖文】:

對(duì)硝基苯,優(yōu)勢(shì)菌,途徑,硝基苯


第四章 硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌及其降解酶對(duì)硝基苯降解產(chǎn)物分析根據(jù)上述檢索圖譜匯總表 4-1 可得,(1)硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌對(duì)硝基苯降解的中間產(chǎn)物有胺基類化合物、羧酸類物質(zhì)、酯類物質(zhì)、酮類物質(zhì)、醇類物質(zhì)等,其具有代表性的中間產(chǎn)物有苯胺,由硝基苯上的硝基被還原成氨基,生成苯胺,與劉強(qiáng)[34]等人的實(shí)驗(yàn)一致,苯胺可直接開(kāi)環(huán)生成胺類有機(jī)物如已二酰二胺,然后進(jìn)一步礦化成小分子物質(zhì)如 2-乙基-1-丁烯。

硝基苯,對(duì)硝基苯,亞硝基苯,胞內(nèi)酶


(1)硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌對(duì)硝基苯降解的中間產(chǎn)物有胺基類化合物、羧酸類物質(zhì)、酯類物質(zhì)、酮類物質(zhì)、醇類物質(zhì)等,其具有代表性的中間產(chǎn)物有苯胺,由硝基苯上的硝基被還原成氨基,生成苯胺,與劉強(qiáng)[34]等人的實(shí)驗(yàn)一致,苯胺可直接開(kāi)環(huán)生成胺類有機(jī)物如已二酰二胺,然后進(jìn)一步礦化成小分子物質(zhì)如 2-乙基-1-丁烯。圖 4.1 優(yōu)勢(shì)菌對(duì)硝基苯降解的途徑(2)硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌的胞內(nèi)酶對(duì)硝基苯降解的中間產(chǎn)物有胺基類化合物、醛類物質(zhì)、羧酸類物質(zhì)、酯類物質(zhì)和醇類物質(zhì),其具有代表性的中間產(chǎn)物有苯胺、亞硝基苯、肟-甲氧基苯基,硝基苯降解主要降解途徑圖如下圖 4.2 所示。

對(duì)硝基苯,降解途徑,胞外酶


圖 4.3 胞外酶對(duì)硝基苯降解途徑(4)硝基苯優(yōu)勢(shì)降解菌的胞內(nèi)+外酶對(duì)硝基苯降解的中間產(chǎn)物有胺基類化合物、酮類物質(zhì)、羧酸類物質(zhì)、酯類物質(zhì)和醇類物質(zhì),其具有代表性的中間產(chǎn)物有苯胺、肟-甲氧基苯基,分析其降解路徑為:因未檢測(cè)到亞硝基苯,但有肟-甲氧基苯基的生成,分析硝基苯直接被還原為肟-甲氧基苯基,再還原為苯胺,苯胺鄰、對(duì)位基被取代生成 3,4-二甲基苯胺或 2-氨基-6-甲基苯甲酸,碳碳鍵斷裂生成長(zhǎng)鏈化合物并被礦化。圖 4.4 胞內(nèi)+外酶對(duì)硝基苯降解途徑4.4 關(guān)于 2005 年松花江硝基苯污染的治理措施

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

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本文編號(hào):2774274

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