【摘要】：采用急性毒性法將文蛤暴露于不同Cd~(2+)濃度(0、1.5、3、6、12mg/L)中染毒5天,用形態(tài)學(xué)、生化及分子生物學(xué)手段和方法檢測(cè)Cd~(2+)對(duì)文蛤鰓細(xì)胞凋亡程度以及金屬硫蛋白(MT)的作用特點(diǎn)。結(jié)果顯示:隨著Cd~(2+)濃度的上升,DNA梯形條帶數(shù)增多且逐漸清晰;AO/EB雙熒光染色后細(xì)胞由綠色過(guò)渡為橙黃色甚至紅色,細(xì)胞凋亡率不斷上升。Cd~(2+)對(duì)文蛤鰓絲、鰓水管和鰓上皮等產(chǎn)生損傷作用;隨Cd~(2+)濃度的增加,細(xì)胞變形及膜性結(jié)構(gòu)囊泡化嚴(yán)重,線粒體嵴減少,并出現(xiàn)溶酶體。鰓中ROS含量、DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)率(DPC)均隨Cd~(2+)濃度的上升而上升,呈濃度-劑量效應(yīng)關(guān)系;但蛋白質(zhì)羰基(PCO)含量隨Cd~(2+)濃度的增大呈先升后降的趨勢(shì);各Cd~(2+)染毒組的Caspase-3,8,9活性均被顯著激活。隨Cd~(2+)濃度的升高,SOD、CAT和GPx酶活及MT m RNA表達(dá)量均呈先升后降的趨勢(shì);超微量Na~+-K~+、Ca~(2+)-Mg~(2+)和總ATP酶活輕度受抑制。MT m RNA表達(dá)量與PCO具極顯著的相關(guān),與Caspase-3相關(guān)顯著。鎘能導(dǎo)致文蛤鰓細(xì)胞產(chǎn)生大量的自由基,使細(xì)胞膜性結(jié)構(gòu)特別是線粒體結(jié)構(gòu)損傷很大,影響正常的生理功能,出現(xiàn)氧化損傷甚至凋亡。MT能調(diào)控PCO含量變化,并能調(diào)控Caspase-3基因在線粒體介導(dǎo)的內(nèi)源性細(xì)胞凋亡途徑中發(fā)揮作用。
【學(xué)位授予單位】：溫州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：X171.5
【圖文】：

圖 2-1 文蛤鰓組織橫切圖Tab. 2-1 Clam gill tissue cross sectionA: 0mg/L，10 倍; B：1.5mg/L，10 倍; C：3mg/L，120 倍; B2：1.5mg/L，20 倍; C2：3mg/L，20 倍; D2:tube）；Bf：鰓絲（branchial filament）；鰓絲是文蛤鰓的主要組成成分，橫要由角質(zhì)層、上皮層和基膜構(gòu)成(圖 2-1由單層低柱狀上皮細(xì)胞和結(jié)締組織構(gòu)成橫切片結(jié)果顯示，對(duì)照組中鰓絲紋理清柱狀上皮細(xì)胞，基膜較厚，細(xì)胞核呈橢平的上皮細(xì)胞，基膜較薄，排列較松散較粗( 圖 2-1A、A2)。鰓絲前后兩部分單中部單層扁平的上皮細(xì)胞變化不明顯(圖前后兩部分的單層柱狀上皮細(xì)胞變小，中也相對(duì)減小，鰓組織邊緣的細(xì)胞減少，C2 和圖 2-1 D、D2)。12mg/L 質(zhì)量濃度核變形出現(xiàn)固縮現(xiàn)象(圖 2-1 E、E2)。

圖 2-2 文蛤鰓組織縱切圖Tab. 2-2 Clam gill tissue longitudinal sectionA: 0mg/L，10 倍; B1.1：1.5mg/L，10 倍; C：3mg/L，20 倍; B2：1.5mg/L，20 倍; C2：3mg/L，20 倍; D2:tube）；Bf：鰓絲（branchial filament）；文蛤鰓石蠟組織縱切片結(jié)果顯示，（Wt）的入口，鰓孔縱向平行排列( 圖度組鰓孔壁與其對(duì)照組相比無(wú)明顯變化質(zhì)量濃度組鰓絲多為單個(gè)的，連續(xù)性較少質(zhì)量濃度組鰓孔壁厚度增大，鰓腔相對(duì)(圖 2-2 E、E2)。觀察染毒不同質(zhì)量濃度型向短粗型轉(zhuǎn)化，細(xì)胞空泡化現(xiàn)象隨濃度和潰爛。2.1.2 鎘對(duì)文蛤鰓超微結(jié)構(gòu)分析對(duì)照組文蛤鰓細(xì)胞核（N）呈圓形或

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2733135