氨磺樂靈的殘留消解分析及對蚯蚓的生態(tài)毒理效應(yīng)研究
發(fā)布時間:2020-06-11 01:15
【摘要】:農(nóng)藥在土壤中的殘留可能會對土壤生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生危害。本研究通過測定除草劑氨磺樂靈(Oryzalin)在葡萄和土壤中的消解動態(tài)和最終殘留水平來評估其對葡萄和土壤環(huán)境的生態(tài)風(fēng)險。再利用組織學(xué)、生態(tài)毒理學(xué)和分子生物學(xué)的研究方法,從個體水平、組織水平和分子水平研究氨磺樂靈對土壤動物蚯蚓(Eisenia foetida)的生態(tài)毒理效應(yīng),篩選出對氨磺樂靈脅迫敏感的生物標(biāo)志物。在氨磺樂靈的殘留研究中,建立了液質(zhì)聯(lián)用(RRLC-QqQ-MS/MS)的分析方法。測得在不同添加水平(葡萄0.01,0.1和1 mg·kg-1;土壤0.01,0.1,1,10和30 mg·kg-1)下氨磺樂靈的平均回收率為88.2%~98.8%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)≤4.9%,符合農(nóng)藥殘留試驗要求(NY/T788-2004)。證明該方法靈敏、有效,可用于測定田間處理樣品(葡萄和土壤)中的氨磺樂靈殘留。采取北京和山東兩地的土壤樣品,測得氨磺樂靈的消解半衰期分別為9.50天和9.90天,最終殘留量0.01-0.58 mg·kg-1。兩地葡萄樣品中氨磺樂靈的濃度均低于0.1 mg·kg-1,符合農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。研究氨磺樂靈對蚯蚓的亞急性毒性效應(yīng),觀察其對蚯蚓生存、生長、繁殖和腸道損傷的影響。結(jié)果顯示:氨磺樂靈脅迫對蚯蚓的存活率沒有明顯的影響,各組蚯蚓體重均增加,但是蚯蚓的產(chǎn)繭數(shù)量、繭孵化率與氨磺樂靈濃度有明顯的劑效關(guān)系。蚯蚓腸道組織在高濃度組(5、10、15 mgkg-1)觀察到明顯的損傷,蚯蚓腸道結(jié)構(gòu)剝落變薄,腸內(nèi)空間增大。產(chǎn)繭數(shù)的最低可觀察效應(yīng)濃度(LOEC)為5 mg·kg-1,而繭孵化率的LOEC為2.5mg·kg-1。在本實驗中,低濃度(2.5 mg·kg-1)的氨磺樂靈可顯著抑制蚯蚓的繁殖,此時繭孵化率下降。研究氨磺樂靈對蚯蚓體內(nèi)抗氧化酶(SOD、CAT和GSH-ST)活性及相應(yīng)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明:暴露21天后,低濃度組蚯蚓體內(nèi)的SOD、CAT和GST活性均增強,高濃度組活性降低。2.5mg·kg-1組中的三種酶活性均顯著高于其它組。氨磺樂靈脅迫后,三種酶的基因表達(dá)的趨勢表現(xiàn)為低濃度組上調(diào),高濃度組下調(diào)。三種酶的基因表達(dá)水平在5mg·kg-1組明顯上調(diào)(P0.01),CAT和GST在高濃度組(15mg·kg-1)的表達(dá)顯著下調(diào)(p0.01和p0.05)?寡趸(SOD、CAT、GSH-ST)活性和相應(yīng)基因表達(dá)對氨磺樂靈污染土壤響應(yīng)敏感,在此脅迫下T-SOD、CAT和GST酶活性及相關(guān)基因的變化并不完全相同。綜上所述,施用該氨磺樂靈制劑對葡萄是安全的。氨磺樂靈對蚯蚓生存、生長無影響,蚯蚓的繁殖及抗氧化酶防御對氨磺樂靈的脅迫敏感,可選擇蚯蚓繭孵化率和T-SOD、GST抗氧化酶活性及基因表達(dá)作為監(jiān)測氨磺樂靈生態(tài)毒性效應(yīng)的生物標(biāo)志物。
【圖文】:
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本文編號:2707157
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