基于羅丹明B酰亞胺的次氯酸和pH熒光探針的設計研究
發(fā)布時間:2020-06-03 07:33
【摘要】:羅丹明(rhodamine)是一種以氧雜蒽為母體的熒光染料。在非堿性條件下,羅丹明分子是以醌式結構組成的,并且在可見光區(qū)有強烈的吸收和熒光,最大發(fā)射波長一般在500-700 nm之間,能夠有效的避開生物體系背景熒光的干擾;堿性環(huán)境中則以內酯結構存在,螺環(huán)內酯結構破壞了分子的共軛結構和平面剛性結構,因此無熒光,運用于環(huán)境化學、信息科學、熒光標記、分子生物學、藥理學等等方面。羅丹明熒光染料具有的優(yōu)勢有:熒光量子產率高、摩爾消光系數(shù)大、激發(fā)波長較長、pH可用范圍大等。本文以羅丹明為母體設計了兩種熒光探針:次氯酸鹽熒光探針Rh-ClO和pH熒光探針。次氯酸根陰離子是末端消毒系統(tǒng)中無處不在的反應性分子,炎性應激和免疫系統(tǒng)。因此,快速和可視化監(jiān)測水和生物樣品中的ClO~-對于污染??物的水質安全性和毒性評估非常有意義。本論文第一部分基于羅丹明B熒光團和2-噻吩甲酰肼的比色型熒光探針(Rh-ClO)已被設計并成功地用于水樣和HeLa細胞中的ClO~-檢測。加入ClO~-后,溶液顏色發(fā)生了明顯的變化,我們可以觀察到,由無色變成了粉紅色,同時,在紫外光(365 nm)激發(fā)下可以觀看到明亮的紅色熒光。Rh-ClO對ClO~-顯示出高選擇性和高靈敏度,從熒光滴定計算出的檢測限為7μM。其優(yōu)點包括在10秒內快速響應ClO~-,Rh-ClO及其試紙可成功檢測到水中的ClO~-。此外,用Rh-ClO和Rh123共染色的HeLa細胞圖像表明Rh-ClO具有優(yōu)異且快速的細胞膜滲透性和線粒體靶向性。已經證實Rh-ClO將成為有前景的熒光探針,其可快速追蹤水樣和活細胞線粒體中的ClO~-。論文第二部分以羅丹明為母體,與甘氨酸甲脂反應后產生中間產物,再分別與四種醛反應生成一系列目標物質。通過pH滴定測試和可逆性測試可知,該四種目標化合物對pH具有快速響應的特點,且不受其他金屬陽離子的影響,即是四種pH熒光探針。
【圖文】:
圖 2-1 Rh-ClO 的合成路線 儀器和原料本實驗中所用到的所有試劑,如 1,2-二氯乙烷,三氯氧磷,乙腈和三自商業(yè)供應商,不經進一步純化即可直接進行使用。柱層析用硅膠(30進行。具有 L-谷氨酰胺和 3,6-二氨基-9- [2-(甲氧基羰基)苯基] -Rh123)的 RPMI 1640 培養(yǎng)基購自 GIBCO(Invitrogen,USA),F(xiàn)BS()購自 GIBCO(Invitrogen,,USA)。在 Varian MERCURY 300 光譜儀的 CDCl 3 中用 TMS 作為內參照MR 和13C-NMR。在 HP 1100 LC-MSD, 氣相色譜/ TOF 質譜儀和 UOF 質譜儀上測量質譜。在熒光分光光度計(Cary Eclipse)上測量熒光V-vis 分光光度計(TU-1901)上記錄吸光度光譜。 在活細胞成像中使鏡(×100,1.4 數(shù)值孔徑(NA),掃描模式 XY)的倒置共焦熒光顯微鏡(
11h-ClO 探針在不同 pH 值下的吸收光譜圖(b)Rh-ClO 探針在點圖(c)Rh-ClO 探針在不同 pH 值下的熒光光譜圖(d)R大熒光值分散點屬離子選擇性測試
【學位授予單位】:遼寧大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:X703
本文編號:2694507
【圖文】:
圖 2-1 Rh-ClO 的合成路線 儀器和原料本實驗中所用到的所有試劑,如 1,2-二氯乙烷,三氯氧磷,乙腈和三自商業(yè)供應商,不經進一步純化即可直接進行使用。柱層析用硅膠(30進行。具有 L-谷氨酰胺和 3,6-二氨基-9- [2-(甲氧基羰基)苯基] -Rh123)的 RPMI 1640 培養(yǎng)基購自 GIBCO(Invitrogen,USA),F(xiàn)BS()購自 GIBCO(Invitrogen,,USA)。在 Varian MERCURY 300 光譜儀的 CDCl 3 中用 TMS 作為內參照MR 和13C-NMR。在 HP 1100 LC-MSD, 氣相色譜/ TOF 質譜儀和 UOF 質譜儀上測量質譜。在熒光分光光度計(Cary Eclipse)上測量熒光V-vis 分光光度計(TU-1901)上記錄吸光度光譜。 在活細胞成像中使鏡(×100,1.4 數(shù)值孔徑(NA),掃描模式 XY)的倒置共焦熒光顯微鏡(
11h-ClO 探針在不同 pH 值下的吸收光譜圖(b)Rh-ClO 探針在點圖(c)Rh-ClO 探針在不同 pH 值下的熒光光譜圖(d)R大熒光值分散點屬離子選擇性測試
【學位授予單位】:遼寧大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:X703
【參考文獻】
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本文編號:2694507
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