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鎘脅迫對(duì)雙孢蘑菇抗氧化系統(tǒng)的影響及耐受性相關(guān)基因的篩選與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2020-05-12 22:54
【摘要】:鎘作為重金屬元素之一,一旦含量出現(xiàn)超標(biāo),超過生物或是環(huán)境承受量,就會(huì)造成嚴(yán)重的危害,不但對(duì)農(nóng)作物造成了巨大損傷,也間接通過食物鏈的富集作用威脅著人類的身體健康。因此如何控制鎘污染現(xiàn)象的繼續(xù)惡化,治理現(xiàn)有環(huán)境中的鎘污染是一項(xiàng)艱巨的任務(wù)。近年的研究發(fā)現(xiàn)越來越多的食用菌品種對(duì)重金屬的富集轉(zhuǎn)化具有重要作用,有關(guān)食用菌中重金屬超標(biāo)的報(bào)到也屢見不鮮,主要集中于鉛、鎘、汞、砷。其中雙孢蘑菇就是其中一種有較強(qiáng)富集重金屬能力的食用菌,它可以在維持自身生長的前提下,富集超出環(huán)境背景值的鎘元素。但目前的研究停留在對(duì)食用菌富集重金屬的初級(jí)探索方面,對(duì)于其富集重金屬的分子機(jī)理仍少有研究。因此,探究雙孢蘑菇富集鎘的分子機(jī)理,尋找其富集過程中起到關(guān)鍵作用的差異基因,就可在其治理環(huán)境鎘污染方面借助技術(shù)手段提高其對(duì)鎘的富集能力,具有良好的應(yīng)用推廣前景。本文以雙孢蘑菇AS2796為對(duì)象,研究雙孢蘑菇在鎘處理下體內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)的變化,并通過高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)雙孢蘑菇空白組和鎘處理組進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析。研究發(fā)現(xiàn),不同濃度鎘對(duì)雙孢蘑菇菌絲抗氧化系統(tǒng)具有顯著影響,表現(xiàn)在雙孢蘑菇菌絲體內(nèi)APX、SOD、POD、GR等抗氧化酶及GSH等主要非酶抗氧化劑的活性均呈“低促高抑”的變化趨勢(shì),并且通過測(cè)定細(xì)胞膜的相對(duì)滲透率發(fā)現(xiàn),雙孢蘑菇菌絲的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完好無損。此外,借助轉(zhuǎn)錄組分析共篩選到5176個(gè)差異基因,其中2590個(gè)上調(diào),2586個(gè)下調(diào)。Gene Ontology功能聚類分析表明,差異基因主要富集在細(xì)胞代謝過程中。KEGG功能富集分析結(jié)果表明,差異基因主要參與了次級(jí)代謝過程、抗生素合成、氧化還原過程、能量代謝等主要通路。通過全面分析差異表達(dá)基因的變化,獲得了大量轉(zhuǎn)錄本信息,為深入了解雙孢蘑菇應(yīng)對(duì)鎘脅迫的調(diào)控分子機(jī)理、雙孢蘑菇重要性狀功能基因克隆、品質(zhì)遺傳工程改良等奠定了理論基礎(chǔ)。
【圖文】:

流程圖,文庫構(gòu)建,流程圖,測(cè)序


逑3000億個(gè)堿基。Illumina測(cè)序的數(shù)據(jù)只要以FASTQ的格式保存并輸出,,主要包逡逑括測(cè)序數(shù)據(jù)的堿基讀段和質(zhì)量[95],見圖1。在FASTQ格式的輸出數(shù)據(jù)中,讀段逡逑共占四行,第一行和第三行的信息主要包括測(cè)序儀的型號(hào)、讀段的巷道(lane)逡逑以及編號(hào)等;第二行才是測(cè)序數(shù)據(jù)的序列信息;第四行則是測(cè)序數(shù)據(jù)的質(zhì)量信息,逡逑每個(gè)測(cè)得的堿基都有一個(gè)相對(duì)應(yīng)的質(zhì)量信息。逡逑1.3.2建庫測(cè)序的流程逡逑從原始的RNA樣品到最終完成測(cè)序獲得結(jié)果,其中對(duì)于樣品的檢測(cè)、建庫逡逑以及測(cè)序的每個(gè)環(huán)節(jié)都對(duì)最后的數(shù)據(jù)結(jié)果產(chǎn)生重要影響,而獲得的數(shù)據(jù)又是進(jìn)一逡逑步分析的基礎(chǔ),因此保證測(cè)序數(shù)據(jù)的可靠度和準(zhǔn)確度就至關(guān)重要。目前,用于建逡逑庫測(cè)序的數(shù)據(jù)軟件有很多,標(biāo)準(zhǔn)化的數(shù)據(jù)處理流程主要包括:逡逑(1)

數(shù)據(jù)處理流程,測(cè)序,數(shù)據(jù)


圖2數(shù)據(jù)處理流程圖逡逑Fig.邋2邋Data邋Processing邋flow邋chat逡逑
【學(xué)位授予單位】:廈門大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:X171.5

【參考文獻(xiàn)】

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