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蠟螟腸道降解聚乙烯微生物的分離及其效果的研究

發(fā)布時間:2020-03-24 04:31
【摘要】:聚乙烯(Polyethylene,PE)塑料制品在全球被大量、廣泛的使用,從而造成了大量PE塑料廢品的產(chǎn)生,由于PE的難降解性導(dǎo)致其在自然環(huán)境的降解速度特別緩慢,因此引起嚴(yán)重的環(huán)境問題。本研究對蠟螟腸道微生物降解PE展開了一系列的研究。以蠟螟幼蟲腸道液為菌源,PE為唯一碳源篩選分離出兩株可降解PE的優(yōu)勢菌株,分別命名為ZJC-1、ZJC-2。經(jīng)使用形態(tài)學(xué)、生理生化和分子生物學(xué)手段將ZJC-1初步鑒定為季也蒙畢赤酵母(Meyerozyma guilliermondii),將ZJC-2初步鑒定為粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens)。使用接觸角測量裝置、掃描電鏡、傅里葉變換紅外光譜分別檢測ZJC-1和ZJC-2降解60天后的PE表面的接觸角變化、形貌和化學(xué)結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果表明經(jīng)ZJC-1和ZJC-2降解后的PE表面接觸角變小,表面有凹坑和孔洞的產(chǎn)生,且表面均有羰基(-C=O-)官能團(tuán)的產(chǎn)生。PE經(jīng)ZJC-1和ZJC-2降解60天后的凈失重率分別為13.97%、3.57%。使用氣質(zhì)聯(lián)用儀檢測到ZJC-1在降解PE過程產(chǎn)生了有機(jī)酸等可溶物質(zhì),ZJC-2在降解PE過程中產(chǎn)生了有機(jī)酸,有機(jī)酯等可溶物質(zhì)。此外ZJC-1在降解PE的過程中產(chǎn)生了白色半透明的未知顆粒物,長度在0至1 mm之間,多為棒狀。使用乙酸乙酯溶解顆粒物后通過氣質(zhì)聯(lián)用儀檢測其成分,結(jié)果顯示該物質(zhì)主要成分為碳鏈長為10~30的烷烴。綜合上述結(jié)果分析,可以證明ZJC-1和ZJC-2能夠降解PE。通過研究ZJC-1在降解PE過程的菌濃度和pH變化,初步了解了 ZJC-1降解PE的特性,ZJC-1在降解PE過程中菌濃度先降低后增長,pH值先升高后降低。ZJC-1在降解PE 60天期間胞外液中的蛋白濃度隨著時間的增加而增加,間接表明了菌的活力逐漸旺盛,且在逐漸降解PE。通過SDS-PAGE檢測到ZJC-1在降解PE過程中分泌了多種胞外蛋白,與對照相比在100Kd、65Kd、18Kd處有差異蛋白條帶,65Kd處的蛋白條帶較為明顯,且分泌量較其他差異蛋白大,這幾種差異蛋白很有可能是參與降解PE的關(guān)鍵蛋白。使用ABTS法檢測到ZJC-1在降解PE的過程中可以分泌漆酶,且漆酶活性為10.07±0.5(U/L),使用紫外分光光度計法未在ZJC-1的胞外液中檢測到錳過氧化物酶,則漆酶可能為ZJC-1降解聚乙烯的相關(guān)酶之一。漆酶催化氧化PE的機(jī)理可能是單電子氧化機(jī)制。
【圖文】:

蠟螟,幼蟲,取食,可降解


2.3結(jié)果與討論逡逑2.3.1蠟螟腸道降解PE微生物的篩選分離逡逑圖2-1為蠟螟幼蟲取食PE的現(xiàn)象?梢钥闯鱿灻紫x可以咀嚼取食PE,對PE造成了一逡逑定的破損。經(jīng)過對蠟螟幼蟲腸道液中可降解PE的微生物的篩選分離后,共獲得2株可降解PE逡逑的腸道微生物,分別命名為ZJC-1和ZJC-2,保存在微生物實(shí)驗(yàn)室4°C冰箱中。逡逑-11-逡逑

蠟螟,幼蟲,菌落形態(tài),蘭色


邐(b)邐(C)逡逑圖2-1蠟螟幼蟲取食PE的現(xiàn)象(圖(a)蠟螟幼蟲正在咀嚼PE;圖(b)經(jīng)蠟螟幼蟲咀嚼損壞的PE膜;圖逡逑(c)對照PE膜)逡逑Fig.邋2-1.邋Feeding邋on邋PE邋by邋wax
【學(xué)位授予單位】:東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:X172;X705;Q93

【參考文獻(xiàn)】

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1 吳進(jìn)喜;;可降解塑料的研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J];中國高新技術(shù)企業(yè);2010年24期

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1 覃理;漆酶降解木質(zhì)素及其抗氧化性能的研究[D];廣西大學(xué);2017年

2 何紅;降解淀粉填充聚乙烯的白淺灰鏈霉菌的誘變育種及發(fā)酵條件優(yōu)化研究[D];四川師范大學(xué);2015年

3 盧景江;膠質(zhì)類芽孢桿菌KNP414抗逆比較基因組及氮饑餓的轉(zhuǎn)錄組分析[D];浙江理工大學(xué);2014年

4 巢維;低密度聚乙烯(LDPE)膜光—生物降解的研究[D];湖南大學(xué);2006年

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本文編號:2597799

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