花翅搖蚊細(xì)胞色素P450應(yīng)答取代苯脅迫生化和分子毒理機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2018-06-29 02:20
本文選題:取代苯 + 花翅搖蚊。 參考:《東北林業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文
【摘要】:隨工農(nóng)業(yè)廢水的排放取代苯類有機(jī)污染物對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)造成破壞,長(zhǎng)期累積對(duì)人類健康將造成不可逆的危害。搖蚊是水體環(huán)境中良好的指示生物,其體內(nèi)細(xì)胞色素P450又可作為生物標(biāo)志物能對(duì)水體污染物的暴露進(jìn)行早期預(yù)警。本文選取苯酚、對(duì)氯苯酚、對(duì)苯二胺三種取代苯,以花翅搖蚊4齡幼蟲為研究對(duì)象,測(cè)定了3種取代苯對(duì)其急性毒性和聯(lián)合毒性、取代苯的單一和聯(lián)合作用對(duì)細(xì)胞色素P450酶活性及CYP6家族基因表達(dá)的影響,具體結(jié)果如下:(1)3種取代苯對(duì)搖蚊4齡幼蟲急性毒性大小為對(duì)氯苯酚對(duì)苯二胺苯酚,處理48 h半數(shù)致死濃度LC50范圍為10~130 mg/L,表現(xiàn)為低毒性,基團(tuán)毒性大小為-C1-NH2-OH;4種評(píng)價(jià)方式對(duì)苯酚+對(duì)氯苯酚(1:1、2:1、1:2)、苯酚+對(duì)苯二胺(1:1、2:1、1:2)、對(duì)氯苯酚+對(duì)苯二胺(1:1、2:1、1:2)9組不同二元取代苯聯(lián)合毒性的評(píng)價(jià)結(jié)果表明AI與λ法的評(píng)價(jià)毒性大小相一致,M與MTI評(píng)價(jià)毒性大小相一致。四種評(píng)價(jià)方法對(duì)不同取代苯毒性單位配比(1:1、2:1、1:2)的評(píng)價(jià)結(jié)果均以協(xié)同作用為主,表明二元混合物聯(lián)合毒性作用與各組分濃度關(guān)系不大。(2)3種單一取代苯(1~100μmol/L)對(duì)4齡搖蚊幼蟲體內(nèi)P450酶活性主要表現(xiàn)為抑制作用。苯酚對(duì)4齡搖蚊幼蟲體內(nèi)P450酶活性的抑制隨濃度和時(shí)間的增加抑制作用增大,對(duì)氯苯酚隨著作用時(shí)間的增加而抑制作用減小,而對(duì)苯二胺主要表現(xiàn)為隨濃度和時(shí)間的增加誘導(dǎo)作用逐漸增強(qiáng);離體細(xì)胞色素P450對(duì)苯酚、對(duì)氯苯酚、對(duì)苯二胺3種取代苯敏感性小,半數(shù)抑制濃度IC50分別為576.85 mg/L.466.15 mg/L和594.43mg/L,敏感性大小為對(duì)氯苯酚苯酚對(duì)苯二胺;苯酚+對(duì)氯苯酚組(1:1)與苯酚+對(duì)苯二胺(1:1)處理組中,搖蚊體內(nèi)P450酶活性均低于對(duì)照,主要表現(xiàn)為抑制作用;亞致死濃度LC20處理組搖蚊體內(nèi)P450酶活性高于LC10處理組,表現(xiàn)為對(duì)P450酶的抑制作用降低。(3)搖蚊10個(gè)CYP6全長(zhǎng)基因編碼蛋白質(zhì)氨基酸個(gè)數(shù)為421~528 aa,分子量為49.01~61.94 kDa,理論等電點(diǎn)(PI)為6.01~8.50。亞致死濃度(LC10、LC20)苯酚+對(duì)氯苯酚、苯酚+對(duì)苯二胺脅迫下,CYP6GB1基因均處于誘導(dǎo)激活狀態(tài),誘導(dǎo)范圍為1.10倍~45387.27倍。亞致死濃度LC10苯酚+對(duì)氯苯酚脅迫下對(duì)CYP6基因的表達(dá)主要以抑制作用為主,隨濃度(LC20)與時(shí)間的增加,抑制作用降低;亞致死濃度(LC1o)苯酚+對(duì)苯二胺脅迫下,10個(gè)CYP6基因均表現(xiàn)為誘導(dǎo)激活作用,但隨作用時(shí)間增加,誘導(dǎo)作用降低。痕量苯酚濃度(1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)脅迫下,10個(gè)CYP6基因表達(dá)響應(yīng)聚為3大類群,其中CYP6EV10、CYP6EW3、CYP6EV9、CYP6FX1、 CYP6FY1為一大類,CYP6FW1、CYP6EY2聚為一類;CYP6FV1、CYP6FV2、CYP6GB1為—大類,其中對(duì)CYP6FV1、CYP6FV2、CYP6GB1主要表現(xiàn)誘導(dǎo)激活作用,對(duì)其余7個(gè)基因(CYP6EV10、CYP6EW3、CYP6EV9、CYP6FX1、CYP6FV1、CYP6FW1、CYP6EY2)主要表現(xiàn)為抑制作用。本研究結(jié)果顯示取代苯類有機(jī)污染物對(duì)搖蚊幼蟲P450酶活性與CYP6基因表達(dá)具有抑制作用,表明搖蚊幼蟲參與了取代苯類有機(jī)污染物脅迫的應(yīng)答反應(yīng),并表現(xiàn)出一定時(shí)間-劑量效應(yīng),可作為水體環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)提供一定的依據(jù)。
[Abstract]:In this paper , the effects of three substituted benzene ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) , phenol + p - phenylenediamine ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) , phenol + p - phenylenediamine ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) and p - chlorophenol + p - phenylenediamine ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) on cytochrome P450 enzyme activity and CYP6 family gene expression were studied .
The IC50 of cytochrome P450 to phenol , p - chlorophenol and p - phenylenediamine was lower than that of p - chlorophenol and p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p -
In the treatment group of phenol + p - chlorophenol group ( 1 鈭,
本文編號(hào):2080397
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