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以菌株P(guān)seudomonas putida KT2440為宿主構(gòu)建多功能農(nóng)藥降解菌

發(fā)布時間:2018-06-18 14:30

  本文選題:同源重組 + 農(nóng)藥微生物降解; 參考:《應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報》2016年06期


【摘要】:通過富集培養(yǎng)法分離到的農(nóng)藥降解菌株存在穩(wěn)定性差、底物譜窄、安全性不明等問題.Pseudomonas putida KT2440分離自根際土壤,是國際上公認的環(huán)境安全型菌株.利用同源重組方法將4種農(nóng)藥降解酶基因pytH、mpd、chd和amy A同時整合到P.putida KT2440的染色體上,獲得了一株無抗性基因殘留的工程菌P.putida KT-pmca.工程菌KTpmca能夠同時降解擬除蟲菊酯類殺蟲劑、有機磷類殺蟲劑、百菌清和氯代酰胺類4種農(nóng)藥,百菌清降解率大于95%,甲氰菊酯、毒死蜱和敵稗的降解率均達到80%以上.此外,傳代實驗證明4種降解酶基因能夠在遺傳中穩(wěn)定存在.本研究表明工程菌KT-pmca可為微生物原位修復(fù)消除農(nóng)藥污染提供新的菌株資源.
[Abstract]:Pesticide degradation strains isolated by enrichment culture method have some problems, such as poor stability, narrow substrate spectrum and unclear safety. Pseudomonas putida KT2440 is recognized as an environmentally safe strain from rhizosphere soil. By homologous recombination method, four pesticide degrading enzyme genes, pytHnmpdchd and amy A, were integrated into the chromosome of P.putida KT2440 at the same time. An engineering strain P.putida KT-pmca. without resistance-free gene residues was obtained. KTpmca could simultaneously degrade pyrethroid insecticides, organophosphorus insecticides, chlorothalonil and chloramides. The degradation rate of chlorothalonil was more than 95. The degradation rate of chlorpyrifos, chlorpyrifos and dimethyl reached more than 80%. In addition, four biodegradable enzyme genes were proved to be stable in heredity. This study indicated that the engineering strain KT-pmca could provide a new strain resource for in situ remediation and elimination of pesticide pollution.
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鹽城醫(yī)院中心實驗室;
【基金】:國家高技術(shù)發(fā)展計劃(863計劃)項目(2012AA101403) 國家自然科學(xué)基金項目(J1210056) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新基金項目(CX(15)1004)資助~~
【分類號】:X172;X592

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本文編號:2035808


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