本文選題：嗜鹽桿菌菌株HSQAY1 + 中肋骨條藻��； 參考：《上海海洋大學》2015年碩士論文

【摘要】：赤潮是全球性的海洋生態(tài)災害問題之一,而其防治研究一直廣受關注。海洋溶藻細菌對赤潮藻類有高效的抑制作用,對環(huán)境負面影響較小,已成為赤潮防治研究的熱點之一,尤其是溶藻活性物質的發(fā)現(xiàn),為赤潮治理提供了新的方法和思路,也是目前研究的難點和要突破的重點。對中肋骨條藻(Skeletonema costatum)具有間接溶藻作用的嗜鹽桿菌溶藻菌株(Halobacillus sp.HSQAY1,Gen Bank登錄號為JX308828)由本實驗室從深圳大鵬灣赤潮爆發(fā)海域分離并保藏。本文研究了該嗜鹽桿菌的生長特征,胞外溶藻物質的理化特性,并對溶藻物質進行了初步的分離純化。主要結果如下:(1)采用平板菌落法測定了溶藻細菌HSQAY1的生長曲線,結果顯示0-8 h為遲緩期,8-40 h為對數(shù)期,40-72 h進入穩(wěn)定期,72 h后進入衰亡期;遲緩期期間細菌無菌濾液的溶藻作用不顯著,而進入對數(shù)期后其溶藻作用顯著增強,此后溶藻率基本穩(wěn)定在80.4%~93.4%之間。(2)細菌分別用p H為5.5,6.5,7.5,8.5和9.5的培養(yǎng)基培養(yǎng)48 h后,其無菌濾液的溶藻率分別為20.62%,46.10%,61.14%,62.99%,74.41%,表明弱酸性條件不利于細菌生長或合成分泌溶藻物質,而堿性環(huán)境更有利于細菌的生長或溶藻物質的合成分泌;用鹽度分別為20,25,30,35,40培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌48h,其無菌濾液的溶藻率分別為53.03%,88.13%,87.94%,41.91%和17.25%,表明鹽度為25~30時最有利于細菌生長或合成分泌溶藻物質,而鹽度過高(鹽度為40)則會抑制其生長或溶藻物質的合成。(3)菌株HSQAY1產(chǎn)生的溶藻活性物質在強酸性條件下(p H=3)喪失活性,而p H 5~11時其溶藻率在83.4%~98.4%之間;溫度在30~110℃時,其溶藻率在71.7%~94.5%之間,表現(xiàn)出一定的酸堿穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性;此外,該溶藻物質不受反復凍融(-20℃)的影響。說明溶藻活性物質不耐強酸,但有較好的耐堿性、熱穩(wěn)定性和不受反復凍融影響,有較強的環(huán)境穩(wěn)定性。(4)無菌濾液經(jīng)乙醇沉淀分離獲得的沉淀相具有溶藻活性,溶藻率高達到65.6%,而浸提相無溶藻活性;硫酸銨飽和度為60%~80%時可析出具有顯著溶藻活性的粗蛋白沉淀,超濾法獲得溶藻活性組分的分子量大于10 k Da,表明該溶藻活性物質可能是一種分子量大于10 k Da的蛋白類物質。(5)硫酸銨沉淀的粗蛋白SDS-PAGE電泳結果顯示在15~40 k Da間有3條明顯的特異蛋白條帶,高效液相色譜(SEC柱)分析結果顯示出3個峰,其中可能包含有溶藻活性物質組分。
[Abstract]:This paper studied the growth characteristics , the physical and chemical properties of bacteria sterile filtrate and the key points to be broken . The results showed that the growth characteristics of the bacteria were 20.62 % , 46.10 % , 61.14 % , 62.99 % and 74.41 % respectively . ( 4 ) The results of SDS - PAGE electrophoresis showed that there were 3 distinct bands of algae - soluble algae , and the results of SDS - PAGE electrophoresis showed that there were 3 peaks in 15 - 40 K Da .
【學位授予單位】：上海海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：X172;X55

【參考文獻】

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本文編號：1915703