發(fā)布時(shí)間：2018-11-06 12:54

【摘要】：目的:探討體外分離培養(yǎng)的新生兔氣管軟骨細(xì)胞的生物學(xué)特性。方法:通過酶消化法體外分離培養(yǎng)新生兔氣管軟骨細(xì)胞;倒置顯微鏡觀察軟骨細(xì)胞形態(tài)及生長狀況;電鏡觀察軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);運(yùn)用real-time PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)染色和甲苯胺藍(lán)染色檢測氣管軟骨細(xì)胞分泌的細(xì)胞外基質(zhì)成分。結(jié)果:體外分離、培養(yǎng)的兔氣管軟骨細(xì)胞呈短小三角形或不規(guī)則形貼壁生長。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞較多突起,孔隙較多,胞質(zhì)豐富,細(xì)胞器發(fā)達(dá),細(xì)胞內(nèi)可見大量蛋白分泌物。軟骨細(xì)胞表達(dá)I、II型膠原、蛋白聚糖等,以II型膠原和蛋白聚糖表達(dá)為主。免疫細(xì)胞化學(xué)染色I(xiàn)I型膠原和SOX9陽性,I型膠原弱陽性。甲苯胺藍(lán)染色陽性。結(jié)論:適宜的酶消化單層培養(yǎng)法獲得的新生兔氣管軟骨細(xì)胞具有分泌軟骨細(xì)胞外基質(zhì)成分的特性,可初步為體外構(gòu)建組織工程氣管治療新生兔氣管狹窄的實(shí)驗(yàn)研究提供種子細(xì)胞。
[Abstract]:Objective: to investigate the biological characteristics of trachea chondrocytes isolated from neonatal rabbits in vitro. Methods: neonatal rabbit trachea chondrocytes were isolated and cultured by enzyme digestion in vitro, the morphology and growth of chondrocytes were observed by inverted microscope, the ultrastructure of chondrocytes were observed by electron microscope. The extracellular matrix secreted by tracheal chondrocytes was detected by real-time PCR, immunocytochemical staining and toluidine blue staining. Results: cultured rabbit trachea chondrocytes grew in short triangle or irregular shape. The ultrastructure showed that the cells had more protuberances, more pores, abundant cytoplasm, well developed organelles, and a large number of protein secretions could be seen in the cells. Chondrocytes expressed type II collagen and proteoglycan, mainly II type collagen and proteoglycan. Immunocytochemical staining showed that II type collagen and SOX9 were positive, and type I collagen was weakly positive. Toluidine blue staining was positive. Conclusion: the new rabbit tracheal chondrocytes obtained by enzyme digestion monolayer culture have the characteristic of secreting extracellular matrix of chondrocytes. It may provide seed cells for the experimental study of trachea stenosis in newborn rabbits with tissue engineering trachea in vitro.
【作者單位】： 廣東省人民醫(yī)院兒科;廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院;廣東省心血管病研究所小兒心臟外科;
【基金】：“十二五”國家科技支撐計(jì)劃(No.2011BAI11B22)
【分類號】：R329.21

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：2314345