本文關(guān)鍵詞：鉛鋅脅迫下普陀山苔草（Carex putuoshan）根的差異蛋白質(zhì)表達(dá)特點(diǎn)研究

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【摘要】：本課題組在雅安漢源縣普陀山鉛鋅礦區(qū)發(fā)現(xiàn)一種新鉛超富集植物一普陀山苔草(Carex putuoshan)。該植物在鉛鋅復(fù)合污染土中,表現(xiàn)出繁殖力強(qiáng)、生物量大、耐瘠等特點(diǎn)。鑒于此,為進(jìn)一步探討該植物的鉛超富集機(jī)制,尋找其鉛超富集應(yīng)答蛋白元件,本試驗(yàn)以普陀山苔草為研究對(duì)象,通過鉛鋅復(fù)合脅迫,運(yùn)用差異蛋白質(zhì)組學(xué)原理,采用雙向凝膠電泳法、質(zhì)譜分析以及生物信息學(xué)技術(shù),對(duì)鉛鋅復(fù)合脅迫條件下的普陀山苔草根的差異表達(dá)蛋白進(jìn)行了系統(tǒng)研究,其結(jié)果如下：(1)在已有研究基礎(chǔ)上,獲得適合普陀山苔草根的雙向凝膠電泳體系,包括蛋白供試品的提取方法的選擇,獲得了蛋白點(diǎn)376個(gè),電泳圖譜清晰。(2)對(duì)其中表達(dá)量最突出的10個(gè)蛋白質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,鑒定成功9個(gè),包括7個(gè)不同蛋白,2個(gè)重復(fù)檢出蛋白,1個(gè)功能未知蛋白,質(zhì)譜鑒定為甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)、蘋果酸脫氫酶(MDH)、果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(FBA)、烯醇化酶(enolase)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PDH)、異黃酮還原酶(IFR)、植物絡(luò)合素合酶(PCS)7個(gè)酶蛋白質(zhì)。(3)對(duì)鑒定出的蛋白進(jìn)行生物信息分類,發(fā)現(xiàn)其主要定位于細(xì)胞質(zhì)中；主要參與氧化還原過程和糖代謝相關(guān)過程；多數(shù)被鑒定的蛋白質(zhì)酶具氧化還原活性。上述研究表明,普陀山苔草鉛超富集過程是一個(gè)龐大的酶活系統(tǒng)工程,其代謝主要涉及糖代謝和能量代謝,參與最為活躍的是兩大酶系即己糖裂解酶系和磷酸戊糖酶系,其中甘油醛-3-磷酸脫氫酶和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶尤其突出,因此,該兩個(gè)酶可以作為普陀山苔草根鉛鋅復(fù)合脅迫下的關(guān)鍵應(yīng)答元件蛋白代表,即通過對(duì)甘油醛-3-磷酸脫氫酶和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶表達(dá)量變化,作為普陀山苔草鉛超富集變化的重要指標(biāo),其蛋白質(zhì)分子量分別為約14.7kDa和35.91kDa。
【關(guān)鍵詞】：普陀山苔草 鉛鋅復(fù)合脅迫 雙向電泳 應(yīng)答元件蛋白
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：X173;X53
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 1. 研究現(xiàn)狀9-19
• 1.1. 鉛鋅重金屬污染9-10
• 1.1.1. 鉛污染9
• 1.1.2. 鋅污染9-10
• 1.1.3. 復(fù)合污染10
• 1.2. 植物修復(fù)技術(shù)與超富集植物10-13
• 1.2.1. 植物修復(fù)技術(shù)10-11
• 1.2.2. 植物修復(fù)原理11
• 1.2.3. 土壤植物修復(fù)過程11-12
• 1.2.4. 重金屬超富集植物12-13
• 1.2.5. 超富集植物現(xiàn)狀13
• 1.2.6. 普陀山苔草13
• 1.3. 差異蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)13-16
• 1.3.1. 差異蛋白質(zhì)組學(xué)關(guān)鍵技術(shù)14-16
• 1.4. 植物響應(yīng)逆境脅迫中的蛋白質(zhì)組學(xué)研究16-18
• 1.4.1. 植物響應(yīng)重金屬脅迫中的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究16-17
• 1.4.2. 植物根在響應(yīng)鹽脅迫中的蛋白質(zhì)組學(xué)研究17-18
• 1.5. 立題依據(jù)及研究目的18-19
• 2. 材料與方法19-26
• 2.1. 試驗(yàn)材料、試劑與儀器19-20
• 2.1.1. 生物材料19
• 2.1.2. 主要儀器設(shè)備19
• 2.1.3. 主要試劑19-20
• 2.1.4. 試劑配置20
• 2.2. 試驗(yàn)方法20-26
• 2.2.1. 試驗(yàn)材料處理20-21
• 2.2.2. 普陀山苔草根總蛋白提取21
• 2.2.3. 蛋白質(zhì)樣品的溶解21
• 2.2.4. 蛋白定量21-22
• 2.2.5. 雙向電泳操作22-24
• 2.2.6. 質(zhì)譜分析24-25
• 2.2.7. 鑒定蛋白生物學(xué)功能分析25-26
• 3. 結(jié)果與分析26-37
• 3.1. 普陀山苔草蛋白樣品制備及聚焦條件優(yōu)化26-29
• 3.2. 普陀山苔草根鉛鋅復(fù)合脅迫下差異蛋白質(zhì)譜鑒定分析29-30
• 3.3. 普陀山苔草根鉛鋅復(fù)合脅迫下質(zhì)譜鑒定的蛋白功能分析30-31
• 3.4. 普陀山苔草根鉛鋅復(fù)合脅迫下質(zhì)譜鑒定的蛋白分類研究31-34
• 3.4.1. 普陀山苔草根鉛鋅復(fù)合脅迫下質(zhì)譜鑒定蛋白亞細(xì)胞定位研究31-32
• 3.4.2. 普陀山苔草根鉛鋅復(fù)合脅迫下質(zhì)譜鑒定蛋白GO分子功能分析32-34
• 3.5. 普陀山苔草根鉛鋅復(fù)合脅迫下質(zhì)譜鑒定蛋白代謝過程分析34-37
• 4. 討論37-42
• 4.1. 普陀山苔草根蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)體系的建立37
• 4.2. 普陀山苔草鉛鋅復(fù)合脅迫下蛋白質(zhì)生物合成相關(guān)酶37-38
• 4.3. 普陀山苔草鉛鋅復(fù)合脅迫下碳代謝相關(guān)酶38-42
• 5. 結(jié)論42-44
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 致謝49

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1039330