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殼寡糖的制備、分離分析及抑菌活性研究

發(fā)布時間:2017-05-19 19:32

  本文關(guān)鍵詞:殼寡糖的制備、分離分析及抑菌活性研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:殼寡糖是殼聚糖的水解產(chǎn)物,水溶性好,生物利用度高,在抑菌、抗氧化、抗炎、調(diào)節(jié)血脂和血糖、抗腫瘤、增強免疫及活化腸道菌群中具有廣泛的應(yīng)用,因此殼寡糖已成為當今國內(nèi)外研究、開發(fā)的熱點領(lǐng)域。 采用微波輔助酶解的方法制備水溶性殼寡糖,通過乙醇沉淀法制備低聚合度殼寡糖,利用TLC、HPLC、UPLC-MS分析殼寡糖組分。采用異丙醇/水/氨水為展開劑,體積比為4/2/3時,TLC圖譜顯示殼寡糖的各個組分達到分離,斑點清晰,基本無拖尾現(xiàn)象;利用Shodex NH2P-504E色譜柱,聯(lián)合蒸發(fā)光散射檢測器,以乙腈-氨水為流動相梯度洗脫可以定量分析殼寡糖中的各個組分;利用UPLC-MS可以在沒有標準品的情況下定性鑒定殼寡糖組分,并可以鑒定殼寡糖分子中的N-乙;M分。此外,本文進一步探討了殼寡糖組分的色譜行為,發(fā)現(xiàn)殼寡糖的N-乙;菍(dǎo)致殼寡糖不完全按照聚合度大小進行色譜分離的主要原因,為殼寡糖質(zhì)量分析、組分分離提供了參考。 用聚丙烯酰胺凝膠(Bio-Gel P-2)進行單組分的分離制備,分離組分經(jīng)TLC和UPLC-MS分析鑒定后,分別確定為殼二糖、殼三糖、殼四糖、殼五糖以及殼六糖,鑒定后,其中殼二糖、殼三糖純度較高,均在96%以上,殼四糖、殼五糖、殼六糖純度稍低,還需進一步純化。 通過N-;磻(yīng)制備得到了不同脫乙酰度的殼寡糖,然后對不同脫乙酰度的殼寡糖及殼寡糖單體的抑菌活性進行研究。結(jié)果顯示pH為5時,脫乙酰度為95%、65%、45%的殼寡糖對大腸桿菌的IC50分別為2.5、5、40g/L,說明相同pH條件下,殼寡糖的脫乙酰度越高,對大腸桿菌抑制效果越好;脫乙酰度為95%的殼寡糖,在pH為5、6、7時對大腸桿菌的IC50分別為2.5、2.5、10g/L,即相同脫乙酰度的殼寡糖,pH越低,其對大腸桿菌的抑制效果越好。不同殼寡糖單體對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和尖孢鐮刀菌的抑菌活性差別也較大,殼六糖最高,殼二糖最低,氨基葡萄糖沒有表現(xiàn)出抑菌活性。如殼六糖對鐮刀菌的抑制率為70.5%,而殼二糖對鐮刀菌的抑制率只有38.8%。
【關(guān)鍵詞】:殼寡糖 微波輔助 酶解 分離分析 抑菌活性
【學(xué)位授予單位】:江南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:TQ464.1;R96
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-5
  • 目錄5-7
  • 第一章 緒論7-18
  • 1.1 殼寡糖概述7-9
  • 1.1.1 殼寡糖的原料來源7
  • 1.1.2 殼寡糖的應(yīng)用7-9
  • 1.2 殼寡糖的制備方法9-11
  • 1.2.1 化學(xué)降解法9-10
  • 1.2.2 物理降解法10-11
  • 1.2.3 酶解法11
  • 1.3 殼寡糖研究進展11-16
  • 1.3.1 殼寡糖分離方法簡介11-12
  • 1.3.2 殼寡糖分析方法簡介12-13
  • 1.3.3 殼寡糖的化學(xué)修飾及衍生物的研究進展13
  • 1.3.4 殼寡糖的抑菌性能研究13-16
  • 1.4 殼寡糖單體研究進展16
  • 1.5 本論文研究的主要內(nèi)容16-18
  • 第二章 殼寡糖的制備18-34
  • 2.1 引言18
  • 2.2 實驗材料18-19
  • 2.2.1 材料和試劑18
  • 2.2.2 主要儀器18-19
  • 2.3 實驗方法19-23
  • 2.3.1 殼聚糖脫乙酰度及分子量的測定19-20
  • 2.3.2 殼聚糖的微波降粘20
  • 2.3.3 殼聚糖的酶解20-22
  • 2.3.4 酶解組分的數(shù)均分子量測定22-23
  • 2.4 結(jié)果與分析23-33
  • 2.4.1 殼聚糖脫乙酰度測定23-24
  • 2.4.2 殼聚糖的微波降粘24-29
  • 2.4.3 殼聚糖的酶解29-32
  • 2.4.4 酶解組分的數(shù)均分子量測定32-33
  • 2.5 本章小結(jié)33-34
  • 第三章 低聚合度殼寡糖的色譜行為分析及單組分的分離制備34-49
  • 3.1 引言34
  • 3.2 實驗材料34-35
  • 3.2.1 材料和試劑34-35
  • 3.2.2 主要儀器35
  • 3.3 實驗方法35-38
  • 3.3.1 低聚合度殼寡糖的色譜行為分析35-37
  • 3.3.2 殼寡糖單組分的分離制備37-38
  • 3.4 實驗結(jié)果38-48
  • 3.4.1 低聚合度殼寡糖的色譜行為分析38-45
  • 3.4.2 殼寡糖單組分的分離制備45-48
  • 3.5 本章小結(jié)48-49
  • 第四章 不同脫乙酰度殼寡糖及殼寡糖單體的抑菌活性研究49-58
  • 4.1 引言49
  • 4.2 實驗材料49-50
  • 4.2.1 材料和試劑49
  • 4.2.2 主要儀器49-50
  • 4.3 實驗方法50-51
  • 4.3.1 不同脫乙酰度殼寡糖的制備50
  • 4.3.2 殼寡糖的抑菌活性研究50-51
  • 4.4 實驗結(jié)果51-56
  • 4.4.1 殼寡糖的酰化修飾51-52
  • 4.4.2 殼寡糖的抑菌活性研究52-56
  • 4.5 本章小結(jié)56-58
  • 主要結(jié)論與展望58-60
  • 主要結(jié)論58-59
  • 存在的問題及展望59-60
  • 致謝60-61
  • 參考文獻61-66
  • 附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文66

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 何煒,韓笑,譚天偉;用NH2P-504E柱測定殼低聚糖聚合度及含量[J];北京化工大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年04期

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3 楊春貴;王紀亭;;殼寡糖在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究進展[J];山東畜牧獸醫(yī);2009年04期

4 屠美,崔瑩,周長忍,鄒翰;肝素化殼聚糖季銨鹽/殼聚糖復(fù)合膜抗凝血性能的研究[J];功能高分子學(xué)報;1997年03期

5 田冶,焦延鵬,陳義康,李立華,周長忍;不同脫乙酰度對殼聚糖表面物理及吸附性能的影響[J];廣州化學(xué);2005年02期

6 ;殼聚糖在飼料中的應(yīng)用[J];北方牧業(yè);2012年13期

7 周孫英,陳盛,唐威;殼聚糖的超聲波降解[J];海峽藥學(xué);2002年03期

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9 張法;劉剛;;糖肽的固相合成[J];化學(xué)進展;2006年05期

10 賈之慎,李奇彪;雙突躍電位滴定法測定殼聚糖脫乙酰度[J];化學(xué)世界;2001年05期


  本文關(guān)鍵詞:殼寡糖的制備、分離分析及抑菌活性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:379662

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