發(fā)布時間：2017-04-17 13:22

  本文關鍵詞：裙帶菜中巖藻黃質、巖藻多糖的綜合提取純化研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：裙帶菜屬于褐藻門翅藻科植物,營養(yǎng)價值高,可藥食同用,是海洋主要經(jīng)濟藻類之一,在我國資源十分豐富。巖藻黃質屬于類胡蘿卜素中的葉黃素類脂溶性色素,巖藻多糖是一種含巖藻糖的硫酸酯雜多糖,二者都具有多樣的生理功能,都是裙帶菜中極其重要的生物活性物質,具有極高的經(jīng)濟價值。目前國內對裙帶菜的研究不多,主要集中于其蛋白質、纖維素等營養(yǎng)成分開發(fā)利用方面,對巖藻黃質、巖藻多糖的提取利用涉及相對較少。 本論文對產(chǎn)自浙江舟山群島地區(qū)的裙帶菜進行了研究,試圖對其重要活性成分巖藻黃質、巖藻多糖等進行綜合提取利用,并對藻類物質所固有的砷含量極高的問題進行了脫砷方法摸索,實驗結果如下： 建立巖藻黃質和巖藻多糖中巖藻糖含量的HPLC檢測方法,通過色譜峰分離度、標準曲線、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、加樣回收實驗等多方面綜合考察,顯示兩種檢測方法中各分析組分均可達到良好的基線分離,峰形勻稱,無干擾,專屬性好,結果穩(wěn)定,準確度高。同時,該檢測方法也可為當前良莠不齊的市場產(chǎn)品質量提供參考性檢測依據(jù)和標準。 從裙帶菜中提取分離巖藻黃質,分析單因素實驗因素,并通過正交試驗對提取條件進行優(yōu)化。最終確定預處理后的裙帶菜原料,加入12倍的提取溶液,95%丙酮浸提2.5h,提取三次,效果較好。提取后的浸提液經(jīng)超濾除渣,用硅膠柱層析做進一步的分離純化,最終巖藻黃質產(chǎn)品純度可由原來的2.31%提取到24.2%,回收率達90.9%。 從裙帶菜中提取分離巖藻多糖,分析單因素實驗因素,同樣以正交試驗進行提取條件的優(yōu)化。最終確定預處理后的裙帶菜原料,加入10倍量的pH2.0提取溶液,95℃水浴浸提2.5h,三次,效果較好。巖藻多糖去蛋白方法以酶解法效果較好；脫色方法綜合考慮,采用AB-8大孔樹脂吸附較好。進一步純化可采用乙醇分級醇沉、DEAE-Cellulose柱層析純化等方式。 比較常溫(檸檬酸)水浸泡對裙帶菜原料中重金屬砷含量的去除效果,最終確定以pH3.0檸檬酸水浸泡過夜(約10h),中間更換溶劑3次,即每浸泡3h更換檸檬酸水1次,原料中砷含量可由處理前128.6ppm降到9.2ppm,去除率達92.8%。效果顯著,操作方式也極其簡單。 LSA-AS螯合樹脂對檸檬酸水預處理后的裙帶菜浸提液進行進一步除砷處理,實驗結果顯示LSA-AS樹脂可將巖藻黃質浸取物由上柱前的6.8ppm降低到0.7ppm,砷去除率為89.7%；同樣,對于巖藻多糖萃取物,砷含量由7.3ppm降低到0.9ppm,除砷率為87.7%。經(jīng)由檸檬酸水常溫浸泡預處理和LSA-AS螯合樹脂后處理,兩道脫砷工序結合,冷凍干燥,終產(chǎn)品巖藻黃質0.7ppm和巖藻多糖0.9ppm的砷含量也完全符合《中國藥典》和市場對這兩個產(chǎn)品的質控要求。 整合巖藻黃質、巖藻多糖兩個成分的提取純化路線及脫砷工藝,確定裙帶菜主要活性成分綜合提取利用的最終工藝流程,即裙帶菜水洗去鹽漬后,pH3.0檸檬酸水浸泡過夜,加入10倍量的pH2.0酸水溶液,95℃水浴浸提2.5h,三次,分別收集濾液和濾渣；濾液部分分別經(jīng)過酶解去蛋白、AB-8樹脂脫色、LSA-AS樹脂脫砷、乙醇分級醇沉、DEAE-Cellulose柱層析純化等方式,制備巖藻多糖；而濾渣經(jīng)陰干后,加入12倍的丙酮溶液浸提2.5h,提取兩次,LSA-AS樹脂脫砷、硅膠柱層析純化等工藝,可同時制備巖藻黃質。 進行驗證實驗,巖藻黃質提取率為0.074%,巖藻多糖為3.94%,每100g裙帶菜可提取巖藻黃質0.30g,HPLC含量為24.6%,砷含量為0.7ppm。同時,每100g裙帶菜可提取巖藻粗多糖4.48g,其中總多糖含量為87.5%,有機硫酸根18.9%,巖藻糖20.7%,蛋白質2.9%,砷含量為0.9ppm。本文工藝所得巖藻黃質和巖藻多糖各項指標均可達到市場要求。
【關鍵詞】：裙帶菜 巖藻黃質 巖藻多糖 巖藻糖 柱層析 LSA-AS 螯合樹脂
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：TQ461
【目錄】：

• 目次5-7
• 致謝7-8
• 摘要8-10
• Abstract10-12
• 1 文獻綜述12-28
• 1.1 裙帶菜的植物來源12-13
• 1.2 裙帶菜中含有的主要活性成份13-24
• 1.3 裙帶菜中砷存在的問題24-25
• 1.4 裙帶菜的栽培種植分布與前景25-26
• 1.5 本課題的研究意義與思路26-28
• 2 巖藻黃質與巖藻多糖檢測方法的建立28-37
• 2.1 高效液相色譜法測定巖藻黃質的含量28-31
• 2.2 苯酚-硫酸法測定巖藻多糖的總含量31-32
• 2.3 高效液相色譜法測定巖藻糖的含量32-34
• 2.4 有機硫酸根的測定34-35
• 2.5 蛋白質測定方法35-36
• 2.6 本章小結36-37
• 3 巖藻黃質的提取分離純化37-46
• 3.1 儀器、材料與試劑37
• 3.2 巖藻黃質提取實驗方法與分析37-41
• 3.3 硅膠柱層析法純化巖藻黃質41-44
• 3.4 本章小結44-46
• 4 巖藻多糖的提取分離純化46-56
• 4.1 儀器、材料與試劑46-47
• 4.2 巖藻多糖提取實驗方法與分析47-51
• 4.3 巖藻多糖純化實驗方法與分析51-55
• 4.4 本章小結55-56
• 5 脫砷工藝探索56-64
• 5.1 儀器、材料與試劑56
• 5.2 重金屬砷的檢測方法56-57
• 5.3 目前幾種常用的海藻重金屬脫除方法57-58
• 5.4 常溫浸泡除砷實驗58-60
• 5.5 螯合樹脂除砷實驗60-62
• 5.6 本章小結62-64
• 6 裙帶菜中巖藻黃質與巖藻多糖的綜合提取純化工藝64-66
• 7 結論66-68
• 參考文獻68-74
• 附錄Ⅰ 市場巖藻黃質5%產(chǎn)品規(guī)格單74-75
• 附錄Ⅱ 市場巖藻多糖85%產(chǎn)品規(guī)格單75-76
• 作者簡歷76

【參考文獻】

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  本文關鍵詞：裙帶菜中巖藻黃質、巖藻多糖的綜合提取純化研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：313321