北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
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北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究 摘 要
北五味子具有極高的藥用和營養(yǎng)價值, 是一種新型的 “ 藥食同源”功能性保
健食品。 五味子鮮果中含有蛋白 . 脂肪09, 質(zhì)11, 9 6 .% 還原糖1.% 總花青素02; 09, . % ' 北五味子種子的油中含揮發(fā)油、 木脂體8, % 幽醇0]及游離脂肪酸。 .% 揮發(fā)油大部
分為砧類成分,尚含有少數(shù)醛、 酮、醇及酸、酉等含氧成分。 旨 五味子主要有效成 分為木脂素類化合物。 包括五味子素( hsnrn,五味子醇( hsdo )、 S i di) c a S iarl c
去氧五味子素 ( oyciadi)、¥ D xshsnrn e 一五味子素 ( -ciadi) y hsnrn及偽- S y 五味子素( ed-。樱瑁螅睿颍睢⑽逦蹲涌峒祝 hsnhrn 、五味 一 P uo y iadi) s -c S iatei A c )
子酷乙、丙、丁、戊 (ciatei B C D E 及五味子醇甲和醇乙等多種 Shsnhrn , ) , , 成分,具有抗菌、抗氧化、抗衰老、保肝護(hù)心、 抑制中樞神經(jīng)等多 種功效。 食品腐敗變質(zhì)不僅會使食品喪失營養(yǎng)價值, 還會造成食物中毒。 食品腐敗的
原因包括物理、 化學(xué)、 微生物等四個方面的因素, 酶、 其中微生物作用最為嚴(yán)重。 添加防腐劑、 保鮮劑是延長食品保藏期的重要方法之一, 因其使用方便、 有效而 被普遍采用。 近年來, 隨著人們生活水平的不斷提高和保健意識的不斷增強(qiáng), 天 然、 綠色、 無污染的安全食品愈來愈受到廣大消費(fèi)者的歡迎。 廣譜、高效、 低毒 ( 或無毒) 多功能的保鮮劑成為當(dāng)前天然食品保鮮劑的主流, 、 其需求量迅速增
加。
本研究采用超臨界二氧化碳萃取法、 乙醇提取法和水提法等不同提取方法對 五味子木脂素這 一 功效成分的提取方法進(jìn)行研究, 并研究各提取物對細(xì)菌的抑制 作用及其最低抑菌濃度(I) MC,研究結(jié)果表明:
L 超臨界C 2 0萃取北五味子木脂素的最佳萃取工藝參數(shù)為:原料粒度為 .
6 8目 投料 30/ 萃取壓力為3 Ma 萃取溫度為 5 , 0. , 量為 0g罐, 0 0 , p 4' 萃取時間 C 為1 mn C , 5/。 2 i, 流量1Lh 北五味子總木脂素的萃取率和出料率分別可達(dá)1 2 0 O .4 0
% 89 。 和2.9%
2 乙醇提取北五味子木脂素最佳提取工藝為:4 . 倍量8% 0乙醇提。 次,每 次3。北五味子總木脂素的提取率為074% h .0 。 3 超臨界二氧化碳萃取法萃取五味子總木脂素的萃取率是乙醇提取法的
14倍,且遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于水提法為00 I 的提取率。 . 5 .1 % 4 .北五味子超臨界 C 2 0萃取提取物、乙醇提取物、水提取物對大腸桿菌的 最低抑菌濃度分別為: .% 12 和 12 ;對金黃色葡萄球菌,三者的最 25, 5% . . 5% 低抑菌濃度分別為: 9 12 和 5% 醉提取物對兩種菌的抑制效果均高于 5, 5% 0 ' . 。乙
超臨界提取物和水提取物。
7 .五味子不同工藝提取物的抑菌效果均低于苯甲酸鈉和山梨酸鉀 _ 關(guān)鍵詞:北五味子,木脂素,提取,抑菌作用
Su y te。颍 o t ho g o lnn i f c s i n re td o h et t n nl y i as r t s s da n x a i e c o f g n u c a u h
cies ( i n r c ies bi ) d。 r s s o te rc hn nis s da。睿睿 a l h t i t i f et t sh a h s l a a e o a s h x a s n
Ab t a t sr c
Si nr ci ni(u zBi hs。 e h h。 i l nt i avl , oe h ad h es T r . al etm l i m in ad。 o l e ii n s a n s c ) l a x e y e c a n u i n a t g t u s
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t ha, up so c tl os e a so . h e th s r sn。 n vus t n o e。颍 p e i e a e e n r y m s d n
T e d。颍 dt i ao nt cn s fo t l e nttnl ebt cr h fo cr t r r i o ol a cue。洹 o t u i avl , a o。 o o u e o tn n e y a o o h r i s e o a u u l a s
c a f d。 i . f o r t o pi n g Te o d ee oo n h o
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p s ao t eBc s oi e y s ieei bt s g e l. c t s re tn .。 e。 a tu , f te iu d rl I r e ya , e r i i e u f s o s。悖 u s e ay n n e v m s e f e n e r a n wtt polli sna a t hah c sos suc s g ac et l g h ep in t dr n h etc e c u e n an e n m n o i e e g d e。 a o i n s i n e , h v a d r n e h t se f d t nta t g e, pltnr ir e e t gn ac s e ' h a t o o h ar, r n t ouo-e s i d ee l u r e y f u lh e h li fe e v h f o e e e c e r o m s n w l m i r sg . a s cu h h f-ac, -x a o a ps eo e e i l Bod p tm, p o mne hpoin r s )、 c n an y r - er c i er g r y t c t( s i e m l ucoaa ian a nbcm s。濉。 e o c r t r f d ian uin i l。螅欤纭 t e h mita f e nta o atti t tn n ti g e f t e o t a s m u n a l nslg r r u o
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Tipp sd d tho g cni n xai s inrlnsb s e rc C 2 h a r。 t e nl y di oetcn c s d i o y ri a 0 s。 t e h c o o t f tg a a e u ct l u e o r h g p i
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V
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V1
獨(dú) 創(chuàng) 性 聲 明
本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成 果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人己 經(jīng)發(fā) 表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證 書 而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明
確的說明并表示 了謝意。
欣
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i年了/ 7 月。 :
‘ 月; 年矛 / } 。
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
 ̄‘月 , 幾一 ,
o 呂 l i
11課題來源 .
本課題來源 于吉林省科技廳重點(diǎn)科研項目 “ 利用北 瓦 味子生產(chǎn)抗疲勞保健食
品關(guān)鍵枝術(shù)的研究”,合同編號:2001 6 0522 . -
12北五味子研究與應(yīng)用概況 .
北五味子( ha r h e iT c)。鞂購V義 cs d cn s ( r . a . S in a ns z Bi) i u l 木蘭科 物, 產(chǎn)于 植 主 我
國東北。 中藥五味子的主要藥材為北五味子的干燥成熟果實(shí), 呈不規(guī)則球形或扁
球形, 直徑5 m, -8m 表面紅色、 紫紅色或暗紅色, 皺縮, 呈油潤, 果肉柔軟, 有 的表面呈黑紅色或出現(xiàn) “ 白霜”,內(nèi)含種子12 腎 -粒,’形,表面棕黃色, 有光澤,
種皮薄而脆。 果肉氣 味酸; 破碎后 微, 種子 有香氣, 味辛微苦【 幻 。 《 中華人民共和國藥典》收錄有2 種五味子:北五味子( had ci n s S inr h es c s a i n
( r . a 〕 五味子 (cs d s e ne Rh.Wl ' 其中 T c)。旌湍 u z Bi l S in a。 tr e e i) ha r p ah a。洌簟 2 h s ] 。 北五
味子習(xí)稱為 “ 五味子” ( 《 7 本草綱目 記載: “ 1 》中 五味子今有南北 之分, 南
產(chǎn)者紅北產(chǎn)者 入 黑, 滋補(bǔ)藥, 用北者為良 } 必 !保 1
五味子為著名中藥, 其應(yīng)用己 00 年的歷史( 具有益氣斂肺, 有20多 5 ] 滋腎澀 精, 生津止渴及止瀉斂汗的 作用。 常作為方 藥中的 佐藥用于 治療多 種疾病‘ 從 i f l 。
5年代開始,國內(nèi)外一些學(xué)者對五味子展開現(xiàn)代藥理學(xué)研究。 0 0 7年代初, 我國臨 床應(yīng)用五味子制劑治療慢性肝炎,可明顯改善肝功能,降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶
( P ) 對非肝炎 S T, G 性的轉(zhuǎn)氨酶升高 也有明顯 作用f]。 ? 年代以 s 0 。 來,中國、日
本和前蘇聯(lián)的學(xué)者們運(yùn)用現(xiàn)代藥理學(xué)辦法對五味子的生化、 藥理活性、 臨床試驗(yàn)、
藥物動力學(xué)和毒理學(xué) 進(jìn)行了 深入的 〔5 迄今, 外己 十 種五 較為 研究1 1 0。 - 1 國內(nèi) 對二 余 味子 物進(jìn)行了 , 科植 研究 分離鑒定出 2 個成 其中 5多 木脂素〔。 大約 0 分, 1 個為 0 。 伺
五味子科木脂素結(jié)構(gòu)類型多, 立體化學(xué)結(jié)構(gòu)復(fù)雜, 而且生物活性廣泛。 除了眾所
周知的保肝降酶作用外, 近年來發(fā)現(xiàn)五味子科木脂素成分對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有抑制 作 用, 還具有抗艾 滋病毒、 和P F 抗癌 A 拮抗等多種活性[1 13 '1 -。因此,國內(nèi)外對該
領(lǐng)域的研究十分活躍。
121五味子的化學(xué)成分 ..
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
卜 五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
五味子果實(shí)中總木脂素含量為1. 92 。早在6年代初期就從五 81 -1 %' ' .。 % 0 味 子果實(shí)中分離出了五味子素(cinr ) Sh adn 、五味子醇( h ar )、 s i S id l 去氧五味子 cs o
素 (exs inr)、Y 五味子素 ( c s dn及{一 一 Doy hadn cs i 一 Y。瑁 r) ) y 五味了素 - in i S ( e oY inr) P u - cs dn等成分‘a 5 方圣鼎等從華中 s d - ha i S ' 1 年, s 9 1。 五味子果實(shí)中分離
得到一木 類化合物, 名為 脂素 命 五味子酷甲( hahiA [ S in en。 cs tr ) 0 l
圖11木脂素類成分的基本母核 -
f e-t bs m t r。 s。 as iu l1 ac。 mcu olnn gr h i o e ie f e g
C 場4
圖12五昧子酩甲分子結(jié)構(gòu) - Fgr -m l u r c roSh at r A i e 2 e l s te cin en u l o c a t u f s hi u r
隨 得五 酷乙 丙、 戊 (cs t r B C D E 及 之又陸 續(xù)分 味子 、 丁、 Shah i , , in en , )
五味子醇甲和醇乙, 并推定了它們的結(jié)構(gòu), 同時并改正了前人推定的五味子丙素
( ueu 及五 醇乙 結(jié) " 1 9 Iy 從五 子 實(shí)中 5 W wi C s ) 味子 的 構(gòu)". 年,k a 9 7 e 等 味 果 分出
種新的幾苯環(huán)辛二烯型木脂素: 戈米辛A B C F G。 i A B C F , , ( ms , , . ,。 i n , ,
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北五味子木脂素提。彼嚰疤崛∥镆志饔玫难芯 _
G ),并利用化學(xué)方法和光譜分析確定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)。 此后,等還先后分得
了 戈米辛 (o i H 、 酞戈米辛 (ney o i H , 酞戈米 H ms ) 當(dāng)歸 G i n H gl l ms ) 惕各 A og i n 辛 H。 y o i H 、 酞戈米辛 (e ol ms H 、 (iol ms )苯甲 Tl g i n H n y o i )戈米辛E。恚 E . Bz g i n (o i ) G i n
戈米辛O ms O 、 戈米辛D ms D 戈米辛 (o in 、表戈米 (o i ) G i n (o in G i )、 N ms N G i )
辛O。 ms O (po i )、當(dāng) 酞戈 Q。纾 l ms Q 、 辛丁和薊戈米 Eg i n 歸 米辛 (n og i ) 戈米 A ey o i n 辛 (e ms) 同 分 它 化學(xué) 構(gòu)『s 1 0 后,k a 又 H g i , 時 析了 們的 結(jié) z1 9 年以 Iy 從 P o i r n "。 8 - e e等
五味子果實(shí)中分離出了 ()一 一 戈米辛K , ( 一 , + 戈米辛K , ( ) 戈米辛K ) s +一
() 戈米辛L, () 戈 -一 , 一 一 米辛L, ( 一 z 士) 戈米辛M, + 一 , ( 戈米辛M , ) 2 惕各
酞戈米 (gy o i P、 歸 辛P l l ms ) 當(dāng) 酞戈米 P。纾铮 ms P、 歸 T og i i n 辛 (n l g i ) 當(dāng) 酸戈米 A eyo i n 辛 、 歸酸 米辛。 苯甲 異戈米 。Bn ys o i )、 味子素、 。 當(dāng) 異戈 、 酞 辛 ( z l gms e oi o i 異五 n 戈米辛RGms R 、 辛S 戈 (o i ) 戈米 、 米辛T i n 等五味 脂素 〔 ‘ Tn 從華 子木 成分3 〕 i 等 O。 a 3
中 五味 子 分離 出 白色片狀 結(jié) 晶 ,其 為四氫 吠喃 衍 生物 Glln aei和 ba
Gla , n s的 體 構(gòu) 9 宋 志 從四 和 南 紅 五 子 ari eg nn 立 異 體〔。 萬 等 川 云 產(chǎn)的 花 味 gr Vr ei n a = ]
中(. ioa deWi ) Sr r v R h. l 分得8 u f bl e t。 s 個木脂素成分,即五味子 丙素(u。椤 w w zs e i u
C) 紅花五味子醋、 、 五味子酚乙、 五味子酚和G ms 0 " 劉嘉森等從湖北利 o i "。 i n
川 味子( ha rs 產(chǎn)五 S in a 特定 中分 得6 合物: cs d p種名 ) 離 個化 表安五 2 一 輕基 酸,, 二 3 丙 基十八酸酷、 味子酚、cz d nad [-ha riad 一 醇, 五 S in oic和 ss in oc 和R 谷幽 ha r c i ocz d l c i 其中表安五酸為首次從天然界分離得到l 陶勇等從宜賓產(chǎn)翼梗五味子果實(shí) a + l ( ha r h r C r ) 得7 - 基四 木脂 構(gòu), S in a e y lk 分 個1 cs d . l e n a 酮 氫蔡 素結(jié) 現(xiàn)又分得 個 脂 4木 素化合物: 味子 p -o i ) 一 脂素(Awla 、 前五 素(e ms ,( 安五 rG i + n ) d nugn) 五味子 - i 酚
(ha e l 表 施 醚(incce y trI S in n) 恩 辛甲 e- -hi mtl。 csh o和 p si e ee a E n h b s 1
另外,曾 有報導(dǎo)五 味子鮮果中 含有蛋白 . 脂肪。9, 質(zhì)1t, % .% 還原糖 1 9, 0% . 總花青素 02(; .% 北五味子種子的 含 3 6 3 油中 揮發(fā)油、木脂體 8,華 01 % 醇 . % 及游 離脂肪酸。 揮發(fā)油大部分為菇類成分,尚 含有少數(shù)醛、 醇及酸、 旨 酮、 酉等含氧成
分[,。 3B ,〕 一
122五味子的藥理作用 ..
1221對肝臟的作用 ...
包天桐、 劉耕陶等[用四 3 氯化碳、 9 1 硫代乙 酞胺和乙 炔雌二醇環(huán)戊醚引起小鼠
肝損傷為模型,發(fā)現(xiàn)五味子的醇提物和從五味子中分離出的五味子甲素、乙素、
丙素、 醇甲、 醇乙、 旨 和酷乙 酉甲 均有不同程度的降低因化學(xué)物質(zhì)引起的血清轉(zhuǎn)氨 酶升高作用。 電鏡研究表明, 注射四氯化碳后, 小鼠 肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變 化, 如粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒、 線粒體腫脹, 并有大量脂肪滴存在。 用五味子醉提物
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北五味子木脂素提取工藝及 提取物抑菌作用的研究
治療的小鼠, 「 月細(xì)胞的上述超微結(jié)構(gòu)均明W k 減輕1。 注射四氯化碳后產(chǎn)生肝 9 大鼠 0 1 小葉中心壞死,除堿性磷酸酶外, T , A P 嗜堿質(zhì)、 線粒體、 N ,糖原、酸性磷 RA
酸酶、 墟拍酸脫氫酶、 細(xì)胞色素氧化酶和單胺氧化酶的活性均降低, 并有大量中
性脂肪滴出現(xiàn)。經(jīng)五味子制劑治療后,肝小葉壞死區(qū)縮小,嗜堿質(zhì)、線粒體、 RA N 和糖原增多, 所用各種組織化學(xué)酶活性均增高,而中性脂肪滴顯著減少。
用五 味子醇提物, 先2小時 預(yù) 4 給藥能顯 低大 量撲 t 40 k) 著降 劑 熱L 0 m g肝中 痛( g l
毒所致的小鼠死亡率, 并防止肝內(nèi)谷肢甘膚的 耗竭, 增強(qiáng)肝微粒體代謝撲熱息痛 的 速度, 血中撲熱息痛含量下降[ , a臨床應(yīng)用五味子制劑治療各型傳染性肝炎的 資料已有上干例的報道。 近期降血清轉(zhuǎn)氨酶總有效率達(dá)8%以上, 4 下降至正常者 為7%左右,五味子制劑對藥物性肝炎降S P 作用也報顯著。 5 GT
1 .. . 22對中 2 樞神經(jīng)的作用 鈕心A等[發(fā) 。 現(xiàn)五味子醇提物及五味子 對中 l 4 l , 醇甲 摳神經(jīng)系統(tǒng)不但有安定作
用, 而且還有抗驚厥作用。 腹腔注射明顯延長小鼠 戊巴比妥納及巴比妥納的睡眠 時間, 減少小鼠自 主活動, 并加強(qiáng)利血平及戊巴妥納對自主活動的抑制作用。 對 抗咖啡因, 苯并胺對自主活動的興奮作用, 醇甲對抗M S 戊四哇、 E 、 葵堿及北美 黃連堿的強(qiáng)直性驚厥, 抑制小鼠由電刺激或長期單居引起的激怒行為, 對大鼠回
避性條件反射及二級條件反射有選擇性抑制作用, 大劑量使大鼠 產(chǎn)生木僵, 該木 僵可被腦室注射D所對抗, A 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看來, 醇甲有廣泛中樞抑制作用,并且 有
安定藥的特點(diǎn)。
1223抗氧化作用 ... 黃治森[從華中五味子分離得到的五 4 9 7 味子酮和從五味子中 分離得到的五味 子乙 素、五 味了 二醇對維生素C A P 或由 e 1 氨酸誘發(fā)的大鼠 肝、 - D H F[- N ' 半膚 ' 腦、 腎 微粒體的脂質(zhì)過氧化有顯著的抑制作用, 其作用強(qiáng)度為五味子酮> 五味子乙素> 五味子二醇,比抗氧化劑維生素E 的作用強(qiáng)。 ` 對O一 的清除是這些成分抑制脂質(zhì)過 氧化的機(jī)理之一。 五味子酚對阿霉素半酮自由基信號無顯著性影響, 但對其產(chǎn)生
的 H有顯著抑制作用〔 O a , 7 1 .. . 24對免疫功能的 2 影響 用五味子粗多 給小鼠 0m/ - 0 g g 次灌胃, 糖 按l g g 2 m / 多 0 k 0 k 能明顯 提高小鼠 的 耐缺氧能力, 具有抗疲勞作用, 亦能使正常小鼠胸腺和脾臟的重量增加, 并增強(qiáng) 小鼠 靜脈注射膠體碳粒的廓清速率[。 4 環(huán)磷酞胺是一常用抗癌藥物,具有抑制 5 ] DA N 合成,致全血細(xì)胞減少的細(xì)胞毒性。用環(huán)磷酞胺制作白細(xì)胞減少的動物模 型, 分組給藥。 實(shí)驗(yàn)表明五味子粗多糖在升高白 細(xì)胞的同時, 可對抗環(huán)磷酸胺的
免疫抑制作用, 使小鼠的胸腺和脾臟重量增加, 說明五味子粗多糖可提高肌體的
免 力, 疫 增加肌體 對有害 刺激的 抗力, 輕 抵 減 肌體損 4 傷‘ 6 1
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北五味子木脂系提取〕藝及提取物抑菌作用的研究
L225抗衰老作用 ..
環(huán)核昔酸(A , ) C MP C MP 是細(xì)胞內(nèi)第 一 G 信使,在生命活動調(diào)節(jié)和疾病發(fā)生 發(fā)展巾具有重要作用, 常作為藥物抗衰老作用的 種指t。 h ' 用 味子喂養(yǎng)老年大 1 l
鼠 個月i 五 能 提高心 C M 含 C M /G P 值, 低 A P 2 [, 味子 顯著 7 ) 肌 A P 量、 A P M 比 降 C M C
磷酸二酉酶活性。 旨 五味子浸出液能延緩小鼠大腦皮質(zhì)毛細(xì)胞基膜增厚, 降低毛細(xì)
血管月增長率, 改善大腦皮質(zhì)內(nèi)的血液供應(yīng)。 通過小鼠壽命試驗(yàn), 給藥組較對照
組壽命 著延長u 這說明 子 顯 i。 s ] 五味 確有延 壽的 年益 作用。
1226抗腫瘤作用 ...
劉 生 [ 體外 胞 養(yǎng) D - A 培 4h在x 五 子 9 g 用 細(xì) 培 T R N 法, 養(yǎng) 2 一 味 素 9 /g 力 等4 9 ] D , um
時,對小鼠腹水型肝癌細(xì)胞,小鼠58-癌細(xì)胞和人胚肺纖維細(xì)胞D A 10 V N 合成的 平均抑制率分別為8 %,。 0 。小鼠腹水型肝癌細(xì)胞經(jīng)1, 3和4 h 5 7 和5 6 2 2, 8 4 6
培養(yǎng)后, 用鋇鹽 提取法分 離其核蛋白 在Y五 , 一 味子素 9g g 核蛋白 抑制 9 / 時, um 的
率依次為1 %,。,。,。ィ 2 3 0 3 7 3 3
1227對心血管系統(tǒng)的影響 ... 五味子有血管舒張作用, 從五味子中分離出來的五味子素、 米辛A B C 一 戈 , , , D, ,- 3 N G 1, , 等木脂素成分對由 G 2 a1 1 P F 和CC2 。 所引起的離體狗腸系膜動脈收縮 具 有緩解作用‘。 5 戈米辛J 對于 離體心臟具有增加冠脈血流的作用。 0 1 鈉鹽 豚鼠 1228對呼吸系統(tǒng)的影響 ... 五味子煎劑靜脈注射,對正常兔、麻醉兔和犬,都有明顯的呼吸興奮作用, 使呼吸加深, 加快。 并且能對抗嗎啡的呼吸抑制作用, 中和其酸度, 作用略減弱, f劑亦有同樣的教果, f 呼吸興奮的同時, 血壓顯著下降。 切除迷走神經(jīng)和頸動脈
竇區(qū)神經(jīng)后, 呼吸興奮作用仍然存在。 由此認(rèn)為其呼吸興奮作用系對呼吸中樞直 接興奮的結(jié)果〔。 5 用香煙熏吸造成小鼠 , ] 慢性支氣管炎, 用五味子防治, 結(jié)果表明, 五味子對慢性支氣管炎無明顯防治作用。 但可降低動物死亡率, 可使支氣管士皮
細(xì)胞內(nèi) N 增多, RA 對支氣管上皮細(xì)胞功能有一定的增強(qiáng)作用〔 5 2 1
1229抗菌的作用 ... 五味子 在體外有殺蛔蟲作用〔。 醇浸液在體外對炭疽桿菌、 5 其乙 9 ) 金黃色葡 萄 球菌、白色葡萄球菌、副傷寒桿菌A 、 和B 肺炎桿菌、傷寒桿菌、志賀氏 痢疾桿 菌、異型痢疾桿菌、 霍亂弧菌、 腸炎沙門桿菌、 產(chǎn)氣桿菌、 變型桿菌等皆有抑制 作用L。 5 五味子也對紅色毛菌、 樣毛疾菌、 抱子菌、 4 ] 石膏 大小 豬小抱子菌、 奧杜
盎小抱子菌等都具有抑菌和殺菌作用( 5 5 ]
1221 ...0毒副作用
五味子 g 灌喂小鼠,二日 未見死亡, 毒性較低。 。 5k / 內(nèi) 說明 五味子脂肪油
1 1 / 灌喂小鼠,1 6分 0 5k - gg 5 0 鐘后出 - 現(xiàn)呼吸困 運(yùn)動減少,1 日 難, - 后死亡。小 2
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北五味子術(shù)脂索提取工獷及提取物抑菌作用的研究
鼠1 l 服其種子揮發(fā)油02妙 9 .8 后,呈抑制 狀態(tài),呼吸困 難, 共濟(jì)失調(diào),1 小時 - 3
內(nèi) 部 亡6 全死1 5 ]
盼床 仁 用各種五味子制劑治療各種肝炎, I 一般無副作用, 個別病人服藥后有 舌燥、異昧、胃部不適、全身發(fā)熱感,極少數(shù)病人有惡心州。
123五味子在食品工業(yè)中的應(yīng)用及其開發(fā)前景 ..
五味子具有極高的藥用和營養(yǎng)價值, 是一種新型的 “ 藥食同源” 功能性保健
食品,其果實(shí)在國際上己 一種新興食品工 成為 業(yè)的重要原料〔。 側(cè) 五味子作為食品原料, 特種原料。 屬于 特種原料是指營養(yǎng)含量全面、 合理或 具有多種醫(yī)療保健功能的食品, 包括全營養(yǎng)食品類和藥食兩用食品類。 五味子屬 于 藥食兩用食品類原料。 由于五味子的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用, 被廣泛的運(yùn) 己
用在食品工業(yè)中。 目前我國市場上主要開發(fā)出五味子果酒、五味子果醬、 五味子果酪、五味子
果凍、 五味子糖煮果、 五味子果汁、 五味子口服液、 五味子果糕、 五味子嫩葉茶、
五味子食用色素、 五味子香精、 五味子食品防 腐劑等一系列產(chǎn)品〔 0 近年對五 S1 . 6 。 味子果汁、 飲料制造工藝方面進(jìn)行研究, 發(fā)現(xiàn)五味子果實(shí)中含有抗氧化劑, 產(chǎn)品 不需要添加防腐劑就可以 保存較長的時間。同時也不需要增加檸檬酸和C 2 0,因
為五味子果實(shí)中含有21 有機(jī)酸可以轉(zhuǎn)化為五味子酸,這種酸不僅具有清新的 -0 % 酸味, 而且具有使人心曠神怡的五味子香氣, 五味子的果實(shí),因酸、 苦、 辛、 咸、 甜五味俱全而得名, 所以用果實(shí)加工的產(chǎn)品會因加工方法不同而使產(chǎn)品不同程度
的保持著這種特殊口 味,而且這些產(chǎn)品保持了五味子果實(shí)鮮亮的胭脂紅色, 不 需要添加任何色素, 在產(chǎn)品中 添加1 水, 產(chǎn)品 0 倍的 原有的 顏色依然鮮紅誘人。 這對五味子產(chǎn)品的 綠色化提供了 可能, 也為食品工業(yè)提供了綠色的無公害的防腐 劑原料和色素原料。 在東歐及俄羅斯已有用五味子果實(shí)加工的果酩、 果糕、 果凍、
果漿, 糖煮果及各種飲料上市。 五 味子的 利用除了 果實(shí), 它的種子、 莖、 根、 葉也同 樣有很高的醫(yī)療功效和 利用價值。 而且有些物質(zhì)的含量高于 果實(shí)中 含量。 的 如在種子中芳香油的含 量達(dá)
到1 ?- .%, 維生 C ./ 2 6.。 葉內(nèi) 素 含量比 果實(shí)多 倍, .。伞 的 相當(dāng) 5 0g g 5- 種子 粉末 于 2g 5g 5- 0鮮果肉 抗 物質(zhì)的 內(nèi) 衰老 含量。 味子 根、 葉 來泡茶, 斯 五 的 莖、 可用 俄羅
己 利用北五味子做成茶葉。 這種茶有良 好的色 柔和的五味子芳香【 澤, 6 u 我國五味子產(chǎn)業(yè)因得天獨(dú)厚的區(qū)域生態(tài)條件、 優(yōu)秀的產(chǎn)品品質(zhì)、 深入的功效
成分研究及品種頗多的加工產(chǎn)品,己居于世界各國前列,形成強(qiáng)大的無形資產(chǎn)。 五味子含有豐富的營養(yǎng)元素,比如:鈣、磷、鐵維生素A ,維生素B 、維生素C ,
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北五味子木脂素提。彼嚰 提取物抑苗作用的研究
尼克酸、 6 1 種氨基酸和豐富的抗衰老物質(zhì)。 我們可以把五味子鮮果烘干, 研磨并 進(jìn)行高技術(shù)分層處理制成五味子粉沖劑、 五味子膠囊, 也可以把五味子 粉和咖啡 粉末結(jié)合制成速溶五味子咖啡。 五味子和咖啡結(jié)合不僅給人們提供了營養(yǎng)豐富的 新型保健食品, 而且 有機(jī)的結(jié)合 了 東西方文化。 能盡快的打入國際市場。 從目前 市場形勢分析, 由于五味子醫(yī)療產(chǎn)品、 保健食品的開發(fā)以及人們消費(fèi)習(xí)慣和飲食 結(jié)構(gòu)的變化,國內(nèi)外對五味子需求日 益增加,五味子供不應(yīng)求。針對這一情況, 近幾年, 囚內(nèi)經(jīng)濟(jì)林專家對五味子野生資源馴化、 優(yōu)良品種選育、人工高產(chǎn)栽培 模式建立 進(jìn)行研究, 選育出了 “ 紅珍珠”、“ 粉珍珠”、“ 紅瑪瑙” 等一批有價 值的 種、 新品 新品系1。 味子產(chǎn)業(yè)打下了 6 為五 = 堅實(shí)的原料資源基礎(chǔ)。 因此, 開發(fā) 五味子食品和對五味子功效成分的利用有著巨大的國內(nèi)和國際市場, 開發(fā)前景極
其廣闊。
13超臨界流體萃取技術(shù)概述 ,
131超臨界流體( pr i aF i , .. S e ril d 簡稱S F簡介 u ct l s c u C)
1 . 1 界流體的 . 1 超臨 3. 概念
所謂超臨界流體是指物質(zhì)的一種特殊流體狀態(tài), 當(dāng)把處于氣液平衡的物質(zhì)升
壓升溫時, 熱膨脹引起液體密度的減少, 而壓力的升高又使其相密度變大, 當(dāng)溫 度和壓力達(dá)到某一點(diǎn)時, 兩相的 氣液 相界面消失, 成為均相體系。 從物質(zhì)的 狀態(tài)
圖( -,。 見圖1 1 可知物質(zhì)存在著氣體和液體兩相不能共存的固有狀態(tài), 3 - 4 此狀態(tài)
消 的 稱為 點(diǎn)( p cil t簡 SP, 著 的 界 T. 失 點(diǎn) 臨界 S erc Pi, 稱 C) 存在 物質(zhì) 臨 溫度 C u ria o t n 臨 壓 P、 界 度 <在 個 態(tài) 物 非 聚態(tài) 高 度流 此時 界 力 C 臨 密 P 這 狀 下 質(zhì)為 凝 的 密 體, 液 ,
體的蒸發(fā)潛熱為零,液體和氣體的差別完全消失。氣體的溫度高于其臨界溫度 T時, C 任何壓力都不能將它變?yōu)橐后w。 在稍高的超過臨界溫度的范圍, 溫度、 壓
力的 微小變化可引起密度的顯 著變化。我們稱超過臨界點(diǎn)的氣體為超臨界流體。 以 氣體為 劑在超過臨界點(diǎn)的 對 進(jìn) 離的 溶 范圍 物質(zhì) 行分 方法叫 超臨界 萃取【。 流體 曲
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北五味子 木脂素提取工藝k提取物抑9作用的研究
..二
夏
生 .
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幾 ‘ .
一 ”. 峨 U
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圖卜3二氮化碳的p 丫 p曲 一一 線 F u l p -oC z i r - - p O g e 3。 f
固 體 體
液
超 臨 界 流 體
A‘ - 一  ̄ -
壓 力
B
溫度D
圖ta純物質(zhì)的相圖 -
F u l4 e。 oprs sne ir -pa d g m u u t c g e hs i a f b a a e
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北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
1 . 2超臨界流體的特性 .1 3. 早 89 英國的哈奈( B H na) 在1 年, 7 J . n 和霍加思( H gr) . a v J oah就在英國皇 . t
家學(xué)會 士 _ 報道了超臨界流體有特別強(qiáng)的溶解能力這一現(xiàn)象。 他們在略高于乙醇臨
界 溫度仃 =4. 的條件下使乙醇處于“ c234 ) 0 C 稠密氣體” 的超臨界狀態(tài), 當(dāng)壓力增 加時, 碘化鉀就溶解于乙醇中, 而當(dāng)壓力減小時碘化鉀又從乙醇中析出來。 超臨 界狀態(tài)下的流體對溶質(zhì)的溶解度大人地增加了, 一般可達(dá)幾個數(shù)景級, 而在某些
條 件下甚 至可達(dá)到按蒸氣壓計 算的16 w 0倍[ ` l
經(jīng)過大量的研究, 人們發(fā)現(xiàn)超臨界流體的密度與液體很接近, 而它又具有氣 體的擴(kuò)散性能( 擴(kuò)散系數(shù)與氣體相近,見表11:在超臨界狀態(tài)下氣體和液體兩 -)
相的界面消失, 表面張力為零, 反應(yīng)速度最大, 熱容量、 熱傳導(dǎo)率等物性出現(xiàn)峰
值
表11不同狀態(tài)下物質(zhì)的物理性質(zhì) -
Tb t pyc a e a e i r t al- hs l。 n odf nst e ] i p r c f e te a p f e a
流體
密度,/m Ae3
擴(kuò)散系數(shù),m/ c2s
鉆度9 C- /(ms )
( - X1 - ) 0 4 13
( - ) 1 4 1 3 X 0-
氣體 (0. { .。常В 1135p 1-0 21a 5 C 超臨界流體 I CP ) 。 ,C T
( - - )入1 - 卜0 4 0 62 0 3 0 . .
0 2 0 5 . . -
0 7X 1 . _ 03
超臨 體1 (c 4c 界流 1 , ) T P
液體 (53') 1-0 C
0409 . -. 0 6 16 .-.
0 2 1 - . 0 3 X
(- ) 欠1 - 39 04
( . - ) 0 5 0 2 3 X1- 2 ( .- ) 0 0 2 3 X1-
因臨界流體的這些特殊性質(zhì), 使其成為良 好的分離介質(zhì)和反應(yīng)介質(zhì), 根據(jù)這 些特性發(fā)展起來的超臨界流體技術(shù)在分離、 提取、 反應(yīng)、 材料等領(lǐng)域得到了越來 越廣泛的開發(fā)利用。日 在對上述有關(guān)超臨界流體特性的開發(fā)利用中, 前, 對溶解 特性的利用發(fā)展得最為成功和廣泛, 超臨界流體替代傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑對許多 即以 天然產(chǎn)物的有效成分進(jìn)行萃取, 有許多過程都實(shí)現(xiàn)了工業(yè)化并取得了非常好的效 益, 而其中超臨界二氧化碳萃取的工業(yè)化應(yīng)用過程占多數(shù)。 超臨界流體其它特性 的開發(fā),目 前大多還處于試驗(yàn)階段[ 6 5 1
32超臨界 . 二氧化碳萃 取技術(shù) Sp ci aF iEt co ,C E ( e rt l d。 tn S F ) u r tc l x a i i u 1 . 1超臨界流體萃取技術(shù) 展 .2 3. 發(fā) 概況 2世紀(jì)5年代,美國的 0 0 托德( d) 埃爾 E i 提出了 超臨界 ( d和 金(g ) T o ln 應(yīng)用 流體
來進(jìn)行工業(yè)化分離。6年代初,原聯(lián)邦德國的佐爾塞(oe 利用超臨界流體從 0 Zs) l 羊毛中提取羊毛脂, 實(shí)現(xiàn)了工業(yè)化生產(chǎn)。 0 從2世紀(jì)8年代以來, 0 受各國的環(huán)境保 護(hù)和衛(wèi) 生法規(guī)日 益嚴(yán)格( 特別是有機(jī)溶劑的禁用) 消費(fèi)者健康意識的提高而對產(chǎn) 、
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北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的a究 r
品的品質(zhì)要求越來越高,迫切需要開發(fā)一種十凈、 安全、 節(jié)能、高效、高品質(zhì)的
加工技術(shù), 而超臨界二氧化碳萃取技術(shù)正是適應(yīng) r 這一要求。 0 近2年來, 許多國
家( 德、日、美、法、俄等) 競相進(jìn)行超臨界流體技術(shù)研究開發(fā),其應(yīng)用范圍越來
越廣,裝置規(guī)模也 越來越人。德國 a AG Bg 公司的超臨界 二氧化碳萃取裝置于 18 9 年開始運(yùn)轉(zhuǎn), 臺 0 萃取槽,以 7 有4 4耐的 少量水為夾帶劑除去青咖啡中的咖啡
因, 年處理2萬噸原料 ( 0 脫咖啡中咖啡因) 中請了許多關(guān)于咖啡方面的專利。92 , 18
年, 德國5 W公司采用U D 公司65 ' 3 K HF .m X 的裝置用于 啤酒花和茶葉的提取。 美
國 r nr Fo公司于 92 Ka G e l d t f e a o 19年在德克薩斯州建成了高2m 3直徑17m . 的年產(chǎn) 8 500 00噸低咖啡因的咖啡萃取裝置。 美國的花沙公司有6 0 個1噸萃取釜的裝置用于
萃取啤酒花。日木18年從德國進(jìn)口了20系統(tǒng), 92 0L 此外澳大利亞啤酒花的超臨界
二氧化碳萃取系統(tǒng)亦已工 業(yè)化。 0 近1年來, 超臨界流體技術(shù)在基礎(chǔ)研究和實(shí)際 應(yīng) 用的深度和廣度方面都有很大的 進(jìn)展。 除了常見的超臨界流體萃取過程外, 超臨 界流體技術(shù)在精餾、超細(xì)顆粒制造、反應(yīng)、印染、清洗等也已 得到廣泛的應(yīng)用, 這些技術(shù)以其獨(dú)特的優(yōu)越性在醫(yī)藥、 食品、 香料、 化工等工業(yè)領(lǐng)域里取得了令人
矚目 的成就「6 69 61 -
我國對超臨界流體技術(shù)的研究始于2世紀(jì)7年代末8年代初, 0 0 0 與國外相比雖
起步稍晚, 但發(fā)展很快。 從近幾年發(fā)表的部分論文看, 在超臨界流體萃取、 精餾、
沉析、 色譜和反應(yīng)等都有研究, 涉及了化工、 輕工、 石油、 環(huán)保、 醫(yī)藥及食品等
行業(yè),不僅有基礎(chǔ)研究,而且有工藝、工程開發(fā)。19年以來,每兩年一次的超 96
臨界流體技術(shù)全國性學(xué)術(shù)會議相繼在石家莊、 廣州、 西安等地召開, 參加的人數(shù)
和單位逐年增加, 地域遍及除臺 灣外的全國各省、市、自 治區(qū)。國家科委在 “ 八 五” 期間將 “ 超臨界流體萃取技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化” 列入重點(diǎn)攻關(guān)項目, 取得 了 豐碩的 成果。 到目 前為止,已 有多個項目 實(shí)現(xiàn)了工 業(yè)化生產(chǎn)。 95 來, 逐漸開 1 年以 我國 9 發(fā)了 若干50-50左右的大型超臨界流體萃取系統(tǒng), 0L10L 躋身世界先進(jìn)國 家行列。
裝置的使用性能基本達(dá)到國際同類裝置的先進(jìn)水平并富有 自己的特色。 這些裝置
在我國豐富的天然資源( 特別是中草藥) 的開發(fā)過程中 取得了舉世矚目的成就。 同 時, 我們還應(yīng)清醒的看到, 我國在基礎(chǔ)研究、 設(shè)備制造與產(chǎn)業(yè)化開發(fā)等方面與先 進(jìn)國家還有一定的差距, 涉足超臨界流體技術(shù)應(yīng)用并取得良 好效益的企業(yè)還不
多, 超臨界流體 的 于 我國 技術(shù) 有待 進(jìn)一步發(fā) [ 展[ 7 0 1
1 .. . 22超臨界二氧化碳萃取技術(shù)的 3 特點(diǎn)
迄今為止, 超臨界流體的工業(yè)化應(yīng)用基本上集中在超臨界流體萃取領(lǐng)域, 而 超臨界流體萃取的工業(yè)化過程所選用的流體絕大多數(shù)是超臨界二氧化碳, 這是因
為選擇超臨界萃取溶劑, 要根據(jù)實(shí)際應(yīng)用的需要作多方面的考慮: 從生產(chǎn)成本上 考慮, 要求超臨界流體的溶解度要盡量減少溶劑的使用量; 選擇性要足以得到純
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北無 味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
度較高的萃取物; 它的臨界壓力和臨界溫度不要太高, 臨界壓力過高會使設(shè)備造
價大大升高, 導(dǎo)致操作成本中的設(shè)備折舊費(fèi)過高, 還會導(dǎo)致升壓降壓的循環(huán)過程 中能耗增大; 臨界溫度太高會使天然產(chǎn)物中的有效成分分解破壞; 要求它的蒸發(fā) 潛熱較小, 否則會使超臨界流體在反復(fù)加熱、 k 冷f過程中的能耗增大: 被選用的 超臨界流體還應(yīng)有化學(xué)穩(wěn)定性,不 腐蝕設(shè)備, 廉價易 得,使用安全『。 “ ’
而二氧化碳是用于萃取最理想的超臨界流體,'有以下的優(yōu)點(diǎn): L ( 超臨界二氧化碳的萃取能力取決于 1 ) 流體的密度,可以容易地改變操作條 件( 壓力和溫度) 而改變它的溶解度并實(shí)現(xiàn)選擇性提取, 滲透力強(qiáng), 提取時間大大
低于使用普通有機(jī)溶劑。
( 二氧化碳無味、無害、無毒、 2 ) 化學(xué)惰性, 不污染環(huán)境和產(chǎn)品, 符合現(xiàn)代 國際社會對生產(chǎn)過程及產(chǎn)品質(zhì)量越來越高的要求。 在萃取過程結(jié)束后無殘留在產(chǎn)
品和料渣中,所得產(chǎn)品質(zhì)量好檔次高,料渣不必經(jīng)過處理就可使用。
( 操作溫度接近室溫,特別適合遇熱分解的熱敏性物料。在萃取天然物料 3 ) 時得風(fēng)味逼真的萃取物,這是其他方法所不能解決的。 ( 廠氧化碳價廉易得, 4 _ ) 不易燃易爆, 避免了有機(jī)溶劑提取危險, 使用安全。 ( 超臨界二氧化碳萃取集萃取、分離于 5 ) 一體,大大縮短了工藝流程,操作
簡便。
() b檢測、分離分析方便,能與G , , , C I MS G R UMS 等現(xiàn)代分析手段結(jié)合 起來,能高效、快速地進(jìn)行藥物、化學(xué)或環(huán)境分析。
l . . 3超臨界二氧化碳萃取技術(shù)過程 32 . 超臨界流體 萃取工藝過程1見圖1 0 7 1 1 - 5
補(bǔ)充
C2 0
圖15超臨界C2 - 0流體萃取工藝過程
Fgr1 p c s f pr i a ld O Et co i e r e o S e rt l u 。 , r tn u - os 5 u c i 。 i tc xai
萃取釜 三減壓閥 一 J分離釜
魂 加L 岌
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩 士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
超臨界流體萃取過程具體步驟如圖16 -0
匡 圈
上
用加壓泵提升
壓力,同時調(diào) 節(jié)溫度,使其 成為超臨界
C, O流體
Cz o流體作為溶劑, 從萃取 釜底部進(jìn)入,與被萃取物 料充分接觸,選擇性溶解 出所需的化學(xué)成分
分離釜內(nèi) Cl o溶解度急 劇 下降而析出溶質(zhì),自 動分
離成兩部分
為循環(huán) Cz (氣體, l 經(jīng)熱交換器冷凝 成 C: O液體,再 循
環(huán)使用
圖16超臨界流休萃取過程 - F u l p cs o。樱穑 tcl。臁 q Etco i r l e s ue r i 。 u。 ge r o f c ta ld i xatn ri
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北五 味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
133超臨界二氧化碳蘋取技術(shù)的應(yīng)用 ..
1331超臨界二氧化碳萃取技術(shù)在中草藥有效成分提取中的應(yīng)用 .。 .
中草藥有效成分提取率低且成分復(fù)雜, 還易使生物活性物質(zhì)受到破壞; 若采
用SE F技術(shù)萃取有效成分,萃取能力強(qiáng)、提取率高、有效成分高度富集,操作溫 度低,有效成分不被破壞,所得到的產(chǎn)品其生物活性和有效成份純度大大提高, 其萃取物藥理、臨床效果能夠保證或更好; 提取時問快、 生產(chǎn)周期短、 操作參數(shù) 容易控制,有效成分及產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,該技術(shù)不僅工藝上優(yōu)越, 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)容易控
制,流程簡單,操作方便,而且節(jié)省勞動力和有機(jī)溶劑,避免易燃易爆的危險,
減少三廢污染,是一種集提取、分離、 縮為一體的高新技術(shù)[7 濃 R3 - ] ( 揮發(fā)性成分及揮發(fā)油的提取 1 ) 揮發(fā)油類成分分子量較小, 具有親脂性和低沸點(diǎn)的性質(zhì), 在超臨界二氧化碳
流體中有 良好的溶解性能, 大多數(shù)都可用純二氧化碳直接萃取得到, 所需的操作
溫度一般較低, 避免了有效成分的破壞和分解, 而且收率也較高, 是一類最適干
超臨界二氧化碳萃取的成分。 ( 生物堿的提取 2 ) 生物堿是中藥有效成分中非常重要的一類, 亦是人們在植物藥材中研究最早 最多的一類成分。 傳統(tǒng)提取生物堿的方法中除個別具有揮發(fā)性的生物堿可用水蒸
氣蒸餾法進(jìn)行提取外, 一般情況下,總生物堿的提取常用溶劑法, 其主要缺陷是
提取分離步驟多,排污量大。用SE F 技術(shù)萃取生物堿不僅能克服上述缺陷,而且 能有效提取含量低的成分( 如奎寧堿) 能選擇性提取目 標(biāo)產(chǎn)物( 如小樊堿) 。 () 3試類提取 國內(nèi)研究者已 成功地從藥用植物紅花中提取了治療高血壓的成分紅花試, 從 甘草中提取甘草貳, 提出的有效成分增多, 且提取率顯著提高。 從我國新疆軟紫
草中提取紫草素及衍生物等。 ( 香豆素類提取 4 ) 香豆素、木脂素的傳統(tǒng)提取方法多采用系統(tǒng)溶劑法、堿溶酸沉法,層析法、 多次萃取法等,而SEC 3 F -0萃取對香豆素和木脂素的提取是一種非常有效的方
法。 通過采用多級分離、 或與超臨界精確結(jié)合可以得到有效成分含量很高的提取
物。
( 砧類提取 5 ) 葛發(fā)歡等用SEC 2 F -O法對黃花篙化學(xué)成分進(jìn)行研究表明, 青篙素( 倍半菇類)
用該法萃取比 傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)中的 溶劑法( 稀乙 提高1% 5Y, 提取時 汽油、 醇) 0 -9o且 間大大 縮短, 從而降 低成本‘。 劉
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
( 黃酮類成分的提取 6 ) 黃酮類化合物廣泛存在于植物中, 資源很豐富。 采用超臨界流體萃取技術(shù)可
保證質(zhì)量。月S EM 萃取銀杏葉中有效成分與 IF - 溶劑萃取法比較,IF F萃取流程
短, 萃取分離 步完成, 得率M出傳統(tǒng)提取黃酮的方法2 操作時間大大縮短, 倍, 保持1 銀杏葉有效成分的 天然品 質(zhì),且 不存在有機(jī)溶劑 和金屬殘留L。 胡
1332超臨界二氧化碳萃取技術(shù)在食品 ... 工業(yè)中的應(yīng)用 超臨界二氧化碳萃取技術(shù)在食品工業(yè)中的 應(yīng)用發(fā)展迅速, 取得了 并己 穩(wěn)固地 位。目 前在啤酒花有效成分萃取天然香料植物或果樹中 提取香精、 色素及風(fēng)味物
質(zhì),動植物中提取動植物油脂,咖啡豆或茶葉中脫除咖啡因,煙草脫除尼古丁, 奶脂脫膽固醇及食品脫臭等方面的研究及應(yīng)用都取得了長足的發(fā)展、 其中一些技
術(shù)己 得到工業(yè)化應(yīng)用〔。 川 例如, 德國從17年開 98 始便相繼建成了 X。艨Х榷 2 6a 1 / 0
脫咖啡因和年處理2 4啤酒花的工業(yè)化裝置,日本富士香料公司于18年建 X t 1 0 99
成了1 0 的天然香料生 X L 3 0 產(chǎn)裝置等。目 國 前, 外市場已出 現(xiàn)由該技術(shù)制取的具 有高附加值的 天然香料、 色素和風(fēng)味物質(zhì)等高質(zhì)量的 添加劑系列 ‘。 食品 7 此外, 5 1 用超臨界C : O進(jìn)行食品殺菌也有研究,日 本開發(fā)的非加熱殺菌酵母失活技術(shù),己
成功用于醬油酵母的殺菌處理,它的殺菌率比一般殺菌技術(shù)高。最近,瑞典 C a e 技術(shù)大學(xué)研究成功了一種植物油快速氫化裝置, hl r m s 其氫化速度比一般的熱
壓器提高1 0 0 倍以上, 0 而且該 裝置的 造價比 熱壓器低2Y " 5 "0 .
除應(yīng)用SE 技術(shù)迸行食品有效成分的提取與食品中有害成分的去除之外,近 F
年來提出了取代現(xiàn)在較高溫度擠壓加工工藝的超臨界流體擠壓加工新工藝, 該工 藝可將風(fēng)味物質(zhì)較好地帶入食品中,而且 產(chǎn)品成形好[。 n 這將為SE 1 F技術(shù)在食品
工業(yè)中的應(yīng)用提供更加廣闊的前景。 我國將SE 應(yīng)用于食品工業(yè)己逐步由實(shí)驗(yàn)室研究走向產(chǎn)業(yè)化,研究工作主要 F
集中在提取動物油脂、 素、 色 香料及食品脫臭等方面[。 1 高德勇等通過自 7 6 1 行設(shè)計
的SE F規(guī)模較大的裝置,實(shí)現(xiàn)了用超臨界C ;同時萃取可可豆殼( O 或皮) 中可可脂
即可可色素的工藝, 實(shí)驗(yàn)表明, 產(chǎn)品質(zhì)量好, 萃取率較高。 周海濱等還對超臨界
C_ O脫除啤酒中乙醇,制備無醇啤酒的工藝進(jìn)行探索,確定最佳工藝條件, 保證 啤酒風(fēng)味。目 前在國 米胚芽制品己得到較多的開發(fā), 外, 尤其是日 本米胚制品己 達(dá)到J余種, 。 而國內(nèi)米胚芽制品尚屬空白, 有鑒于此, 周海濱等又對米胚芽油的 S F進(jìn)行研究, E 所得產(chǎn)品中維生素E 及不飽和脂肪酸含量高, 特別是亞油酸含量豐 富, 萃取后的米胚芽仍可利用, 他們已 把該工藝放大到2 2L X 4萃取柱上進(jìn)行了中 試試驗(yàn),證明工藝可行。 在將SE F用于食品工業(yè)的工業(yè)化道路上,我國也取得一定的進(jìn)展,武練增等 用已取得的超臨界C ; O萃取沙棘籽中的沙棘油的專利技術(shù),于1 3 9 年建成2 9 X
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
無五味了 木脂素提取工藝及提取物抑8乍用的研究
20的工 5L 業(yè)裝置,填補(bǔ)了 我國SE F技術(shù)工業(yè)化的空白。此后,武練增等又取得了 用超臨界C :以蛋黃粉為原料制取高純度卵黃磷脂的專利,并建成年產(chǎn)2t O 5 卵黃 磷脂工業(yè)裝置。19年清華大學(xué)又建成啤酒花浸膏2 IL F 中試裝置,這 96 X 的SE O
一成果將使我國的酒花利用率從2%提高到9 %左右, 溶劑萃取法相比萃取選 5 0 與 擇性更好, 芳香成分不氧化。 這些工作為我國SE F技術(shù)進(jìn)一步走向 產(chǎn)業(yè)化奠定了 基
礎(chǔ)‘ 。 “ ’
14天然食品保鮮劑研究概況 ,
在食品工業(yè)中、食品的防腐保鮮始終是一個魚待解決的重要問題,據(jù)估計,
全世界每年約有1-0的 02% 食物損失于 各種腐敗。 腐敗變質(zhì)不僅會使食品喪失 食品 營養(yǎng)價值, 還會造成食物中毒。 食品腐敗的 原因包括物理、 化學(xué)、 微生物等 酶、 四個方面的因索, 其中微生物作用最為嚴(yán)重。 延長食品的保藏期限, 為了 人們在
食品加工過程中采用不同的手段, 使微生物喪失活性、延緩或阻止其生長, 添加
防腐齊是其中 」 一種使用方便、 有效的 非常 食品防腐方法而被普遍采用L 7 4 1 食品防腐劑可分為合成防腐劑 和天然防腐劑「。 B 過去, 0 1 合成防腐劑以 其使用 方 法簡便、 成本低廉、 效果顯著等諸多優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用。 但隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)
展。 人們逐漸發(fā)現(xiàn)不少合成防腐劑有潛在的致癌、 致畸作用和易引起食物中毒等
問題。 如用于肉 類防腐和著色的亞硝酸鹽在消化系 統(tǒng)中 可與脯氨酸形成強(qiáng)致癌物 質(zhì)亞硝胺。 因而目 前科技工作者對合成防腐劑的使用持慎重的科學(xué)態(tài)度, 消費(fèi)者 則對非天然的食品防腐劑比較忌諱。 此外, 合成防腐劑的生產(chǎn)和使用對生態(tài)環(huán)境 也會產(chǎn)生一些不利的影響。 隨著人類對自 身健康和環(huán)保問 題認(rèn)識的不斷提高, 健
康、 綠色食品 越來越受到 歡迎, 這使天然防 腐劑日 受到 們的 益 人 青睞(。 B 天然防 7 ] 腐劑按其來源可分為植物源防腐 動物源防腐劑及微生物源防腐劑[。 劑、 N 植物源 : ]
防腐劑來源非常廣泛, 據(jù)不完全統(tǒng)計, 目前世界上具有抗菌防腐作用的植物至少
有20種左右: 00 而且其安全性高, 許多是公認(rèn)的安全無毒物質(zhì); 此外, 許多植物 源防腐劑還具有一定的營養(yǎng)價值和其它的功能特性, 如作為著色劑、 風(fēng)味調(diào)節(jié)劑 等, 有些還具有一定的生理活性因子, 同時它也順應(yīng)著綠色食品發(fā)展的潮流。 因 而從植物中尋找和提取廣譜、 高效、 低毒 多功能的防腐劑成為當(dāng)前天然食品防
腐劑研究的主流。 國內(nèi)外許多研究者在這方面進(jìn)行 了 大量的研究工作, 也取得了
許多成果。
古野知子等( 8年) 香辛料抽取物為主要成分, 1 8 以 9 制成水產(chǎn)制品天然防腐保 鮮劑,只需很少的添加量,即 對水產(chǎn)制品分離菌及腐敗原因菌、枯草菌、酵母、 霉菌等顯示很強(qiáng)的 抗菌活性, 優(yōu)于山 效果 梨酸鉀〔。 叫 賈建波利用生 李莽皮提 姜、
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北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
取物的混合液進(jìn)行食品防腐效果評價, 結(jié)果發(fā)現(xiàn), 雖然它們的防腐效果稍差于 化 學(xué)防腐劑苯甲酸鈉, 但其抑菌p范圍較廣, H 對堿性食品同樣適用, 具有較強(qiáng)的抗 熱性, 還能賦予食品清爽的香味 感f. d 和n e a 等報道白蘇、水寥中的 e Kn l 抗菌成 分分別是紫蘇醛、 _ 大量實(shí)驗(yàn)表明, 蜚 醛。 食用香料植物抑菌防腐的主要活性物 質(zhì)是精油, 如芥菜籽中的異硫氰酸烯內(nèi)酷、J 香花中的丁 香酚、 肉桂中的桂醛都
是起抑菌作用的有效成分。 nb c對植物芳香精油的抗菌性能進(jìn)行了研究, K ol h o 認(rèn)
為在水相中的 溶解度與 精油中 有效成分透過細(xì)胞而進(jìn)入菌 體的能力直接相關(guān), 而
抗菌性則基于抗菌劑在菌體細(xì)胞膜雙磷脂層中的溶解度; 精油中的類菇類降低生
物膜的穩(wěn)定性, 從而干擾了 能量代謝的酶促反應(yīng)fo h對來源于 s Gc s o。 l 植物的2種 6 芳香族化合物的抗菌效果進(jìn)行了 研究, 根據(jù)對濕抱子有效而干抱子無效的實(shí)驗(yàn)結(jié) 果, 認(rèn)為桂醛、 7 C香腦等有效芳香抗菌成分的抗菌性是基于 飽子對抗菌劑的吸收 而 起作用’。 用香料 .食 1 植物成分 還 抗菌 協(xié)同 之間 存在 性的 增效作 斯里 用, 蘭卡肉 桂的抑菌性比 較好, 就是因?yàn)榧群泄鹑┲鞒煞郑?又有含量少的次要成分丁香酚, ‘ 這兩者 存在協(xié)同 增效作用 Kn發(fā) a 現(xiàn)紫蘇 寥 醛之間 g 醛與 二 存在協(xié)同 作用「 抗菌 8 7 1
香蘭素與桂醛也有協(xié)同效應(yīng)。 香蘭素添加量過大, 會引起食品的褐變, 桂醛濃度 高時,會給產(chǎn)品帶來特殊味道而有損食品原有的風(fēng)味 兩者混合使用時其用量大 為減少,既能發(fā)揮防霉作用,對加香調(diào)味也非常有利。
我國中草藥品種繁多, 其研究歷史悠久. 利用天然中草藥制備有抑菌作用的 食品防腐保鮮劑具有很實(shí)際的意義。 姚兆斌等從提取甘草酸后的甘草渣中篩選出 了抗菌成分, 發(fā)現(xiàn)甘草渣提取物對黑曲霉、米曲 霉、黑根霉、 毛霉、 擬青霉具有 較好的抑制作用, 并利用薄層層析法初步判定抗霉的關(guān)鍵成分是甘草黃酮類化合 物〔。 蓮采用8%乙 8 紀(jì)麗 8 J 0 醇浸漬法提取荷葉中 成分, 抑菌 結(jié)果發(fā)現(xiàn)該提取物對細(xì) 菌及酵母等主要靠無性裂殖繁殖的微生物具有明顯的抑制作用, 其最低抑菌濃度 (I) MC大都不超過8 且在弱堿條件下效果最好, %, 同時發(fā)現(xiàn)8 乙醉提取物較穩(wěn) 0 定, 能耐高 溫短時及超高 溫瞬時的熱處理條 8 黃通旺[對未得到充分利用的 件l。 s ) s o 7 3種中草藥進(jìn)行抑菌研究分析。 篩選出 0 從中 黃楊、 迎春花等1 4 種有研究價值的抗
菌中草藥。宮 o 霞f等發(fā)現(xiàn)銀杏葉的醇一 i l 水提取物對食品中的常見微生物, 包括一 些革蘭氏陰性菌和陽性菌, 有強(qiáng)烈的抑制作用。 并認(rèn)為提取物中多種長鏈酚類物 質(zhì)如白果酸、 果酚及接有不同烴基側(cè)鏈的漆樹酸是抗菌的主要物質(zhì)等。 白 安徽食 品科技中心研究者利用濾紙圓片和牛津杯法研究了茶多 種濃度(%..0 酚3 1 05o、 l 02 種致病菌的作用。 . 對3 Y o ) 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)者f s m l 用微量熱法研究不同 濃度的茶 多酚對大腸桿菌、 產(chǎn)氣桿菌的 抑制作用, 作出 并 直譜圖。 他們根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為
茶多酚對細(xì)菌具有廣泛的抑制作用,不失為一良 好的天然食品防腐劑。王世強(qiáng)
等I對近20 草藥進(jìn)行了 試驗(yàn), 發(fā)現(xiàn)有1 多 e , 1 0種中 抑菌 0 種中草藥具 0 有抑菌作用,
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北五咬子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
其抑菌范圍廣, 對常見病原菌、自 念球菌、 傷寒和痢疾桿菌、 耐甲氧西林的金黃 色葡萄球菌、 表皮葡萄球菌、 大腸埃希菌、 傷寒沙門菌、 霉、 黑曲 黃曲 霉、日 本 曲霉、雜色曲霉、產(chǎn)黃青霉、毛殼菌、彎抱霉、枝抱霉、桔灰青霉、淋病球菌、 新型隱球菌等等都有較強(qiáng)的抑制作用。 日前中草藥抑菌試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)黃連的抑菌能
力最強(qiáng),其次為大黃、黃等、大青葉、丁香、艾葉、魚腥草等,再其次為黃柏、
玄參、 連翹、知母、馬鞭草、 烏梅、白頭翁、 茵陳、 蒲公英等等。中草藥成分之 間也存在抗菌性的協(xié)同增效作用, 李曼用金銀花等幾 種中草藥提取液進(jìn)行協(xié)同 抗 菌作用研究, 發(fā)現(xiàn)藥物配伍協(xié)同 作用是增加抗菌 效價的一種有效途徑。 顧芯『 叫 等用殼聚糖一 中草藥復(fù)合制劑對米飯、 飽菜、 午餐肉、 豆沙、 土豆泥、 果汁飲料、 果醬、 水果罐頭等八種食品的保鮮效果優(yōu)于 化學(xué)合成防腐劑苯甲酸鈉、 梨酸鉀, 山 開 辟了國內(nèi)食品防腐劑的新天地。 毛瓊、 衛(wèi)紅、 張 徐藝等[人 9 利用中 5 ] 草藥及其配 伍進(jìn)行抑菌作用研究, 發(fā)現(xiàn)適當(dāng)混合使用可提高抗菌效果,不僅降低了 抑菌濃 度, 抗菌范圍更加廣泛, 而且 對中草藥的配伍抗菌藥的開發(fā)有一定的意義。 多年 來, 國內(nèi) 外學(xué)者 對中草藥抗真菌作用進(jìn)行了 大量研究工作1i, 發(fā) 0余 9m 現(xiàn)30 種 5I - 中草藥均有抗真菌作用。目 前主要研究的有: 木犀科植物連翹提取物: 薔薇科植 物梅的提取物;魔芋提取物; 高良 姜提取物: 廿草制劑; 菊科植物葬篙提取物; 寥科草本植物; 大黃提取物;野生青果提取物;玉米須提取物等等口 目 雖己知道許多植物的提取物具有抗菌防腐作用,且 前, 有不少己作為天然 防腐劑升發(fā)利用并投放市場,不過在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中 仍然存在著 一 定問題: ( 目前雖然己 ) ] 發(fā)現(xiàn)許多植物具有一定的防腐作用,但其中到底是哪些物質(zhì) 在起作用,以及具體的防腐作用機(jī)理如何,很多還不太清楚; () 己開發(fā)的植物源防腐劑雖然有部分是國際公認(rèn)的天然安全物質(zhì),但大多 2 數(shù)物質(zhì)尚未經(jīng)過毒理學(xué)評價, 是否安全及安全使用的最大劑量范圍還存在一定疑 問。 而對于部分植物中存在的有毒物質(zhì), 如何進(jìn)行有效分離也是一個很復(fù)雜的操
作;
() 植物中的有效防腐成分含量普遍較低,目前還較難實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生 3
產(chǎn), 而且生產(chǎn)成本高, 因而目 前許多研究成果僅停留在實(shí)驗(yàn)室階段, 很難進(jìn)行大 范圍 推廣應(yīng)用; () 在實(shí)際應(yīng)用中,部分植物源防腐劑用量少時達(dá)不到防腐效果J用量大時 4
又可能影響食品的風(fēng)味和品質(zhì), 甚至產(chǎn)生毒副作用。 這些問 題的存在, 在很大程度上制約著植物源天然防腐劑的發(fā)展。 因而在今
后植物源防腐劑的開發(fā)利用 過程中, 力加強(qiáng) 應(yīng)著 如下幾方面的研究:
1 、在開發(fā)防腐植物資源時,應(yīng)加強(qiáng)對其有效防腐成分及防腐機(jī)理的研究。 2 、特別要重視對各種植物源防腐劑的毒理學(xué)評價,掌握其安全性及安全使
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取丁藝及提取物抑菌作用的研究
用的最大劑量。
3 盡量探索、 、 篩選那些防腐成分含量高、 防腐效價高、 資源豐富的植物源。
4 、加強(qiáng)生產(chǎn)工藝研究,實(shí)現(xiàn)對植物源防腐成分的有效富集,達(dá)到 L 業(yè)化生
產(chǎn)并降低生產(chǎn)成本、提高經(jīng)濟(jì)效益的目的,從而利于實(shí)際推廣應(yīng)用。 : 5 ,在實(shí)際應(yīng)用時, 應(yīng)根據(jù)有效防腐物質(zhì)的理化性狀和作用條件,加強(qiáng)在實(shí) 際生產(chǎn)中如何對這些植物源防腐劑進(jìn)行合理利用的研究, 努力達(dá)到既滿足防腐又
不會對食品產(chǎn)生副作用的效果。 F 對于植物資 、 源中的高效防腐物質(zhì),如何 利用現(xiàn)代生物工程技術(shù) 對其進(jìn)行 高效擴(kuò)增,應(yīng)該是今后植物N防腐劑發(fā)展中具有戰(zhàn)略意義的研究課題。 ,
15本研究的目的和意義 .
五味子具有極高的藥用和營養(yǎng)價值, 是一種新型的 “ 藥食同源”功能性保健 食品, 要有效成分為木脂素類化合物, 其主 它具有抗菌、 抗氧化、 抗衰老、 保肝 護(hù)心、 抑制中樞神經(jīng)等作用。 以往對于五味子功效成分的提取, 通常采用傳統(tǒng)有 機(jī)溶劑提取法, 存在操作復(fù)雜,費(fèi)時長, 有機(jī)溶劑殘留,藥渣丟棄浪費(fèi)等缺陷, 而就像前面所介紹的超臨界二氧化碳萃取具有常溫、 無毒、 使用安全、 萃取時間 短、 產(chǎn)品質(zhì)量高等特點(diǎn)。 前相對于五味子超臨界萃取的報道較少。 而目 因此本研 究對五味子總木脂素超臨界二氧化碳萃取, 進(jìn)行了系統(tǒng)的研究, 旨在能最大程度 的提高總木脂素的萃取量, 保持原有的營養(yǎng)價值、 無溶劑污染, 滿足純天然食品
開發(fā)的要求。
由于微生物的污染,, 食品在加工、 運(yùn)輸、 保藏和銷售過程中, 常會腐敗變質(zhì) 而造成經(jīng)濟(jì)損失, 現(xiàn)在多采用冷藏、 殺菌、 密封包裝或在食品中添加防腐劑等方 法進(jìn)行防腐。 加入防腐劑是一種簡單有效的方法, 但由于 人工防腐劑對人體有一 定程度的危害, 所以人們要求用天然防腐劑來代替。 從這一目 的出發(fā), 國內(nèi)外都 在大力開發(fā)高效、 低毒、 廣譜和經(jīng)濟(jì)實(shí)用的防腐劑, 其中從植物中尋找有抑菌防 腐作用且安全性高的活性物質(zhì), 有著廣闊的前景。 中藥藥材霉?fàn)變質(zhì)是南方暖濕 地區(qū)司空見慣的 現(xiàn)象, 不僅黨參、 黃氏、 歸 當(dāng) 等含糖分較多的藥材要發(fā)霉, 就連 山藥、 白術(shù)、 花椒等藥材也難逃厄運(yùn) 而北五味子在同等條件下存放數(shù)年卻不發(fā) 霉。 曾有文獻(xiàn)報道北五味子對綠膿桿菌和痢疾桿菌有抑制作用, 但對北五味子提 取物抑菌作用的研究, 迄今鮮有報道。 本研究以 北五味子不同提取工藝下所得提 取物為研究對象, 對北五味子的抑菌作用作進(jìn)一步探討。 旨在為進(jìn)一步開發(fā)利用
北五味子,增加其附加值,提供一種新的途徑。
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的b究 ; .
2材料與方法
2 1 材料與設(shè)備 .
2 1 1 試驗(yàn)材料 ..
五味子:購自 長白山北亞藥業(yè)有限公司, 產(chǎn)地為長白山地區(qū)。
C: O氣體:9. ,吉林長春凈月氣體公司。 95% 無水乙醇:分析純,沈陽市化工試劑廠。
9 乙醇:分析純,沈陽市化工試劑廠。 5% 甲醉:分析純,沈陽東興試劑廠。 五味子乙素標(biāo)準(zhǔn)品:中國藥品生物制品檢定所。
氯化鈉:分析純,哈爾濱市化工試劑廠。 氯仿:分析純,哈爾濱市化工試劑廠。 硫酸:分析純,哈爾濱市化工試劑廠。 變色酸:分析純,哈爾濱市化工試劑廠。 山梨酸鉀:化學(xué)純,中國醫(yī)藥上海化學(xué)試劑公司。
苯甲酸鈉:化學(xué)純,中國醫(yī)藥上;瘜W(xué)試劑公司。
牛肉浸膏、蛋白陳、瓊脂粉:生物試劑,廣東環(huán)凱微生物科技公司。
金 色葡萄球菌(a y c cs。 、 腸桿菌(s ec a。 吉 業(yè) S p lo ua e ) 大 t ho c u s r E h ii o :由 林農(nóng) c rh cl i
大學(xué)動物科技學(xué)院微生物教研室提供。 212儀器及設(shè)備 .. 電 熱鼓風(fēng)千燥箱PG94A H-1 型:上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。 6 電 熱恒溫培養(yǎng)箱 30-:上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司。 032 手提式壓力蒸汽消毒器 Y-8B X20:上海三申醫(yī)療器械有限公司。 超凈工作臺 H-4 1 S801 :蘇凈集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀R-2 E5A:上海亞榮生化儀器廠。
循環(huán)水多用真空泵:SZ I H- I,河南省鄭州市英才儀器Jo .
酸度計 PS2 H-5:上海日島 科學(xué)儀器有限公司。
光學(xué)顯微鏡:奧林帕斯。 微量連續(xù)可調(diào)系列移液器:北京青云卓立精密設(shè)備有限公司。
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北五味子木脂 素 提取 工藝及提取物抑菌作用的明究
飛利浦二合一攪拌機(jī):飛利浦家庭電器有限公司。 高速組織搗碎機(jī) J-: 海鷹利儀器廠。 J2 1 :
vS73 1-2G分光光度計:北京瑞利分析儀器公司。 電子天平 AY2:島津制作所。 U20
電熱恒溫水浴鍋:天津市豪斯特分析儀器公司。
回流提取器:長春玻璃儀器廠。 超臨界萃取裝置 F115-6 A2-00:南通市華安超臨界萃取有限公司。
213普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 . .
牛肉 5, 陳 I , 膏 g蛋自 O 氯化鈉 5 瓊 2 , l L g g 脂 0 水 00 e , 8 0M
調(diào)節(jié)p 7274 H -. .
22試驗(yàn)方法 .
221北五味子總木脂素的分析檢測 ..
2211 ... 標(biāo)準(zhǔn)曲 線的制備 精密稱。 g m 五味子乙素標(biāo)準(zhǔn)品, 醇溶解, 0 用甲 搖勻,定容于1 M 容量 0 L 0 瓶中, 使之成為濃度為02 g L .。 五味子總 mM 木脂素標(biāo)準(zhǔn)品溶液, 作為貯備 液備用。 分別精密量取 上述溶液0O L01L02 L03 L04 L05 L . , , , , , , m . . . . . m m m m m 06 L . ,。7L 08 L 0 m ,。 于 管中, M m , m , L 1 L 試 . . 9 . O 水浴加 熱揮干溶劑后, 分 別加入1 % 0 變色酸溶液05 L . 、濃硫酸35 L m . ,加塞,搖勻后于沸水浴中加熱3 m 0
分鐘后,馬上取出,冷卻后,分別加入2O L . 蒸餾水稀釋,搖勻,冷卻后,以0 M
號試管為對照, 5分光光度計,在55m 用71 7 處測定吸收度。以五味子乙素量為 n 橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲 線。
221 脂 含量測定 ... 2木 素 () 超臨界 O 1 Cz 萃取五味子木脂素的 測定 精確稱。埃 0提取物, 醇溶解, . 8 0 0 用甲 搖勻, 定容于l 容量瓶中, OL M 吸取
02 L . 定容液,水浴加熱揮干溶劑后,采用標(biāo)準(zhǔn)曲線測定方法測定。 m
() 五味子醇提物中木脂素的測定 2
精密稱取樣品 . 8 01 0,置于I L 5 0 O 容量瓶中,加9% M 0乙醇8 L 超聲溶解, M, 放冷定容, 準(zhǔn)確吸取以上乙 醇溶液1 硅膠( 。 )g m ,加 L 1 目 1拌勻, 0 揮干乙 醇,將
硅膠裝入底部塞有少量棉花的小層析柱中,用氯仿洗脫至1 容量瓶中,并至 OL M
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北五味子木脂素 提取工藝及提取物抑菌作用的研究
刻度。 精密量取以上氯仿洗脫液05 L 具塞試管中, . 與 m 蒸干。按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方 法操作, 測定各樣品吸光度值. 并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲 線的讀數(shù), 計算五味子木脂素的提
取率。
() 五味子水提物中木脂素的測定 3
將提取物研細(xì), 精密稱。 00, . g 加氯仿2m , 00 0 L 超聲提取2 每次 0 . 次, 3 mn i 濾過,定量轉(zhuǎn)移至5M 量瓶中,加氯仿并稀釋至刻度。精密吸。埃 L 對 0L . ,同 m 照液項下操作,測定吸光度值,以五味子乙素的標(biāo)準(zhǔn)曲 線計 算提取率。
222北五昧子木脂素不同提取工藝的研究 _
2221北五味子木脂索超臨界三氧化碳萃取工藝的 ... 研究
( )超臨界C 2 1 O萃取流程
圖21 一F工藝流程示意圖 -C OS E
F u 21 o g ap c s q SE i r -t h l i l。 oC F g e en o c r s f c o
I O 氣瓶 ?凈化 3冷毅 S d高壓 5抓熱器 64取 7分 -0 C 器 - F: 閥; - - 器 - 離器 A放油 n減 . 1.”、 2閥門. 貽 - A閹 0 1
將需要萃取的物料粉碎, 裝入萃取器 ()中,用 C2 6 0反復(fù)沖洗設(shè)備以排除
空氣。 操作時先打開閥 (2 及氣瓶閥門 1) 進(jìn)氣,再啟 動高壓閥 () 4 升壓,當(dāng)壓 力升到預(yù)定壓力時再調(diào)節(jié)減壓閥 () 調(diào)整好分離器 ()內(nèi)的分離壓力, 9, 7 然后 打開放空閥 (0 接轉(zhuǎn)子流量計測流量, 1) 通過調(diào)節(jié)各個閥門, 使萃取壓力、 分離
壓力及萃取過程中通過 C, O流量均穩(wěn)定在所需操作條件,半閉閥門 (0,打開 1)
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北五味子術(shù)脂素提取工藝及提取物抑苗作用的研究
閥門 (1 1)進(jìn)行全循環(huán)流程操作,蘋取過程中從放油閥 ()把苯取液提出。 8 主要技術(shù)參數(shù):
萃取器容積: L L 5和I
最高萃取壓力:5Na 0P o
萃取溫度:常溫一7'。 5 C C, O 最大流量:0/ 5Lh ()超臨界C2 2 0 萃取工藝參數(shù)的確定 ①原料粒度對五味子木脂素萃取率的影響 將自然干燥的五味子果實(shí)粉碎后過2-10 孔徑的篩篩分,置于W C 一 0 0目 真空 干燥2h 4,測其含水量為30 % 進(jìn)行超臨界萃取。 .1 。 萃取條件為: 壓力2Ma溫度 5P, 30, 流A1 /, 5 C: 6 h 萃取時間1 mn 投料量1 8 根據(jù)木脂素提取率, C O L 2 i, 0 2。 0 確
定最佳原料粒度。
出料率%萃取物量/ 二 樣品量x 1 0 0 ②溫度、壓力、時間對五味子木脂素萃取率的影響 采用正交試驗(yàn)設(shè)計法, 對萃取壓力、 萃取溫度、 萃取時間進(jìn)行三因素三水平
L。 ( 3>正交試驗(yàn)。正交試驗(yàn)設(shè)計如表21 -所示。
表21 (' 因 - 。獭 紊水平表 3 〕
Tb t1 e ) c rad l al -L (0 at s l e e 3 。 o n e s v
水平 A壓力 (P ) Ma
-- - . 一 ‘ . 一 一  ̄一 一 戶 一 ‘  ̄一
因
紊 B 溫度 ( ℃)
-- 一 一 ̄一
f時間 ( i) mn
 ̄一  ̄. 一 . 一 -
1
9 i f
: 6 飛 o 0
3 3 5 4 5 10 2
一 一
.c 流量對五味子木脂素萃取率的影響 a 粒度相同的等量原料,在其它操作參數(shù)相同的條件下,分別用不同的c: o 流
量,進(jìn)行超臨界C2 0 萃取,確定最佳C2 0 流量。
④投料量的影響 選用不同量的原料,其它操作參數(shù)相同,進(jìn)行超臨界c, o 萃取。確定最佳投
料量。
⑤在最優(yōu)條件下進(jìn)行超臨界 0 C2 萃取 在最優(yōu)條件 進(jìn)行超臨界c, 「 o 萃取,得出 超臨界c, 0 萃取五味子木脂素的萃取
率。
五味子總木脂素萃取率獷萃取物中木脂素量/ 樣品量x lo o
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北五味子木脂素提取 〔 藝及提取物抑菌作用的研究
2221北五味子木脂素乙醉提取上藝的 . .. 研究
采用正交試驗(yàn)設(shè)計法, 對乙醇濃度、 提取時間、 提取次數(shù)和乙醉用量進(jìn)行四
因素三水平U ' ( )正交試驗(yàn)。正交試驗(yàn)設(shè)計如表22 3 -所小。
Tb2 腸 ( )。 ad。 al- 3 fts。欤 e2 ' a rne s c v
水平
表22。ǎ 素水平表 - L 3) ,
因
素
乙醉濃度 ( ) %
一 - 一 一 一 一 一 - ̄  ̄ . ̄ 一 -
提取時間 () }
- - 目 ., - .一 一
提取次數(shù) ( 次)
. 一 - .- .- .  ̄
乙醉用最 ( 倍〕
一 一 - 一 一  ̄
]
9 一
3 4
3 8 5 2 1 2
目‘‘ 一 一 - 一 - 一 - 一 一 一 一
稱取北五味子粗粉2g 置于10 L 0, 0m 圓底燒瓶中, 根據(jù)表1 ( 正交表的條 ,3 , ) 0 件, 進(jìn)行回流提取,過濾,合并濾液,回 收乙醇, 常壓干燥后備用。 2223北五味子木脂素水提取工藝的 ... 研究 稱取五味子粗粉2g 加水1 m , 0, 6 L 加熱煎煮提。 每次2, 0 次, h 合并煎煮液,
濾過,濾液濃縮,烘干,備用。
213五味子提取物抑菌作用的研究 ..
2131菌種活化 ... 將融化的培養(yǎng)基裝入試管, 滅菌后擺斜面。 在無菌條件下用劃線法將供試菌 種移接入相應(yīng)的斜面培養(yǎng)基上, 7 下培養(yǎng)1h 4, 于30 C 8-2h 進(jìn)行菌種斜面活化。
21 . .. 2供試菌株懸浮液的制備 3
將活化好的菌種, 在無菌條件下, 每種分別挑取兩環(huán)菌苔, 各用無菌水稀釋,
并用 麥?zhǔn)媳?濁管比 濁,制成含1-1 F/L 0 0 Um 菌懸液。 1 丫 21 . .. 3抑菌作用測定 3
() 1 紙片擴(kuò)散法 將北五味子水提取物、乙醇提取物、 超臨界C2 0萃取提取物分別用適量蒸餾
水、 0乙 7% 醇和氯仿溶解制成供試抑菌液。 在無菌條件 ,用移液器吸取菌懸液05 L 斤 . ,加入到1 L M 5 培養(yǎng)基中,搖勻 M
后 注 I 置 7 恒 培 箱 ,0i 取 , 瓊 表 干 , 用 傾平 , l 3 溫 養(yǎng) 中3n 出使脂 面燥 待 ? ℃ m后
選擇吸水性強(qiáng)的新華一號定性濾紙, 用打孔器制成若千直徑為6m的圓形濾 m
紙片, 分裝于潔凈干燥的培養(yǎng)皿內(nèi), 干熱滅菌后, 浸在抑菌液中, 同時用浸有無 菌水、 0 乙醇、氯仿的濾紙片作相應(yīng)對照, 7% 將濾紙片取出晾干,隔一定距離平
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北五味子木脂素提取工藝及 提取物抑菌作用的研究
鋪于己 1 0好的培養(yǎng)皿中,在3℃下培養(yǎng)1-1h 5 6 8 后,測定抑菌圈直徑,比 較抑菌
效果。實(shí)驗(yàn)重復(fù)6 次。 ( )最低抑菌濃度(I) 2 MC測定一平 板涂布法 將抑菌劑溶液定量地加入到熔化的培養(yǎng)基中,使提取物的濃度分別為5 % > 25% .5% .2 ,033%對照樣相應(yīng)加入等量的無菌水、7 乙醇、 . ,1 2 ,065% .1 , 0%
氯仿, 充分混合均勻, 傾注平皿。 培養(yǎng)基冷卻 將培養(yǎng)基底部兩等份并 待 后, 編號, 用接種針于兩等分中依次涂上兩種供試菌液, 在一定溫度下培養(yǎng)4 h 觀察菌體 8 ,
的生長情況, 從無菌生長的培養(yǎng)基中找出最低的提取物濃度, 即為該抑菌劑的最
低抑菌濃度(I MC。 )
()與苯甲 3 酸鈉和山梨酸鉀抑菌能力比 較 分別用 ( )中 2 所述方法測定苯甲酸鈉和山 梨酸鉀的最小抑菌濃度(I a MC )
3結(jié)果與分析
31測定北五味子總木脂素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 .
結(jié)果見表31 - ,圖3l -0
表31五味子總木月素標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值 - . Tb 31 rac f nn。螅睿 s p al -as bny b as dr a l e bo 。 g t d m e a
- 一 一
組 別
1
2 3 4 5 6 7 8 9
0 1 . 6
五味子乙 素量 (g m)
平均吸光度
0 18 .8
0 4 6 0 5 4。 7 1 .4 . 0 . 0 .9 . 6 9 3 1 1 8 0
2 5。保 2。保 3 7 .3 。 9
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北 五味子木脂素提。嚰疤崛∥镆志в玫牡V究
42關(guān)于北五味子木脂素的抑菌作用 .
采用紙片擴(kuò)散法與.c平板涂布法共同對北五味子提取物的抑菌效果進(jìn)行 u 一 檢測。在試驗(yàn)過程中,遇到的最大的問題是超臨界C2 0 萃取物和乙醇提取物中含
有不溶于水的成份,為解決超臨界C, O 萃取物和乙醇提取物與水難形成良好互溶 1 哇這一問題 ,木實(shí)驗(yàn)先用氯仿和7 % 0 乙醇分別將它們?nèi)芙,再定量加入到培養(yǎng)基
中,為排除氯仿和7 % 0 乙醇對抑菌效果的影響,在對照樣中也加入相同量的助溶 劑, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)加少量助溶劑的對照樣與不加助溶劑的樣品幾乎同時長菌, 從而排 除了 助溶劑對待測樣的影響。 木試驗(yàn)證實(shí)了不同工藝的提取物均具有抑菌作用。 但各試驗(yàn)組在紙片擴(kuò)散法 中所產(chǎn)生的抑菌圈直徑大小不同,這表明不同工藝的提取物抑菌效果具有差異,
具抑菌作用的成分也不止一種,且理化性質(zhì)穩(wěn)定,既有水溶性成分, 也有脂溶性
成分。 但其中有效抑菌的成分有哪些,以及其作用機(jī)理還不清楚。 提取物有效抑
菌成分的分離,其毒理學(xué)評價,最大劑量范圍等, 有待于進(jìn)一步研究。
5結(jié)論
5 1超臨界C 2 . 0萃取北五味子木脂素的最佳萃取工藝參數(shù)為:原料粒度為6^8 0 0
目, 投料量為30/ 萃取壓力為3 P, 0g罐, 0 a萃取溫度為4', M 5 萃取時間為1 mn C 2 i, 0 C2 0流量1Lh 北五味子總木脂素的萃取率和出 5/。 料率分別可達(dá)1 2 % 899 . 4 和2.9 0 0 6
52乙醇提取北五味子中木脂素最佳提取工藝為:4 . 倍量8 % 0 乙醇提。 次,每次
3 。北五味子總木脂素的提取率為074a h .。 0 53超臨界二氧化碳萃取法萃取五味子總木脂素的萃取率是乙醇提取法的14 . .5
倍,且遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于水提法為001的提取率。 .1 % 54北五味子超臨界C 2 . 0 萃取提取物、 乙醇提取物、 水提取物對大腸桿菌的最低 抑菌濃度分別為: .% 12 和 12 :對金黃色葡萄球菌, 25, 5% . . 5% 三者的最低抑 菌濃度分別為: % 12 % 5, 5 和5% . 。乙醇提取物對兩種菌的抑制效果均高于超臨
界提取物和水提取物。
55五味子不同工藝提取物的抑菌效果均低于苯甲酸鈉和山梨酸鉀。 .
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取工藝及捉取物抑菌牛用的研究 _
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gms-r ad t I i a 。妫怼 a u 。椋澹 n。 rad n ec o i Ge t 。 i V g n r 。耍 r nrr d e t 。 t t i L e n- n H L n s o s a ti。 f e y h i l aa g JB o M d m, 7 ( : 5 7 . n os ] i r e Ce 1 ,8 11^1 3 l [.o g h 9 5) 7 9 2 [ e f n K h , aP teai tg oat oi c。 a I N R 1] e。 g , S。臁。 l- tan ft n gnt a it 3 M 3L S u Y , O R l a tcv i a r e e c a s c i n C i t y d a i m n o p gms a caur a f m。 a r ci ns] Ac Po a l sg e f o in hug nl S in a。 s[ . h r c sn t r e i n d e r c s d h e iJ r h m a o
Rs97 0 ) 63 3 e 1 , ( ; -66 ,9 2 6 3
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吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
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吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
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吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北無 味子木脂A提取〕藝及提取物抑菌作用的研究
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吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
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o ctn。 i einl l t u d n fk r m d i [.u a f f ea d n。 d i a s s loc ein JJ r l ri n a c a p n e i o li c e Io n o
E npa a l y20, ( :7. 0 t oh m c o , 14 ) 1 2 h r o g 0 7 32 2
[ ] ,o aS D a .。恚 bl。 o p n : aeacv op n 9 H .Dr n . cn At ioi a n fm tat crlti l t 7. J D m ,G s n r a g s l s nb tiait f i e r a i y a
vli os I u aoA pe Mc b l y 00 8 0- 1 o t i[. r l pld。 io , 0, : 8 36 al lJJ n f i io o g 2 8 3 e o [ ]E e as ,..gr.n。幔, aZl m di l n i ataea 9 J Kl n n KJ eJe t n t u ein l t wt nbcrl 8 . m o A a , 。樱 e 1 u c a p s h i ti v . a a itI r l。 ohra l y 006: 1 6 cv [.u aoEm pa c o , 0,。矗 4. ti o y ) n f J l m og 2 9 2 2 [ ] a Pi p M v,a M r Bse ,ieD e o e ea Cm o tn Sm 9 J n。 e ye - ae。螅颍停 l r m z t o ps o a o e 9 e hi p e J n i e ic h h b , l . i n i d B l i l。椋簦蟆。 Es tl fm Ara Psr r sEo nr E gn io c Ati o h s na Ol a fc au Ga : -。 l as o g a cvi f e i i r n in te s l u s e e o i e K n [.。 oA ruu ad d ms , 0,偽44- 23 utJ J a gclr n Fo Ce i y 025 20 44 h ] o l f te o h t 2 { r u i r [ 0MVlo .Sle n nhcrl i oI s na i a i t。 s ui 1 ]。幔颍停 a r . taeaait I s tl g n Bcl c es 0 . e , . m o A i ti cv f ee i os s a l e n ty l a u r l dl e c r b t JIe aoaJ r l od。 ioy02 1 : 4 30 y aid o rh ]n r tnl aoFo Mc b l , 0,23 n l a t (.t i on f io o g2 ( ) 5 6 z r o n u
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吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素 捉。趟嚰疤崛∥镆志饔玫难芯
B eg e i , 0, ( : -8 i ni en 2 0 018 5 o n r g 0 9 ) 1
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[100 28 -1 C7 0 . -25 2 0
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吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究
致 謝
本文從試驗(yàn)設(shè)計到論文的寫作都是在導(dǎo)師陳曉平教授的悉心指導(dǎo)下完成的
導(dǎo)師平易 近人的品格、 侮人不倦的精神、 嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度、 敏銳的科研思維和淵
博的學(xué) 識讓我受益匪淺。 奮工 勤于好學(xué)的 勤 作、 精神時刻激勵和妓舞著 使我 我,
不但學(xué)到了 許多專業(yè)知識, 也樹立了 精益求精的敬業(yè)精神。 在論文完成之際, 謹(jǐn) 向?qū)熤乱猿绺叩木匆夂椭孕牡母兄x。
感謝崔 敬愛老師、 王平老師 驗(yàn)技術(shù)上的耐心 在實(shí) 指導(dǎo)和幫助。 謝吉 感 林農(nóng)業(yè) 大 學(xué)食品工 程學(xué)院研究生魏小川、 馬艷梅、 張旭、 金玉、 劉 吳秀華等同學(xué) 在論文 的完成過程中的給予的無私幫助。 另外, 在這學(xué)習(xí)的幾 年里, 我在吉 林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品工 程學(xué)院學(xué)習(xí) 到了 許多新 的專業(yè)知識, 開闊了 思路, 提高了 專業(yè)技能, 老師們的敬業(yè) 精神也讓我由衷欽佩, 在此向吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品工 程學(xué)院所有老師表示真誠的謝意。
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文
北五味子木脂素提取L藝及提取物抑菌作用的研究
個人簡介
劉華英,女,17年5 98 月生。20年畢業(yè)于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品 t 02 . 程學(xué)院食品
科學(xué)與工程 專業(yè),獲工學(xué)學(xué) ! 一 學(xué)位。
在學(xué)期間參加的研究項目: I 蕎麥規(guī)范化種植基地建設(shè)與綜合利用研究,古林省利技廳, 了 .、 一 一 要參加人 ,
合同編號:20-07 0520 . 2 利用北五味子生產(chǎn)抗疲勞保健食品關(guān)鍵技術(shù)研究,吉林省科技燈,主要參加 . 人,合同編號:20-08 0520 ,
發(fā)表論文:
上 陳曉平, 、 劉華英, 魏小川, 自 等. 然發(fā)酵酸菜汁中乳酸菌的分離篩選與鑒定研 究[ . J 食品科學(xué), 06 2( :1 4 7 20, 2 9- . 7) 9
本文關(guān)鍵詞:北五味子木脂素提取工藝及提取物抑菌作用的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:189244
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