【摘要】：隨著各國(guó)對(duì)石油需求量的不斷增加,促使海上石油開采業(yè)和運(yùn)輸業(yè)蓬勃發(fā)展,導(dǎo)致海上溢油事件頻繁發(fā)生,石油污染已嚴(yán)重威脅到海洋生態(tài)系統(tǒng)和海洋生物。本文選取了經(jīng)典的模式生物—馬糞海膽為研究對(duì)象,應(yīng)用環(huán)境化學(xué)、分子生物學(xué)等技術(shù)檢測(cè)石油烴污染對(duì)馬糞海膽的毒理效應(yīng),探討污染物對(duì)海洋生物的損傷機(jī)制,為海上石油烴污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供依據(jù)。研究結(jié)論如下： (1)海膽胚胎暴露在不同濃度的石油烴中的表現(xiàn)各不相同,在低濃度的石油烴影響下,表現(xiàn)出誘導(dǎo)效應(yīng),但是暴露濃度越大,抑制效果越顯著；不同暴露濃度對(duì)海膽胚胎的4種酶均有不同程度的影響,但是對(duì)于CAT和SOD的影響要明顯小于對(duì)GPx和GST的影響；石油烴對(duì)CAT、SOD、GPx及GST這4種酶活性的影響都很明顯,而囊胚期最為敏感。 (2)利用單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)(SCGE)研究石油烴對(duì)馬糞海膽管足DNA的損傷情況,研究結(jié)果表明：在油濃度為5、20、30、40mg·L-1的影響下,都沒有發(fā)現(xiàn)DNA損傷,但是在油濃度為50mg·L-1時(shí),發(fā)現(xiàn)了明顯的DNA損傷情況。該暴露濃度下,隨著暴露時(shí)間的增加,馬糞海膽管足細(xì)胞DNA損傷百分比、彗尾DNA百分含量和DNA平均遷移長(zhǎng)度都在增加。 (3)利用單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析技術(shù)(SNPS)研究石油烴對(duì)馬糞海膽體內(nèi)SPLOX.WNT8和HNF—6這三種基因的損傷情況,結(jié)果表明：SPLOX基因在編碼區(qū)第41位上發(fā)生堿基A—G的變化,而對(duì)應(yīng)的氨基酸則由賴氨酸變成精氨酸；WNT8基因在編碼區(qū)706位上T—C,對(duì)應(yīng)的氨基酸由苯丙氨酸變?yōu)榱涟彼幔籋NF—6基因在編碼區(qū)1119位上G—C,對(duì)應(yīng)的氨基酸由絲氨酸變?yōu)樘K氨酸。利用高效液相色譜研究馬糞海膽在石油烴的影響下,體內(nèi)DNA甲基化的發(fā)生情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),暴露時(shí)間和甲基化程度二者呈正比關(guān)系。 (4)通過經(jīng)典的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)(RAPD)研究了石油烴對(duì)馬糞海膽DNA的損傷情況,優(yōu)化了RAPD反應(yīng)的最佳條件并且探討了馬糞海膽的多態(tài)性,篩選最佳引物研究損傷情況。具體結(jié)果為：Taq酶、引物、dNTP濃度分別為2U、100μmol·L-1、2500μmol·L-1, DNA按照80倍稀釋,最后的25μL體系為：Taq酶、10×Buffer、dNTP、DNA、引物和ddH2O分別為0.2μL、2.5μL、2μL、1μL、1μL和18.3μL。45個(gè)個(gè)體之間的最大、最小和平均遺傳距離分別為0.5731、0.2569和0.3254。討論石油烴對(duì)海膽管足DNA損傷情況,發(fā)現(xiàn)引物S65、Sll、S49均出現(xiàn)了目標(biāo)帶的缺失或者明暗度的變化。
【學(xué)位授予單位】：大連海事大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：X174;X55

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2779749