【摘要】：目的:建立抗麻痹性貝毒素GTX2,3單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系,制備抗GTX2,3單克隆抗體,并鑒定其免疫學(xué)特性。 方法:利用醛化法將GTX2,3與載體牛血清白蛋白(BSA)偶聯(lián),制備完全抗原。以GTX2,3-BSA免疫小鼠,應(yīng)用雜交瘤技術(shù)建立分泌抗GTX2,3單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。GTX2,3與鑰孔血藍(lán)蛋白(KLH)偶聯(lián)作為檢測(cè)抗原,用間接ELISA法篩選陽(yáng)性克隆株。用體內(nèi)誘生腹水法生產(chǎn)GTX2,3腹水型單克隆抗體。對(duì)所得陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞作染色體分析并對(duì)單克隆抗體進(jìn)行特性分析。 結(jié)果:獲得三株穩(wěn)定分泌抗GTX2,3單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株E9:F4、E9:F10、E9:G9。間接ELISA法檢測(cè)E9:F10細(xì)胞株腹水抗體效價(jià)為1.4×10~(-5)。 結(jié)論:醛化法能使毒素GTX2,3與載體蛋白偶聯(lián)。半抗原GTX2,3與載體蛋白偶聯(lián)后作為免疫原,可制備抗GTX2,3抗血清和單克隆抗體。
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：X55
【圖文】：

圖5陽(yáng)性克隆孔的篩選Fig.5SeereningofhtePositiVeclonesEg細(xì)胞轉(zhuǎn)部分到24孔板擴(kuò)大培養(yǎng)，2天后待Eg細(xì)胞培養(yǎng)上清變USA法再次檢測(cè)以確認(rèn)其陽(yáng)性的可靠。結(jié)果見(jiàn)圖6:

Fig.5SeereningofhtePositiVeclones將Eg細(xì)胞轉(zhuǎn)部分到24孔板擴(kuò)大培養(yǎng)，2天后待Eg細(xì)胞培養(yǎng)上清變黃，用間接EUSA法再次檢測(cè)以確認(rèn)其陽(yáng)性的可靠。結(jié)果見(jiàn)圖6:

本文編號(hào)：2727819