本文選題：紙芯片 + 鹽酸克倫特羅��； 參考：《大連理工大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：生物標(biāo)記物,是隨著分子生物學(xué)和免疫學(xué)的研究深入,而發(fā)展起來的一類與細(xì)胞生長增殖有關(guān)的標(biāo)志物。隨著人們生活水平的提高和健康意識的增強(qiáng),生物標(biāo)記物的檢測也變得愈發(fā)重要,傳統(tǒng)的生物標(biāo)記物的檢測方法包括液質(zhì)聯(lián)用,氣質(zhì)聯(lián)用等,這些方法大多需要專人操作大型儀器,而且花費(fèi)高,耗時長。紙芯片作為一種新興的檢測平臺具有質(zhì)量輕、造價低、生物相容性好、無污染等很多優(yōu)勢,在生物標(biāo)記物檢測方面具有廣闊的前景。本論文以鹽酸克倫特羅和皮質(zhì)醇為案例,結(jié)合免疫分析方法和高靈敏度的表面增強(qiáng)拉曼檢測技術(shù),開發(fā)了兩種檢測限低、實用性強(qiáng)的,以紙芯片為材質(zhì)的生物標(biāo)記物分析手段,具體內(nèi)容包括：(1)基于并列開關(guān)型紙芯片和免疫增強(qiáng)拉曼的瘦肉精檢測鹽酸克倫特羅具有促進(jìn)脂肪分解,提高動物體瘦肉率的作用,但是因其會對人體造成傷害而被我國明令禁止使用,為防止不法商販為牟取暴利而濫用,鹽酸克倫特羅的檢測非常必要。本文提取了豬毛中的鹽酸克倫特羅,采用噴蠟打印法制作了并列開關(guān)型紙芯片,合成了金納米粒子,優(yōu)化了金納米粒子與信號分子MBA連接的反應(yīng)時間和信號分子加入量,并在最佳條件下進(jìn)行了鹽酸克倫特羅抗體的連接,篩選了不同紙張上金標(biāo)抗體的SERS增強(qiáng)效果,最終選擇了whatman No.1濾紙作為芯片制作材料,在自主設(shè)計的紙芯片上實現(xiàn)了豬毛顆粒的過濾、富集,并最終通過開關(guān)控制流體流動進(jìn)而實現(xiàn)了免疫反應(yīng),可以進(jìn)行三種物質(zhì)或者三個濃度物質(zhì)的檢測,檢測限可以達(dá)到0.1 pg/mL。(2)基于折疊孔板型紙芯片和免疫增強(qiáng)拉曼的皮質(zhì)醇檢測皮質(zhì)醇是評價機(jī)體應(yīng)激程度的重要指標(biāo),其檢測可以作為表征人們心理壓力的客觀依據(jù),尤其是毛發(fā)中皮質(zhì)醇檢測更可以客觀的反應(yīng)人們長期的心理壓力情況。本文考察了金標(biāo)皮質(zhì)醇抗體的修飾條件,篩選出的最佳濾紙whatman No.1濾紙為材質(zhì)制作了折疊孔板型紙芯片,并利用紙芯片的折疊功能實現(xiàn)了人毛發(fā)提取液的過濾,競爭性免疫反應(yīng)。該紙芯片還設(shè)計了96個并行單元,滿足高通量檢測要求,檢測限可以達(dá)到0.1 pg/mL。最后,將折疊孔板型芯片用于便攜拉曼光譜儀檢測,檢測限可以達(dá)到1pg/mL,為生物標(biāo)記物的實時檢測奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Biomarkers are a kind of biomarkers related to cell growth and proliferation developed with the development of molecular biology and immunology. With the improvement of people's living standard and health awareness, the detection of biomarkers has become more and more important. Most of these methods require personnel to operate large-scale instruments, and expensive, time-consuming. As a new detection platform, paper chip has many advantages, such as light quality, low cost, good biocompatibility, no pollution and so on, so it has a broad prospect in biomarker detection. In this paper, clenbuterol hydrochloride and cortisol were taken as examples, combined with immunoassay and highly sensitive surface-enhanced Raman detection technique, two kinds of biomarkers with low detection limit and strong practicability were developed, which were based on paper chip. The specific contents include: 1) Detection of clenbuterol hydrochloride based on juxtaposition paper chip and immune-enhanced Raman has the effect of promoting fat decomposition and increasing lean meat rate of animals. However, it is forbidden to be used in our country because of its harm to human body. In order to prevent the illegal traders from abusing for profiteering, the detection of clenbuterol hydrochloride is very necessary. In this paper, clenbuterol hydrochloride was extracted from porcine hair, and the parallel switch paper chip was made by wax spray printing method. Gold nanoparticles were synthesized. The reaction time and the amount of signal molecule were optimized when gold nanoparticles were connected with signal molecule MBA. Under the best conditions, the clenbuterol hydrochloride antibody was connected, and the SERS enhancement effect of gold labeled antibody on different paper was screened. Finally, the whatman No.1 filter paper was selected as the chip material. On the independently designed paper chip, the pig hair particles can be filtered and enriched, and finally the flow of fluid can be controlled by switch, and then the immune reaction can be realized, which can be used for the detection of three substances or three concentration substances. The detection limit can reach 0.1 PG / m 路L ~ (2) cortisol detection based on fold-hole board chip and immuno-enhanced Raman is an important index to evaluate the stress degree of the body, and its detection can be used as an objective basis to characterize people's psychological stress. In particular, cortisol detection in hair can objectively reflect people's long-term psychological stress. In this paper, the modified conditions of gold-labeled cortisol antibody were investigated. The best filter paper whatman No.1 filter paper was used as material to fabricate the paper chip with folding hole, and the filter of human hair extract was realized by the folding function of the paper chip, and the competitive immune reaction was realized. The paper chip has also designed 96 parallel units to meet the high throughput detection requirements, and the detection limit can reach 0.1 PG / mL. Finally, the folded hole plate chip is used for the detection of portable Raman spectrometer. The detection limit can reach 1 PG / mL, which lays a foundation for the real-time detection of biomarkers.
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：TS251.7;TN492

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本文編號：1931242