本文關(guān)鍵詞：基于MspA蛋白質(zhì)納米孔傳感器的主客體化學(xué)研究

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【摘要】：以大腸桿菌原核系統(tǒng)表達(dá)的方法制備了MspA蛋白質(zhì)納米孔,并利用表面活性劑高溫提取獲得高活性MspA蛋白納米孔。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,0.5%的提取劑90℃提取30 min為最佳提取條件。利用制備的MspA納米孔在單分子水平上研究了其與多種環(huán)糊精的相互作用,結(jié)果表明,在眾多環(huán)糊精分子中,全-6-氨基-β-環(huán)糊精(am_7-β-CD)與MspA蛋白納米孔相互作用較強(qiáng)且阻塞平臺(tái)較一致,其滯留時(shí)間隨電壓增大而逐漸減小,但阻塞電流受電壓影響不大。篩選使用am_7-β-CD作為適配體非共價(jià)鍵裝配MspA納米孔,在單分子水平上研究主客體化學(xué)反應(yīng)。加入am_7-β-CD后,當(dāng)鹽酸金剛烷胺小分子濃度為50 nmol/L時(shí),即出現(xiàn)二級(jí)阻塞平臺(tái),其滯留時(shí)間隨電壓增大而逐漸減小。這種新型蛋白質(zhì)納米孔單分子傳感器可用于有機(jī)小分子的檢測(cè)識(shí)別,極大拓寬了MspA納米孔分析技術(shù)的的應(yīng)用范圍。
【作者單位】： 西北大學(xué)化學(xué)與材料科學(xué)學(xué)院;西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： Mycobacterium smegmatis porin A 納米通道 單分子檢測(cè) 環(huán)糊精 鹽酸金剛烷胺
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(Nos.21175105,21375104,21327806) 教育部博士點(diǎn)基金(No.20126101110015)資助~~
【分類號(hào)】：Q503;TB383.1
【正文快照】： 1引言蛋白質(zhì)納米孔分析技術(shù)融合了納米技術(shù)、生物技術(shù)和單分子技術(shù),是最簡(jiǎn)單、成本最低、高靈敏的單分子檢測(cè)技術(shù)。目前,基于α-溶血素納米孔的分析技術(shù)已經(jīng)在單分子檢測(cè)、單分子化學(xué)反應(yīng)及單分子DNA測(cè)序等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,研究對(duì)象包括金屬離子、有機(jī)小分子、DNA、RNA、多肽

【相似文獻(xiàn)】

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