發(fā)布時(shí)間：2023-05-31 21:29

　　蛋白質(zhì)磷酸化作為一種十分重要的翻譯后修飾手段,參與了細(xì)胞分化、新陳代謝、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)等眾多生理過(guò)程。大量研究表明,蛋白質(zhì)磷酸化異常與許多重要疾病的發(fā)生息息相關(guān),尤其是癌癥和神經(jīng)退行性疾病。因此,采用適當(dāng)?shù)姆椒▽?duì)磷酸化蛋白進(jìn)行全面分析有助于相關(guān)疾病的病理研究和早期診斷。但是,由于磷酸化蛋白的豐度及離子化效率很低,當(dāng)采用質(zhì)譜技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分析時(shí),會(huì)受到大量非磷酸化蛋白和無(wú)機(jī)鹽的干擾。因此,在質(zhì)譜分析前對(duì)復(fù)雜樣品中的磷酸化蛋白或磷酸化肽進(jìn)行選擇性分離富集顯得至關(guān)重要。目前,針對(duì)磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的研究策略主要有兩種:基于酶切肽段的bottom-up策略和基于完整蛋白質(zhì)的top-down策略。與bottom-up策略相比,由于缺乏有效的完整磷酸化蛋白分離富集材料和方法,top-down策略的發(fā)展受到了很大限制。目前除了價(jià)格昂貴的免疫共沉淀法之外,專門(mén)針對(duì)于有效抓取整條磷酸化蛋白的方法還鮮有報(bào)道�；诖�,本論文結(jié)合了介孔材料、磁性材料和硫脲類陰離子受體三者的優(yōu)勢(shì),開(kāi)發(fā)出一種新型有機(jī)/無(wú)機(jī)雜化材料用于磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的直接分離。本論文實(shí)驗(yàn)探究?jī)?nèi)容如下:(1)設(shè)計(jì)了一種基于硫脲的識(shí)別單體5-(3-丙...

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 翻譯后修飾蛋白質(zhì)組學(xué)研究的意義
    1.2 蛋白質(zhì)磷酸化修飾的概述
        1.2.1 定義和主要類型
        1.2.2 重要的生物學(xué)意義
    1.3 磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的研究策略
        1.3.1 Bottom-up策略
        1.3.2 磷酸化肽的分離富集方法
        1.3.3 Top-down策略
        1.3.4 磷酸化蛋白的分離富集方法
    1.4 有機(jī)/無(wú)機(jī)雜化材料用于分離富集磷酸化蛋白的優(yōu)勢(shì)
    1.5 陰離子受體用于識(shí)別磷酸根的概述
    1.6 本論文研究?jī)?nèi)容與創(chuàng)新點(diǎn)
        1.6.1 本論文研究?jī)?nèi)容
        1.6.2 本論文創(chuàng)新點(diǎn)
第2章 基于硫脲的有機(jī)單體與磷酸化蛋白相互作用的研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)原料及儀器
        2.2.2 重要有機(jī)單體的合成
        2.2.3 分子間相互作用的熒光滴定實(shí)驗(yàn)
        2.2.4 分子間相互作用的核磁滴定實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 分子間相互作用的紅外滴定實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 AIPA單分子層對(duì)磷酸化蛋白的QCM吸附實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 AIPA單分子層表面AFM形貌測(cè)試
        2.2.8 AIPA單分子層表面接觸角測(cè)試
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 合成產(chǎn)物的表征
        2.3.2 熒光滴定結(jié)果分析
        2.3.3 核磁滴定結(jié)果分析
        2.3.4 紅外滴定結(jié)果分析
        2.3.5 QCM吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        2.3.6 AFM形貌測(cè)試結(jié)果分析
        2.3.7 表面接觸角測(cè)試結(jié)果分析
    2.4 本章小結(jié)
第3章 Fe₃O₄@mTiO₂-AIPA材料的制備與表征
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 主要實(shí)驗(yàn)原料及儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.3 表征測(cè)試方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.1 樣品形貌表征
        3.3.2 樣品比表面積及孔徑分析
        3.3.3 樣品X射線衍射分析
        3.3.4 樣品磁響應(yīng)性分析
        3.3.5 樣品熱失重分析
        3.3.6 樣品紅外光譜分析
        3.3.7 樣品X射線光電子能譜分析
        3.3.8 樣品表面電勢(shì)分析
    3.4 本章小結(jié)
第4章 Fe₃O₄@mTiO₂-AIPA材料在磷酸化蛋白分離中的應(yīng)用
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 主要實(shí)驗(yàn)原料及儀器
        4.2.2 磷酸化蛋白的分離過(guò)程
        4.2.3 RP-HPLC分析步驟
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.3.1 不同梯度程序?qū)Φ鞍讟?biāo)準(zhǔn)品洗脫效果的影響
        4.3.2 不同流動(dòng)相組成對(duì)蛋白標(biāo)準(zhǔn)品洗脫效果的影響
        4.3.3 Fe₃O₄@mTiO₂-AIPA材料直接分離α-酪蛋白結(jié)果分析
    4.4 本章小結(jié)
第5章 論文結(jié)論與展望
    5.1 論文結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間獲得與學(xué)位論文相關(guān)的科研成果
參加科研項(xiàng)目情況



本文編號(hào)：3826035