蛋白質磷酸化作為一種十分重要的翻譯后修飾手段,參與了細胞分化、新陳代謝、信息轉導等眾多生理過程。大量研究表明,蛋白質磷酸化異常與許多重要疾病的發(fā)生息息相關,尤其是癌癥和神經(jīng)退行性疾病。因此,采用適當?shù)姆椒▽α姿峄鞍走M行全面分析有助于相關疾病的病理研究和早期診斷。但是,由于磷酸化蛋白的豐度及離子化效率很低,當采用質譜技術對其進行分析時,會受到大量非磷酸化蛋白和無機鹽的干擾。因此,在質譜分析前對復雜樣品中的磷酸化蛋白或磷酸化肽進行選擇性分離富集顯得至關重要。目前,針對磷酸化蛋白質組學的研究策略主要有兩種:基于酶切肽段的bottom-up策略和基于完整蛋白質的top-down策略。與bottom-up策略相比,由于缺乏有效的完整磷酸化蛋白分離富集材料和方法,top-down策略的發(fā)展受到了很大限制。目前除了價格昂貴的免疫共沉淀法之外,專門針對于有效抓取整條磷酸化蛋白的方法還鮮有報道。基于此,本論文結合了介孔材料、磁性材料和硫脲類陰離子受體三者的優(yōu)勢,開發(fā)出一種新型有機/無機雜化材料用于磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的直接分離。本論文實驗探究內容如下:(1)設計了一種基于硫脲的識別單體5-(3-丙...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 翻譯后修飾蛋白質組學研究的意義
    1.2 蛋白質磷酸化修飾的概述
        1.2.1 定義和主要類型
        1.2.2 重要的生物學意義
    1.3 磷酸化蛋白質組學的研究策略
        1.3.1 Bottom-up策略
        1.3.2 磷酸化肽的分離富集方法
        1.3.3 Top-down策略
        1.3.4 磷酸化蛋白的分離富集方法
    1.4 有機/無機雜化材料用于分離富集磷酸化蛋白的優(yōu)勢
    1.5 陰離子受體用于識別磷酸根的概述
    1.6 本論文研究內容與創(chuàng)新點
        1.6.1 本論文研究內容
        1.6.2 本論文創(chuàng)新點
第2章 基于硫脲的有機單體與磷酸化蛋白相互作用的研究
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 主要實驗原料及儀器
        2.2.2 重要有機單體的合成
        2.2.3 分子間相互作用的熒光滴定實驗
        2.2.4 分子間相互作用的核磁滴定實驗
        2.2.5 分子間相互作用的紅外滴定實驗
        2.2.6 AIPA單分子層對磷酸化蛋白的QCM吸附實驗
        2.2.7 AIPA單分子層表面AFM形貌測試
        2.2.8 AIPA單分子層表面接觸角測試
    2.3 實驗結果與分析
        2.3.1 合成產(chǎn)物的表征
        2.3.2 熒光滴定結果分析
        2.3.3 核磁滴定結果分析
        2.3.4 紅外滴定結果分析
        2.3.5 QCM吸附實驗結果分析
        2.3.6 AFM形貌測試結果分析
        2.3.7 表面接觸角測試結果分析
    2.4 本章小結
第3章 Fe₃O₄@mTiO₂-AIPA材料的制備與表征
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 主要實驗原料及儀器
        3.2.2 實驗方法
        3.2.3 表征測試方法
    3.3 實驗結果與分析
        3.3.1 樣品形貌表征
        3.3.2 樣品比表面積及孔徑分析
        3.3.3 樣品X射線衍射分析
        3.3.4 樣品磁響應性分析
        3.3.5 樣品熱失重分析
        3.3.6 樣品紅外光譜分析
        3.3.7 樣品X射線光電子能譜分析
        3.3.8 樣品表面電勢分析
    3.4 本章小結
第4章 Fe₃O₄@mTiO₂-AIPA材料在磷酸化蛋白分離中的應用
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 主要實驗原料及儀器
        4.2.2 磷酸化蛋白的分離過程
        4.2.3 RP-HPLC分析步驟
    4.3 實驗結果與分析
        4.3.1 不同梯度程序對蛋白標準品洗脫效果的影響
        4.3.2 不同流動相組成對蛋白標準品洗脫效果的影響
        4.3.3 Fe₃O₄@mTiO₂-AIPA材料直接分離α-酪蛋白結果分析
    4.4 本章小結
第5章 論文結論與展望
    5.1 論文結論
    5.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀碩士期間獲得與學位論文相關的科研成果
參加科研項目情況



本文編號：3826035