蛋白質(zhì)磷酸化是最常見、最重要的翻譯后修飾之一,在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞凋亡等生物學(xué)過程中起關(guān)鍵的調(diào)控作用。但是,磷酸化蛋白/肽具有低豐度和負(fù)電荷的特點(diǎn),在生物質(zhì)譜常規(guī)的正離子模式下,易受到高豐度非磷酸化蛋白/肽的信號(hào)抑制,難以直接對(duì)其進(jìn)行直接分析。因此,有必要在質(zhì)譜分析前對(duì)生物樣品中的磷酸化蛋白/肽進(jìn)行選擇性富集。本研究基于三磷酸腺苷（ATP）配基,制備了新型鋯離子固定化親和磁納米粒子(Zr⁴⁺-ATP-MNP)。掃描電鏡和元素分析的表征結(jié)果表明, Zr⁴⁺-ATP-MNP制備成功。采用所制備的Zr⁴⁺-ATP-MNP材料對(duì)磷酸化肽進(jìn)行富集,以磷酸化蛋白β-酪蛋白（β-casein）的酶解液為選擇性實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ綐悠?采用質(zhì)譜法可鑒定出9條磷酸化肽;以β-casein和非磷酸化蛋白牛血清白蛋白（BSA）酶解液（1∶100,n/n）混合物為干擾實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ綐悠?采用質(zhì)譜可鑒定出5條磷酸化肽。富集后,磷酸化肽的質(zhì)譜信號(hào)強(qiáng)度顯著提高,可有效去除非磷酸化肽。Zr⁴⁺-ATP-MNP在牛奶酶解產(chǎn)物中的應(yīng)用進(jìn)一步表明,其對(duì)復(fù)... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 引 言
2 實(shí)驗(yàn)部分
    2.1 儀器與試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 Zr4+-ATP-MNP的制備
        2.2.2 樣品處理
        2.2.3 Zr4+-ATP-MNP應(yīng)用于磷酸化肽的捕獲
3 結(jié)果與討論
    3.1 Zr4+-ATP-MNP材料表征
    3.2 Zr4+-ATP-MNP對(duì)磷酸化肽的富集選擇性考察
    3.3 Zr4+-ATP-MNP用于牛奶蛋白酶解產(chǎn)物中磷酸化肽的選擇性富集
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新型固定化鐵離子親和色譜整體柱的制備及評(píng)價(jià)[J]. 張麗媛,王暉,梁振,單亦初,張麗華,張玉奎.  分析化學(xué). 2010(05)



本文編號(hào)：3691408