作為生命體內(nèi)重要的遺傳信息載體,核酸是生物研究和醫(yī)學(xué)診斷的重要標(biāo)志物。開發(fā)具有刺激響應(yīng)型核酸納米材料已成為藥物遞送載體等領(lǐng)域的研究重點(diǎn)。此外,通過等溫信號(hào)放大技術(shù)構(gòu)建核酸納米材料已廣泛應(yīng)用于生物傳感、生物成像及生物醫(yī)藥等方面。本文利用點(diǎn)擊化學(xué)、酰胺反應(yīng)等將核酸與聚合物連接合成核酸納米膠束,進(jìn)一步基于滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)（rolling circle amplification,RCA）、DNA自組裝等構(gòu)建核酸納米膠束功能組裝體,由腫瘤微環(huán)境、生物分子等引發(fā)藥物釋放,成功應(yīng)用于細(xì)胞水平及活體層面腫瘤的協(xié)同治療,有效提高腫瘤的治療效果,為DNA納米技術(shù)、信號(hào)放大成像分析、腫瘤協(xié)同治療等領(lǐng)域的發(fā)展提供了新方法和新思路。本論文主要開展了以下三個(gè)方面的工作:一、基于滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)技術(shù)構(gòu)建p H響應(yīng)型DNA納米膠束功能組裝體首先,通過點(diǎn)擊化學(xué)合成兩親性的引物-聚乳酸偶聯(lián)物,其自組裝形成DNA納米膠束,并原位引發(fā)RCA反應(yīng)。隨后將RCA產(chǎn)物與含有si RNA的雙螺旋/三螺旋分子開關(guān)探針交聯(lián),制備得到具有p H響應(yīng)的DNA納米膠束,并負(fù)載抗癌藥物阿霉素（Dox）,從而實(shí)現(xiàn)DNA納米膠束的功能組裝。在弱酸性/中性... 

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 等溫信號(hào)放大技術(shù)
        1.1.1 基于滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)的等溫信號(hào)放大技術(shù)
        1.1.2 基于DNA鏈取代反應(yīng)的等溫信號(hào)放大技術(shù)
    1.2 DNA納米結(jié)構(gòu)
        1.2.1 DNA折紙結(jié)構(gòu)
        1.2.2 DNA納米管
        1.2.3 DNA納米花
        1.2.4 DNA嵌段共聚物
    1.3 癌癥及其治療方法
        1.3.1 癌癥的概述
        1.3.2 癌癥的治療方法
    1.4 課題研究的內(nèi)容及意義
第二章 基于滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)技術(shù)構(gòu)建pH響應(yīng)型DNA納米膠束功能組裝體
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 主要試劑與儀器
        2.2.2 引物-PLA偶聯(lián)物的制備
        2.2.3 Dox/si RNA/DNMs的制備
        2.2.4 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        2.2.5 zeta電位表征
        2.2.6 原子力顯微鏡(AFM)表征
        2.2.7 熒光光譜表征
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        2.3.2 N3-PLA核磁氫譜和紅外吸收光譜表征
        2.3.3 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        2.3.4 原子力顯微鏡表征
        2.3.5 zeta電勢(shì)表征
        2.3.6 si RNA/DNMs的載藥量及穩(wěn)定性
    2.4 小結(jié)
第三章 pH響應(yīng)型DNA納米膠束功能組裝體用于間變性大細(xì)胞淋巴瘤化療-基因協(xié)同療法
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 主要試劑及儀器
        3.2.2 激光共聚焦表征
        3.2.3 流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR(q RT-PCR)分析
        3.2.5 蛋白質(zhì)印跡分析
        3.2.6 細(xì)胞毒性分析
        3.2.7 Annexin V-APC/7-AAD染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        3.2.8 Calcein AM/PI實(shí)驗(yàn)
        3.2.9 活體實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        3.3.2 DNMs作為遞送載體的細(xì)胞內(nèi)行為
        3.3.3 mRNA及蛋白的表達(dá)量
        3.3.4 Dox/si RNA/DNMs的協(xié)同治療作用
        3.3.5 活體治療效果評(píng)估
    3.4 小結(jié)
第四章 負(fù)載雙藥的DNA納米膠束功能組裝體的構(gòu)建
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 主要試劑與儀器
        4.2.2 PLGA-Cur NPs的制備
        4.2.3 DNA納米膠束的制備
        4.2.4 姜黃素載藥量的測(cè)定
        4.2.5 DLS及 zeta電位表征
        4.2.6 酶活性的測(cè)定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        4.3.2 PLGA-Cur NPs的表征
        4.3.3 載藥效率的計(jì)算
        4.3.4 G-四聯(lián)體/hemin DNA酶催化活性的測(cè)定
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3681823