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生物分子功能化納米酶的模擬酶性質(zhì)及可視化生物傳感應(yīng)用

發(fā)布時間:2021-11-16 08:25
  近年來,隨著納米技術(shù)的發(fā)展,具有天然酶性質(zhì)的無機納米酶倍受研究者關(guān)注。與天然酶相比,納米酶具有成本低廉、制備簡單、易于保存運輸、環(huán)境耐受性高等優(yōu)點,已廣泛應(yīng)用于催化化學(xué)、分析化學(xué)和生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。無機納米酶表面的物化特性是影響其類酶催化活性的關(guān)鍵因素,因此納米酶的表面修飾為新型納米酶的設(shè)計、制備和應(yīng)用提供了契機。氨基酸和蛋白質(zhì)用于合成多功能納米材料具有明顯的優(yōu)勢,例如溫和的反應(yīng)條件、獨特的分子結(jié)構(gòu)、多樣化的功能、高度特異性的生物識別和靈活的自組裝能力;诖,研究制備了氨基酸和蛋白質(zhì)修飾的納米酶,并對它們的類過氧化物酶活性以及在可視化檢測生物分子應(yīng)用等方面進行了研究,主要開展了以下三個方面的工作:1.組氨酸功能化金納米團簇的模擬酶性質(zhì)及可視化檢測銅離子和組氨酸結(jié)合組氨酸穩(wěn)定的納米金團簇(His-AuNCs)模擬酶性質(zhì)和組氨酸的兩可配體性質(zhì),發(fā)展了一種基于納米金團簇的類酶活性“開關(guān)”探針檢測銅離子和組氨酸的新方法。以組氨酸為還原劑和穩(wěn)定劑,水相合成了組氨酸穩(wěn)定的納米金團簇。His-AuNCs在以3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和雙氧水作為底物時表現(xiàn)出較強的類過氧化物酶的活性。向... 

【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:111 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

生物分子功能化納米酶的模擬酶性質(zhì)及可視化生物傳感應(yīng)用


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分析檢測一直都是大家研究關(guān)注的重點,一般傾向于熒光[1<X)]等手段相結(jié)合。重金屬離子還可以用比色法快[|()1]發(fā)現(xiàn)Hg2+會增強檸檬酸鈉修飾納米金的類過氧化物量檢測。檸檬酸鈉修飾納米金的類酶活性較低,加入Hg2+還原成Hg^由于Hg^與金之間有較強的親和性,化,使導(dǎo)致羥基自由基可以更容易地吸附到納米材料此金納米的類酶活性會明顯增加,從而可以實現(xiàn)對Hg2+了能夠“屏蔽”Au@Pt納米棒氧化物酶活性的實驗。結(jié)米棒表面活性位點來抑制納米酶的活性,是不可逆的抑物競爭活性位點來抑制納米酶的活性,是可逆的抑制劑入S2%由于S2?與金納米粒子生成硫化金納米粒子,致納米酶活性顯著降低,可通過其類過氧化物酶活性

熒光光譜圖,熒光激發(fā),組氨酸


0.0--——i——■ ̄「丨■圓_丨丨i丨11丨丨丨丨丨丨1"■丨__丨■丨川丨??250?300?350?400?450?500??Wavelength?(nm)??圖2.1?His-AuNCs、組氨酸和氯金酸的紫外-可見光譜圖??2.2為His-AuNCs的熒光發(fā)射以及激發(fā)光譜圖。如圖2.2熒光發(fā)射光譜所示,最大激發(fā)和發(fā)射波長分別為380?nm和490?mn,且激發(fā)和發(fā)射峰峰型是對稱較寬的熒光激發(fā)和發(fā)射波長范圍。我們同時發(fā)現(xiàn),在相同的激發(fā)和發(fā)射波和組氨酸并不產(chǎn)生熒光。可以看出淡黃色的組氨酸功能化金納米簇在365?nm示出淡藍色的熒光(如圖2.2插圖)。證明所制備物質(zhì)發(fā)出的熒光是由尺寸小級的金納米簇產(chǎn)生的,而不是由金納米粒子產(chǎn)生的。同時證明己經(jīng)成功制能化的金納米簇。??們同時對金納米簇的穩(wěn)定性進行了探究。我們分別分析了合成的組氨酸保在穩(wěn)定之后、放置45天后和90天之后的熒光光譜圖,結(jié)果發(fā)現(xiàn):金納米簇剛制備金納米簇相比沒有發(fā)生明顯變化。這表明我們制備的組氨酸保護的保存在4?°C冰箱中長達近3個月,具有較好的穩(wěn)定性。??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于銀/鉑納米模擬酶表面修飾的銅離子比色檢測方法研究[J]. 吳亮亮,錢志娟,謝正軍,張瑩瑩,彭池方.  分析化學(xué). 2017(04)
[2]Recent advances in biological detection with magnetic nanoparticles as a useful tool[J]. Liwei Lu,Xiuyu Wang,Chuanxi Xiong,Li Yao.  Science China(Chemistry). 2015(05)



本文編號:3498505

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