側(cè)流層析檢測技術(shù)（LFSB）改善了傳統(tǒng)檢測技術(shù)中步驟復(fù)雜、成本高昂、耗費(fèi)時(shí)間等問題,為目標(biāo)物的快速、精準(zhǔn)、即時(shí)檢測提供了一個(gè)良好的選擇與分析平臺(tái),并廣泛的應(yīng)用于生物化學(xué)、農(nóng)業(yè)、食品與環(huán)境安全領(lǐng)域。但是層析檢測技術(shù)仍存在需要改進(jìn)與優(yōu)化的方面,如缺少對(duì)某些癌癥標(biāo)記物的檢測,檢測的靈敏度需要進(jìn)一步的提升,使用簡便性有進(jìn)一步簡化的必要等等。本論文將致力于通過改進(jìn)納米粒子標(biāo)記物和制備新型的層析檢測試紙來解決以上存在的問題。本論文主要研究內(nèi)容包括以下五個(gè)部分:1、基于Y形DNA和目標(biāo)物循環(huán)放大的側(cè)流層析生物傳感器對(duì)miRNA三線檢測。本文開發(fā)了一種基于目標(biāo)循環(huán)放大和LFSB的可視、靈敏和準(zhǔn)確的檢測miRNA的簡單策略。利用Y形DNA探針,本研究將易生物降解的miRNA轉(zhuǎn)化為LFSB上成熟的DNA檢測。和兩線的LFSB相比,三線的LFSB提供了邏輯判斷和更令人信服的結(jié)果。在最優(yōu)條件下,溶液中miR-16的可視定性檢測限為0.1pM,檢測范圍為0.0001-10nM。系統(tǒng)顯示了對(duì)完全互補(bǔ)目標(biāo)物和錯(cuò)配對(duì)鏈的很好的特異性識(shí)別能力。并且,在不需要復(fù)雜的純化和分離過程的前提下,本研究在HeLa細(xì)胞裂解液中成功... 

【文章來源】：北京科技大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２．１?（Ａ）基于試紙條的ＬＦＢ的一般方案

物標(biāo)志物亞硝酸根離子和尿酸的檢測，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了棉線是用于橫向流動(dòng)??裝置的合適材料［５３】。Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ等設(shè)計(jì)了三種基于棉線的測定法，“編織陣??列”，“分支設(shè)計(jì)”，“縫制陣列”，并通過檢測五種不同的分析物（圖２．２Ａ）??展示了基于棉線設(shè)備的檢測功能。棉線被編織在織機(jī)上以達(dá)到進(jìn)行平行的多??個(gè)測定的目的，或通過疏水性聚合物片縫合將測定結(jié)合到繃帶式的系統(tǒng)中，??這證明了棉線能夠并行多個(gè)測定［５４】。之后不久，Ｊｕｎｃｋｅｒ等將棉線免疫色譜??測定引入到盒式系統(tǒng)中，使其適合多重檢測（圖２．２Ｂ），得到Ｃ反應(yīng)蛋白??（ＣＲＰ）的檢測限為３７７?ｐＭ＾。使用ＣＲＰ、骨橋蛋白和瘦素蛋白的三種抗??體處理打結(jié)線，證實(shí)了多重檢測的可能性。之后，Ｍａｏ等在棉線上使用不同??納米粒子和納米復(fù)合材料為標(biāo)記物做了幾項(xiàng)工作

人鐵蛋白［５８］。他們還在棉線上引入碳納米管（ＣＮＴ）?［５９］和碳納米管／金納米??顆粒（ＣＮＴ／ＧＮＰ）納米復(fù)合材料＿作為標(biāo)記物，檢測限比ＧＮＰ或ＣＮＴ作??標(biāo)記物的裝置分別提高了?５００倍和２－３個(gè)數(shù)量級(jí)。有趣的是，圖２．２Ｃ顯示??了一種溫度依賴型的基于棉線的ＤＮＡ生物傳感器［６｜１，將含有捕獲探針的液??體蠟加到棉線檢測區(qū)域的兩端，液體在蒸發(fā)后捕獲探針濃縮到該區(qū)域，這樣??相當(dāng)于提高了靈敏度。??２．２．３垂直流形式和基于注射器的生物傳感器??雖然ＬＦＢ最初被定義為沿著單個(gè)軸以適應(yīng)試紙條樣式的生物傳感器，??但是也可以使用垂直流樣式來操作。這種稱為快速垂直流動(dòng)檢測（ＲＶＡ）的??替代ＬＦＢ的形式具有幾個(gè)獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，包括更快的分析時(shí)間和不存在“鉤??效應(yīng)”［６２］。因此，不少研宄者己經(jīng)注意探索ＲＶＡ而不是ＬＦＡ。Ｋｉｍ等開發(fā)??了一種用于Ｃ反應(yīng)蛋白（ｈｓＣＲＰ?）的快速、一步式、立式流動(dòng)免疫檢測（ＶＦＡ），??檢測在２分鐘內(nèi)可以完成，檢測范圍為０．０１至１０?ｎｇ?ｍｌ／ｌ［６３］。ＶＦＡ傳感器??通過簡單地堆疊側(cè)向流檢測中使用的材料來組裝。添加到樣品注入孔的血清??樣品將按順序達(dá)到并潤濕樣品墊、結(jié)合墊、不對(duì)稱膜和ＮＣ膜。與ＬＦＡ系統(tǒng)??相比

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]p53 protein expression and CA19.9 values in differential cytological diagnosis of pancreatic cancer complicated with chronic pancreatitis and chronic pancreatitis[J]. De-Qing Mu Shu-You Peng, Department of Surgery, the Second Affiliated Hospital, Medical College of Zhe Jiang University, Hang Zhou 310009, Zhe Jiang Province, China Guo-Feng Wang, Department of Pathology, the Second Affiliated Hospital, Medical College of Zhe Jiang University, Hang Zhou 310009, Zhe Jiang Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2003(08)



本文編號(hào)：3360690