透明質(zhì)酸水凝膠裝載Hep/PLL-VEGF納米粒子的制備及對內(nèi)皮細(xì)胞的影響
發(fā)布時間:2021-07-19 14:57
冠心病作為常見的心血管疾病之一,已經(jīng)嚴(yán)重威脅著人類身心健康。目前,心血管疾病治療的方法主要有冠脈搭橋術(shù)、藥物療法和介入治療。介入治療創(chuàng)傷小,是心血管疾病的主要治療方法。血管支架雖然解決了許多臨床上的問題,但仍存在著支架材料生物相容性不足和引起血管損傷,從而造成再狹窄和晚期血栓等問題。目前,在支架材料表面構(gòu)建多功能仿生涂層并實現(xiàn)快速內(nèi)皮化是解決再狹窄和晚期血栓最有效途徑之一。水凝膠的三維構(gòu)造與細(xì)胞外基質(zhì)類似,有利于微環(huán)境的構(gòu)建。此外,水凝膠可以設(shè)計成隨時間降解的生物材料,有利于控制血管內(nèi)膜形成過程。本研究將不同濃度的多巴胺與一定濃度透明質(zhì)酸制成HA-DAP水凝膠,通過一系列的材料學(xué)表征及細(xì)胞相容性評價,篩選出最優(yōu)的HA-DAP水凝膠;然后對比研究兩種方式裝載VEGF(直接加入水凝膠中HA-DAP3-V、通過Hep/PLL納米粒子載入HA-DAP3-NP10V),考察兩種方式下對VEGF釋放情況和內(nèi)皮細(xì)胞的影響。在酸性條件下,用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)和N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活化透明質(zhì)酸羧基,再與多巴胺上氨基反應(yīng)生成酰胺鍵,將多巴胺接枝到透明質(zhì)酸上,然后將...
【文章來源】:西南交通大學(xué)四川省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 生物醫(yī)用水凝膠
1.1.1 水凝膠的定義與分類
1.1.2 納米復(fù)合水凝膠的定義和研究現(xiàn)狀
1.2 透明質(zhì)酸水凝膠
1.2.1 透明質(zhì)酸水凝膠的制備
1.2.2 透明質(zhì)酸水凝膠的研究現(xiàn)狀
1.3 納米粒子在生物醫(yī)學(xué)材料中的應(yīng)用
1.3.1 納米粒子材料研究現(xiàn)狀
1.3.2 肝素基納米粒子的應(yīng)用
1.4 心血管材料表面誘導(dǎo)內(nèi)皮化研究
1.4.1 內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞
1.4.2 誘導(dǎo)內(nèi)皮化研究現(xiàn)狀
1.5 論文的目的與意義、主要研究內(nèi)容及技術(shù)路線
1.5.1 論文的目的與意義
1.5.2 論文主要研究內(nèi)容
1.5.3 技術(shù)路線
第2章 HA-DAP水凝膠的制備、表征與細(xì)胞相容性評價
2.1 引言
2.2 HA-DAP水凝膠成膠機(jī)理
2.2.1 透明質(zhì)酸分子量的選擇
2.2.2 成膠機(jī)理
2.3 不同濃度多巴胺HA-DAP水凝膠的制備
2.3.1 主要試劑
2.3.2 配置試劑
2.3.3 實驗儀器
2.3.4 HA-DAP水凝膠的制備
2.4 HA-DAP水凝膠的表征及結(jié)果
2.4.1 HA-DAP衍生物的表征
2.4.2 水凝膠的形貌
2.4.3 水凝膠溶脹率
2.5 不同多巴胺濃度制得的HA-DAP水凝膠的細(xì)胞相容性
2.5.1 內(nèi)皮細(xì)胞粘附行為評價(2小時)
2.5.2 內(nèi)皮細(xì)胞靜態(tài)培養(yǎng)1天、3天
2.6 討論
2.6.1 不同多巴胺反應(yīng)濃度對HA-DAP水凝膠性能的影響
2.6.2 不同多巴胺反應(yīng)濃度對HA-DAP水凝膠細(xì)胞相容性的影響
2.7 本章小結(jié)
第3章 HA-DAP水凝膠裝載肝素/多聚賴氨酸納米粒子的表征和細(xì)胞相容性評價
3.1 引言
3.2 HA-DAP水凝膠裝載肝素/多聚賴氨酸納米粒子的制備
3.2.1 實驗試劑
3.2.2 實驗試劑配置
3.2.3 實驗儀器
3.2.4 不同納米粒子含量HA-DAP-NP的制備
3.3 HA-DAP3-NP的表面形貌
3.3.1 不同納米粒子含量HA-DAP3-NP的表面形貌
3.3.2 HA-DAP3-NP10的斷面形貌
3.4 HA-DAP3-NP10細(xì)胞相容性評價
3.4.1 HA-DAP3-NP10內(nèi)皮細(xì)胞增殖行為評價
3.4.2 HA-DAP3-NP10內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力評價
3.5 本章小結(jié)
第4章 HA-DAP水凝膠中加入載VEGF的肝素/多聚賴氨酸納米粒子的研究
4.1 HA-DAP水凝膠中加入載VEGF的肝素/多聚賴氨酸納米粒子
4.1.1 引言
4.1.2 實驗試劑
4.1.3 實驗儀器
4.1.4 凝膠構(gòu)建
4.2 HA-DAP-NPV生長因子釋放曲線
4.2.1 生長因子釋放實驗步驟
4.2.2 生長因子釋放結(jié)果
4.3 細(xì)胞相容性評價
4.3.1 內(nèi)皮細(xì)胞增殖行為評價
4.3.2 促內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力評價
4.3.3 內(nèi)皮細(xì)胞在HA-DAP3-NP10V內(nèi)部的形態(tài)
4.4 討論
4.4.1 HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V釋放VEGF的對比研究
4.4.2 HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V細(xì)胞相容性對比研究
4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同濃度透明質(zhì)酸水凝膠的細(xì)胞相容性[J]. 李凱,呂少一,周建業(yè),商青青,邵自強(qiáng),胡盛壽. 中國組織工程研究. 2013(16)
[2]透明質(zhì)酸水凝膠體外促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)分化的研究[J]. 羅方,周東,何俐,吳錦暉,丁群芳,張俊,李穎,周沐科. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2012(03)
[3]不同相對分子量透明質(zhì)酸功能及應(yīng)用的研究[J]. 黃岳山,潘藝茗,薛靜. 透析與人工器官. 2010(04)
[4]量子點在腫瘤研究中的應(yīng)用[J]. 陳良冬,李雁,袁宏銀,龐代文. 癌癥. 2006(05)
[5]低分子量和寡聚透明質(zhì)酸研究進(jìn)展[J]. 崔向珍,王鳳山,劉愛華,郭學(xué)平. 食品與藥品. 2006(03)
[6]血管內(nèi)支架和支架內(nèi)皮化[J]. 趙宏偉,王貴學(xué),戴傳云. 生物技術(shù)通訊. 2005(06)
[7]包載治療基因的聚合物納米粒子:I.納米粒子制備及動物模型基因治療實驗研究[J]. 楊菁,宋存先,孫洪范,武莉,唐麗娜,冷希崗,王彭延,徐意瑤,李擁軍,管珩. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2005(03)
[8]納米生物技術(shù)基因治療載體研究進(jìn)展[J]. 張小偉,田聆,魏于全. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2005(03)
[9]磁性藥物靶向治療的進(jìn)展[J]. 徐華,宋濤. 國外醫(yī)學(xué).生物醫(yī)學(xué)工程分冊. 2004(01)
[10]用于癌癥治療的納米磁性載體材料研究進(jìn)展[J]. 張曉金,原續(xù)波,胡云霞,常津. 北京生物醫(yī)學(xué)工程. 2003(04)
博士論文
[1]Ti表面固定層粘連蛋白/肝素/SDF-1α以構(gòu)建抗凝及誘導(dǎo)內(nèi)皮再生微環(huán)境的研究[D]. 劉濤.西南交通大學(xué) 2014
碩士論文
[1]透明質(zhì)酸的改性及功能化[D]. 王娟勤.江南大學(xué) 2013
[2][D].
本文編號:3290904
【文章來源】:西南交通大學(xué)四川省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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Abstract
第1章 緒論
1.1 生物醫(yī)用水凝膠
1.1.1 水凝膠的定義與分類
1.1.2 納米復(fù)合水凝膠的定義和研究現(xiàn)狀
1.2 透明質(zhì)酸水凝膠
1.2.1 透明質(zhì)酸水凝膠的制備
1.2.2 透明質(zhì)酸水凝膠的研究現(xiàn)狀
1.3 納米粒子在生物醫(yī)學(xué)材料中的應(yīng)用
1.3.1 納米粒子材料研究現(xiàn)狀
1.3.2 肝素基納米粒子的應(yīng)用
1.4 心血管材料表面誘導(dǎo)內(nèi)皮化研究
1.4.1 內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞
1.4.2 誘導(dǎo)內(nèi)皮化研究現(xiàn)狀
1.5 論文的目的與意義、主要研究內(nèi)容及技術(shù)路線
1.5.1 論文的目的與意義
1.5.2 論文主要研究內(nèi)容
1.5.3 技術(shù)路線
第2章 HA-DAP水凝膠的制備、表征與細(xì)胞相容性評價
2.1 引言
2.2 HA-DAP水凝膠成膠機(jī)理
2.2.1 透明質(zhì)酸分子量的選擇
2.2.2 成膠機(jī)理
2.3 不同濃度多巴胺HA-DAP水凝膠的制備
2.3.1 主要試劑
2.3.2 配置試劑
2.3.3 實驗儀器
2.3.4 HA-DAP水凝膠的制備
2.4 HA-DAP水凝膠的表征及結(jié)果
2.4.1 HA-DAP衍生物的表征
2.4.2 水凝膠的形貌
2.4.3 水凝膠溶脹率
2.5 不同多巴胺濃度制得的HA-DAP水凝膠的細(xì)胞相容性
2.5.1 內(nèi)皮細(xì)胞粘附行為評價(2小時)
2.5.2 內(nèi)皮細(xì)胞靜態(tài)培養(yǎng)1天、3天
2.6 討論
2.6.1 不同多巴胺反應(yīng)濃度對HA-DAP水凝膠性能的影響
2.6.2 不同多巴胺反應(yīng)濃度對HA-DAP水凝膠細(xì)胞相容性的影響
2.7 本章小結(jié)
第3章 HA-DAP水凝膠裝載肝素/多聚賴氨酸納米粒子的表征和細(xì)胞相容性評價
3.1 引言
3.2 HA-DAP水凝膠裝載肝素/多聚賴氨酸納米粒子的制備
3.2.1 實驗試劑
3.2.2 實驗試劑配置
3.2.3 實驗儀器
3.2.4 不同納米粒子含量HA-DAP-NP的制備
3.3 HA-DAP3-NP的表面形貌
3.3.1 不同納米粒子含量HA-DAP3-NP的表面形貌
3.3.2 HA-DAP3-NP10的斷面形貌
3.4 HA-DAP3-NP10細(xì)胞相容性評價
3.4.1 HA-DAP3-NP10內(nèi)皮細(xì)胞增殖行為評價
3.4.2 HA-DAP3-NP10內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力評價
3.5 本章小結(jié)
第4章 HA-DAP水凝膠中加入載VEGF的肝素/多聚賴氨酸納米粒子的研究
4.1 HA-DAP水凝膠中加入載VEGF的肝素/多聚賴氨酸納米粒子
4.1.1 引言
4.1.2 實驗試劑
4.1.3 實驗儀器
4.1.4 凝膠構(gòu)建
4.2 HA-DAP-NPV生長因子釋放曲線
4.2.1 生長因子釋放實驗步驟
4.2.2 生長因子釋放結(jié)果
4.3 細(xì)胞相容性評價
4.3.1 內(nèi)皮細(xì)胞增殖行為評價
4.3.2 促內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力評價
4.3.3 內(nèi)皮細(xì)胞在HA-DAP3-NP10V內(nèi)部的形態(tài)
4.4 討論
4.4.1 HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V釋放VEGF的對比研究
4.4.2 HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V細(xì)胞相容性對比研究
4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同濃度透明質(zhì)酸水凝膠的細(xì)胞相容性[J]. 李凱,呂少一,周建業(yè),商青青,邵自強(qiáng),胡盛壽. 中國組織工程研究. 2013(16)
[2]透明質(zhì)酸水凝膠體外促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)分化的研究[J]. 羅方,周東,何俐,吳錦暉,丁群芳,張俊,李穎,周沐科. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2012(03)
[3]不同相對分子量透明質(zhì)酸功能及應(yīng)用的研究[J]. 黃岳山,潘藝茗,薛靜. 透析與人工器官. 2010(04)
[4]量子點在腫瘤研究中的應(yīng)用[J]. 陳良冬,李雁,袁宏銀,龐代文. 癌癥. 2006(05)
[5]低分子量和寡聚透明質(zhì)酸研究進(jìn)展[J]. 崔向珍,王鳳山,劉愛華,郭學(xué)平. 食品與藥品. 2006(03)
[6]血管內(nèi)支架和支架內(nèi)皮化[J]. 趙宏偉,王貴學(xué),戴傳云. 生物技術(shù)通訊. 2005(06)
[7]包載治療基因的聚合物納米粒子:I.納米粒子制備及動物模型基因治療實驗研究[J]. 楊菁,宋存先,孫洪范,武莉,唐麗娜,冷希崗,王彭延,徐意瑤,李擁軍,管珩. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2005(03)
[8]納米生物技術(shù)基因治療載體研究進(jìn)展[J]. 張小偉,田聆,魏于全. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2005(03)
[9]磁性藥物靶向治療的進(jìn)展[J]. 徐華,宋濤. 國外醫(yī)學(xué).生物醫(yī)學(xué)工程分冊. 2004(01)
[10]用于癌癥治療的納米磁性載體材料研究進(jìn)展[J]. 張曉金,原續(xù)波,胡云霞,常津. 北京生物醫(yī)學(xué)工程. 2003(04)
博士論文
[1]Ti表面固定層粘連蛋白/肝素/SDF-1α以構(gòu)建抗凝及誘導(dǎo)內(nèi)皮再生微環(huán)境的研究[D]. 劉濤.西南交通大學(xué) 2014
碩士論文
[1]透明質(zhì)酸的改性及功能化[D]. 王娟勤.江南大學(xué) 2013
[2][D].
本文編號:3290904
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