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鋅摻雜四氧化三鐵納米顆粒與胃蛋白酶相互作用的研究

發(fā)布時間:2021-06-19 20:57
  近幾十年來,納米材料技術(shù)的發(fā)展十分迅速,納米材料的應(yīng)用范圍越來越廣泛,涉及工業(yè)、商業(yè)和生物醫(yī)學(xué)等多個領(lǐng)域。納米材料的巨大應(yīng)用前景以及工業(yè)中的大量生產(chǎn)使得人們在日常生活中接觸到它們的概率大大提高。在這種情況下,納米材料的生物效應(yīng)成為了關(guān)注焦點,引發(fā)了科研人員極大的興趣。眾所周知,納米顆粒暴露于生物體后會立即與生物體液中的蛋白質(zhì)分子發(fā)生作用,其表面會形成一層蛋白冠。從納米顆粒角度來說,蛋白冠的形成會改變納米顆粒在生物體中細胞攝取和從生物體的清除等代謝途徑,影響納米顆粒在生物體中的分布和其功能的發(fā)揮。從蛋白質(zhì)分子角度來說,蛋白冠的形成會改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、活性及其功能,從而影響納米材料的生物效應(yīng)。因此,研究納米顆粒和蛋白質(zhì)的相互作用,對納米材料在生物技術(shù)領(lǐng)域和生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用具有重要意義。磁性納米顆粒因為具有較高的磁化率和很好的生物相容性被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,目前超順磁四氧化三鐵納米顆粒是唯一被美國FDA批準用于臨床的納米磁共振成像造影劑。鋅摻雜四氧化三鐵納米顆粒(ZnxFe3-xO4 NPs)具有比四氧化三鐵納米顆粒(F... 

【文章來源】:中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

鋅摻雜四氧化三鐵納米顆粒與胃蛋白酶相互作用的研究


圖2.1通過TEM和XRD對Zna4FeZn〇.4Fe2604?NPs?的?TEM?圖片;(B)?Zn〇圖譜:標準?6304(冗?08?75-0033)(3)和

粒徑分布,蛋白質(zhì),蛋白,條帶


20?30?40?50?60?70?80??2Theta??圖2.1通過TEM和XRD對Zna4Fe2.604?NPs進行粒徑和物相的表征。(A)??Zn〇.4Fe2604?NPs?的?TEM?圖片;(B)?Zn〇4:Fe2.604?NPs?的粒徑分布圖.;(C)?XRD??圖譜:標準?6304(冗?08?75-0033)(3)和211〇.4?62.604]^3(13)??2.3.2體內(nèi)蛋白質(zhì)冠分析??使用SDS-PAGE分離吸附在Zn〇.4Fe2.604?NPs表面上的蛋白質(zhì)。如圖2.2(A)??所示,凝膠中出現(xiàn)了多個條帶,意味著多種蛋白質(zhì)被結(jié)合到顆粒上。我們切下了??三條主要條帶(1、2和3),通過LC-MS方法來探宄蛋白冠的組成。在將結(jié)果??與NCBI數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)對比后,表2.3列出了各條帶中鑒別出來的蛋白質(zhì)種類。??在這3條條帶中共鑒別出32種不同的蛋白質(zhì),其中有部分來自胃組織,如胃蛋??白酶原、三葉因子和內(nèi)因子等;也有部分由胰腺分泌,如羧肽酶、胰腺淀粉酶和??彈性蛋白酶等。此外,唾液淀粉酶以及少量細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)也出現(xiàn)在蛋白冠中。??吸附的蛋白質(zhì)的分子量處于10到78?KD之間。我們將這些蛋白質(zhì)按照等電點(pi)??和MW進行了分類,如圖2.2(B)所示。蛋白冠中的蛋白質(zhì)分子量多處于20-60?KD??之間(?75%)

胃蛋白酶,吸附值,吸附動力學(xué),吸附容量


?2.3.3.1吸附動力學(xué)??圖2.3是Zna+Fe2.604?NPs吸附蛋白質(zhì)隨時間的變化規(guī)律。從圖中可以看出,??在pH?1.5和pH?3.0值條件下,ZnG.4Fe2.604?NPs對胃蛋白酶的吸附是一個快速的??過程。具有類似粒徑的磁性納米顆粒在對BSA吸附的過程中出現(xiàn)了同樣的結(jié)果??[71,72^這種快速吸附可能是因為Zna4Fe2.604NPS的小粒徑和較大的比表面面積。??需要注意的是,在實驗的過程中,Zno.4Fe2.604NPs和胃蛋白酶在混合5min后測??得的吸附值與60?min后的吸附值幾乎完全一樣,說明這種納米顆粒對蛋白質(zhì)的??吸附非常迅速。這種對蛋白質(zhì)的快速吸附對于Zna4Fe2.6〇4?NPs在蛋白質(zhì)的分離??方面的應(yīng)用具有潛在優(yōu)勢。??250-??■??…一…?級_..…_魯???????????200-??35150-?/??I1??衽100-?I??I?a?■——■?■?_?■??50-?/?/??\?pH1.5???一?PH?3??0?10?20?30?40?50?60??Time(min)??圖2.3不同pH下Zna4Fe2.604?NPs對胃蛋白酶上的吸附隨時間的變化??2.3.3.2pH對吸附的影響??從2如.正62.6〇4仰5對胃蛋白酶的吸附動力學(xué)(?111.5和3.0下),我們可??以推斷在其它酸度下吸附平衡也可以很快達到。在這種前提下,我們探宄了作用??介質(zhì)的pH對吸附容量的影響,結(jié)果如圖2.4所示。顯然,pH值對胃蛋白酶在??Zna4Fe2.eA?NPs上的吸附容量影響很大。在pH?1-2.8范圍內(nèi)

【參考文獻】:
碩士論文
[1]茶葉生物堿對胃蛋白酶部分理化性質(zhì)的影響[D]. 謝光.四川大學(xué) 2006



本文編號:3238528

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