利用3-氨丙基三乙氧基硅烷（ATPES）和N,N-二甲基十八烷基（3-三甲氧基硅丙基）氯化銨（DMOAP）,對玻片基底表面進行烷基化修飾,再通過戊二醛（GA）作為橋聯(lián),將經(jīng)過銀納米粒子（AgNPs）修飾的天蠶素B抗體（anti-CB）固定在玻片基底上,構建新型液晶生物傳感器。當存在天蠶素B（CB）時,其可與anti-CB發(fā)生特異性免疫反應,從而固定在玻片基底表面。利用AgNPs具有較大的比表面積和良好的生物相容性,可以使得AgNPs周圍的液晶分子垂直排列被極大地擾亂,從而起到局部光學信號放大的作用,達到檢測更低濃度CB的目的。通過對CB濃度與其對應的圖像灰度值之間的線性擬合發(fā)現(xiàn),CB濃度在10～100 ng/mL之間時,CB濃度與其對應圖像灰度值之間存在線性關系。實驗結果表明,采用AgNPs對CB進行信號放大,其檢出限可以低至1.02 ng/mL。 

【文章來源】：分析科學學報. 2020,36(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

基于AgNPs信號放大的液晶生物傳感器檢測原理圖

基底的修飾將直接影響到液晶分子的排列方式,從而影響最終的光學成像。因此,需對APTES/DMOAP/GA的比例進行優(yōu)化。DMOAP作為n>12的硅烷長鏈,可以誘導液晶分子進行垂直排列。APTES+GA作為功能基團,用來將生物分子固定到基底表面。如圖2所示,當APTES/DMOAP的比例(體積分數(shù))較大時(圖2d、2e),對液晶分子擾亂程度非常大,不利于下一步的觀測。而當APTES/DMOAP的比例較小時(圖2a、2b),雖然圖像背景為黑色,但不利于下一步GA的固定。因此,選取5∶1為APTES/DMOAP的最佳比例。GA的一個醛基與APTES的氨基反應,而另一個醛基與anti-CB上的氨基反應,從而將Anti-CB固定到基底表面。當基底表面所固定GA越多,anti-CB被固定到基底表面的概率也將增大。因此,需對GA的含量進行優(yōu)化。如圖3所示,當GA含量過高(圖3c～3e),液晶分子被極大地擾亂,影響下一步的檢測,而當GA含量為2%時,此時光學背景呈現(xiàn)黑色(圖3b)。因此,選擇GA最佳含量為2%。

GA的一個醛基與APTES的氨基反應,而另一個醛基與anti-CB上的氨基反應,從而將Anti-CB固定到基底表面。當基底表面所固定GA越多,anti-CB被固定到基底表面的概率也將增大。因此,需對GA的含量進行優(yōu)化。如圖3所示,當GA含量過高(圖3c～3e),液晶分子被極大地擾亂,影響下一步的檢測,而當GA含量為2%時,此時光學背景呈現(xiàn)黑色(圖3b)。因此,選擇GA最佳含量為2%。2.3 基底接觸角表征

【參考文獻】：
期刊論文
[1]非標記液晶生物傳感器檢測人類β防御素-2[J]. 蘇秀霞,霍文靜,欒崇林,張姣,徐佳.  分析科學學報. 2019(01)
[2]DNA為模板的納米銀簇探針檢測腫瘤細胞高表達microRNA-21[J]. 侯肖肖,孫麗范,樊明玥,孫艷華.  天津醫(yī)科大學學報. 2018(03)
[3]液晶傳感競爭免疫法檢測天蠶素B[J]. 蘇秀霞,張姣,欒崇林,霍文靜,徐佳.  陜西科技大學學報. 2018(02)
[4]抗菌肽作用機制及應用研究進展[J]. 劉世財,范琳琳,鄭珩,張秋怡.  中國生化藥物雜志. 2016(04)
[5]納米銀比色法檢測多巴胺[J]. 馮娟娟,趙祎曼,王海燕.  高等學�；瘜W學報. 2015(07)
[6]化學法制備納米銀及其應用[J]. 佘博西,耿煥然,湯皎寧,萬學娟.  現(xiàn)代化工. 2015(01)
[7]小粒徑納米銀可視化檢測鋇離子[J]. 唐建,馬德恩,龍云飛.  光譜實驗室. 2013(01)
[8]光化學還原法制備納米銀溶膠[J]. 張偉,談發(fā)堂,喬學亮,陳建國.  材料導報. 2012(12)
[9]國內外超級細菌的研究進展及防控措施[J]. 鄭璇,鄭育洪.  中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012(01)
[10]化學還原法制備納米銀顆粒及納米銀導電漿料的性能[J]. 王小葉,劉建國,曹宇,蔡志祥,李祥友,曾曉雁.  貴金屬. 2011(02)

碩士論文
[1]納米銀拉曼增強基底的制備及其在蛋白質檢測中的應用[D]. 甘攀峰.南京理工大學 2017
[2]柿單寧/無機納米抗菌復雜體系的制備與研究[D]. 程順林.武漢理工大學 2012
[3]生物大分子的光譜法研究[D]. 曹迎華.山東大學 2011



本文編號：3005255