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β-胡蘿卜素—薏苡仁油復(fù)合脂質(zhì)體的制備及功能特性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-11-05 14:49
   活性成分包埋于脂質(zhì)體內(nèi)可提高其穩(wěn)定性,降低光、氧等對(duì)活性成分的破壞。同時(shí),脂質(zhì)體還具有較好的緩釋作用、靶向性、細(xì)胞親和性、無(wú)毒性與組織相容性等優(yōu)點(diǎn)。包埋單一活性成分的脂質(zhì)體已有大量研究,但多種活性成分復(fù)合的脂質(zhì)體還鮮有報(bào)道。多種活性成分能夠協(xié)同作用以提高生理功能,將兩種或多種活性成分同時(shí)包埋于脂質(zhì)體中形成復(fù)合脂質(zhì)體有重要意義。β-胡蘿卜素(βC)具有抗衰老、抗癌等生理功能,薏苡仁油(CSO)則具備消炎、抗癌等作用,將類胡蘿卜素與植物油制備成復(fù)合物能增強(qiáng)兩者生理功能。考慮到β-胡蘿卜素和CSO兩者都含有不飽和鍵,在光、熱、氧條件下易被分解,本實(shí)驗(yàn)采用乙醇注入法制備β-胡蘿卜素-薏苡仁油復(fù)合脂質(zhì)體(L-βC-CSO),并對(duì)其理化性質(zhì)進(jìn)行分析,研究結(jié)果如下:(1)以L-βC-CSO的粒徑分布及β-胡蘿卜素的包封率為指標(biāo),通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)確定對(duì)L-βC-CSO影響最大的三個(gè)因素,在此基礎(chǔ)上采用Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化L-βC-CSO的制備工藝。單因素實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)L-βC-CSO影響較大的三個(gè)因素為制備溫度、卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比和PBS緩沖液用量。BoxBehnken響應(yīng)面結(jié)果顯示制備L-βC-CSO的最佳工藝為:攪拌溫度43℃,卵磷脂與膽固醇質(zhì)量比7:1,PBS緩沖液用量25 mL/10 m L乙醇,此條件下的β-胡蘿卜素包封率理論值為84.39%,與實(shí)際值81.22%基本一致,平均粒徑為187.9±7.5 nm,多分散性指數(shù)(PDI)為0.104±0.09,平均Zeta電位為-29.33±4.77mv。(2)制備β-胡蘿卜素與CSO質(zhì)量比分別為1:1、1:5和1:10的復(fù)合脂質(zhì)體L-βC-CSO(1:1,1:5,1:10),以L-βC、L-CSO和un-L為對(duì)照,考察β-胡蘿卜素與CSO質(zhì)量比對(duì)L-βC-CSO(1:1,1:5,1:10)粒徑分布、包封率、表觀形態(tài)、抗氧化性、貯藏穩(wěn)定性、體外模擬釋放及抑制人體結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用的影響。結(jié)果顯示CSO的加入能夠占據(jù)脂質(zhì)體中的疏水空間,導(dǎo)致L-βC-CSO的粒徑分布及β-胡蘿卜素包封率較L-βC都有一定差異。L-βC-CSO(1:1)與L-βC均呈現(xiàn)單層囊泡與指紋結(jié)構(gòu),但是L-βC-CSO的分散更均一。所有樣品對(duì)DPPH自由基都有清除作用,L-CSO、L-βC及L-βC-CSO(1:1,1:5,1:10)清除率分別為49.2±3.32%、41.5±7.1%、51.93±6.63%、66.74±2.23%和73.48±3.66%,L-βCCSO的DPPH自由基清除率隨著CSO含量的升高而增強(qiáng),說(shuō)明L-βC-CSO的抗氧化性更好。貯藏實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,低溫貯藏能夠有效減緩脂質(zhì)體中油脂的氧化,但在25℃下高含量的CSO可能會(huì)加速L-βC-CSO中β-胡蘿卜素的降解。在人工模擬胃液(SGF)中,L-βC-CSO(1:10)中β-胡蘿卜素的釋放量最低,而L-βC最高,表明CSO的加入能夠緩解胃液對(duì)β-胡蘿卜素的破壞。而人工模擬腸液(SIF)中,L-βC-CSO中β-胡蘿卜素的釋放量都比L-βC高,且這種趨勢(shì)與CSO含量正相關(guān),表明CSO的加入能夠促進(jìn)β-胡蘿卜素在SIF中釋放。在SGF中,各種脂質(zhì)體中的釋放特性都符合一級(jí)模型,而在SIF中,則都與Korsmeyr-peppas模型擬合度最高。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,含β-胡蘿卜素或CSO的樣品對(duì)Caco-2癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用均呈現(xiàn)藥物濃度和培養(yǎng)時(shí)間相關(guān)性,在所有的藥物濃度和培養(yǎng)時(shí)間下,L-βC-CSO對(duì)Caco-2的抑制效果都比單一的L-CSO、L-βC顯著。即L-βC-CSO較單一的L-βC有明顯的優(yōu)勢(shì)。(3)為了提高L-βC-CSO的穩(wěn)定性及緩釋效果,實(shí)驗(yàn)還利用果膠與殼聚糖間的靜電相互作用對(duì)L-βC-CSO(1:1)進(jìn)行雙層修飾,探討雙層修飾過(guò)程對(duì)脂質(zhì)體理化性質(zhì)的影響,并評(píng)價(jià)其貯藏穩(wěn)定性及控釋特性。結(jié)果顯示L、C-L、P-C-L的粒徑依次增大,但都呈現(xiàn)規(guī)則的球形結(jié)構(gòu),可能是雙層修飾后脂質(zhì)體表面的保護(hù)層使其粒徑有所增大。紅外光譜(FTIR)表明殼聚糖上的氨基能夠與脂質(zhì)體磷脂雙分子層上的極性基團(tuán)形成氫鍵,形成C-L;而果膠電離的羧基與殼聚糖上的氨基也能相互作用形成雙層修飾的P-C-L。差式掃描量熱儀分析(DSC)表明L、C-L、P-C-L的相變溫度依次升高,表明雙層修飾后脂質(zhì)體熱穩(wěn)定性提高。熱重分析(TGA)也表明L、C-L、P-C-L的熱穩(wěn)定性依次增強(qiáng)。貯藏穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,雙層修飾能夠有效增強(qiáng)脂質(zhì)體的貯藏穩(wěn)定性,低溫貯藏有利于提高體系穩(wěn)定性。體外模擬釋放結(jié)果顯示在SGF中和SIF中,L中β-胡蘿卜素的釋放速率始終最高,而P-C-L最低,說(shuō)明果膠、殼聚糖修飾后形成的保護(hù)層對(duì)于脂質(zhì)體芯材有一定的緩釋作用。在SGF中,L、C-L及P-C-L三種脂質(zhì)體釋放特性都符合一級(jí)模型,而在SIF中,L的釋放特性符合Korsmeyr-peppas模型,而C-L及P-C-L的釋放特性符合一級(jí)模型。
【學(xué)位單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:TB33
【部分圖文】:

脂質(zhì)體,結(jié)構(gòu)示意圖,緒論


第 1 章 緒論第 1 章 緒論 脂質(zhì)體概述.1 脂質(zhì)體的定義、分類及特性1965年,英國(guó)科學(xué)家 Bangham 博士發(fā)現(xiàn)磷脂分散在水中可以形成閉合的雙層囊泡結(jié)構(gòu)[1,2],將其定義為脂質(zhì)體。脂質(zhì)體的中心及外層親水,而雙分子部疏水,其結(jié)構(gòu)與生物膜非常相似,如圖 1.1 所示。此外,由于膽固醇可節(jié)磷脂雙分子層的剛性及流動(dòng)性從而調(diào)節(jié)脂質(zhì)體的穩(wěn)定性及芯材的包封率,與磷脂共同作用形成脂質(zhì)體[3]。

多室脂質(zhì)體,單室脂質(zhì)體


第 1 章 緒論形成的粉末或固體顆粒;磁性脂質(zhì)體:在傳統(tǒng)的脂質(zhì)體中加入磁性物質(zhì),在體外施加磁場(chǎng)作用以提高脂質(zhì)體的靶向性,通常在醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛;陽(yáng)離子脂質(zhì)體:通常由帶陽(yáng)離子的兩親性化合物如膽固醇衍生物和中性脂質(zhì)如磷脂酰膽堿組成,能夠轉(zhuǎn)運(yùn) DNA 等生物分子;長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體:在制備過(guò)程中通過(guò)加入多糖等物質(zhì)使脂質(zhì)體表面的親水基團(tuán)增多,從而增加其穩(wěn)定性。脂質(zhì)體的基本特性有:既可包埋親水性物質(zhì)又可包埋疏水性物質(zhì),良好的水分散性和生物相容性,無(wú)毒性,靶向性等。

β-胡蘿卜素,結(jié)構(gòu)示意圖,脂質(zhì)體


靶向、緩釋等作用[17]。在食品行業(yè)中,脂質(zhì)體常用于食品功能性成分及營(yíng)養(yǎng)因子的包埋及運(yùn)載,在制備過(guò)程中通過(guò)控制工藝條件可以準(zhǔn)確掌握脂質(zhì)體的滲透性、親和性及表面活性,結(jié)合芯材的功能性能夠制備出不同性能的脂質(zhì)體。至今,脂質(zhì)體在食品中的應(yīng)用已經(jīng)十分廣泛,主要用于脂類[18]、抗氧化劑[19]、維生素和礦物質(zhì)[20]、蛋白質(zhì)和酶等物質(zhì)的包埋與運(yùn)載[21];谀壳爸|(zhì)體在食品領(lǐng)域的研究成果及實(shí)驗(yàn)儀器等的快速發(fā)展,未來(lái)脂質(zhì)體在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用將更加廣泛。1.2 β-胡蘿卜素與薏苡仁油簡(jiǎn)介1.2.1 β-胡蘿卜素概況β-胡蘿卜素是一種脂溶性化合物,它是類胡蘿卜素之一,也是自然界中最普遍也最穩(wěn)定的天然色素。其分子式是 C40H56,相對(duì)分子量為 536.88,主鏈上有八個(gè)異戊二烯結(jié)構(gòu),主鏈末端各有一個(gè)β-紫羅酮環(huán),這些共軛雙鍵結(jié)構(gòu)使得β-胡蘿卜素的紫外-可見(jiàn)光譜的最大吸收峰在 450 nm[22],其結(jié)構(gòu)有全反式、9-順式、13-順式及 15-順式四種形式[23],全反式結(jié)構(gòu)如圖 1.3所示。
【參考文獻(xiàn)】

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