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碳基納米材料在免疫層析分析中應(yīng)用的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-22 15:38
【摘要】:在本文中,我們構(gòu)建了以棉線為載體的免疫層析分析方法,以不同類型的新型碳納米材料作探針,實(shí)現(xiàn)了對(duì)肺癌標(biāo)志物的快速、高效、高靈敏的可視化檢測(cè)。具體工作如下:(1)基于碳納米管/納米金復(fù)合材料探針的棉線免疫層析分析技術(shù)的研究在本文中,我們?cè)O(shè)計(jì)了一種基于碳納米管/納米金復(fù)合材料(CNT/GNPs)探針的棉線免疫層析分析裝置,實(shí)現(xiàn)了對(duì)鱗狀細(xì)胞癌抗原(Squamous Cell Carcinoma Antigen,SCCA)的高靈敏、快速、可視化檢測(cè)。該裝置所采用的CNT/GNPs探針結(jié)合了碳納米管(CNT)和納米金(GNPs)兩者的優(yōu)點(diǎn),表現(xiàn)出優(yōu)良的生物相容性和更高的穩(wěn)定性。與已報(bào)道的兩篇采用碳納米管作為探針的免疫層析分析方法相比,該裝置的檢測(cè)靈敏度分別提高了10倍和2000多倍,明顯提高了免疫層析分析技術(shù)的靈敏度。(2)鱗狀細(xì)胞癌抗原和癌胚抗原在免疫層析分析裝置上的同時(shí)檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)(1)的基礎(chǔ)上,我們?cè)O(shè)計(jì)了一種基于CNT/GNPs復(fù)合材料探針的棉線免疫層析裝置,實(shí)現(xiàn)了兩種肺癌標(biāo)志物—鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCCA)和癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)的快速可視化同時(shí)檢測(cè)。在最佳條件下,響應(yīng)信號(hào)與兩種肺癌標(biāo)志物的濃度在50-5000 ng/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,檢測(cè)限分別達(dá)到了12.0 ng/mL和15.6 ng/mL(S/N≥3)。(3)基于碳納米球探針的棉線免疫層析分析技術(shù)的研究在本文中,我們?cè)O(shè)計(jì)了一種基于碳納米球(CNSs)的棉線免疫層析分析裝置,實(shí)現(xiàn)了肺癌標(biāo)志物(SCCA)的快速可視化檢測(cè),CNSs探針的使用,使得本裝置的靈敏度明顯提高,檢測(cè)限達(dá)到了0.65 ng/mL(S/N≥3)。
【學(xué)位授予單位】:西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:O657.3;TB383.1
【圖文】:

過程圖,碳納米管,表面修飾,蛋白質(zhì)


進(jìn)而將蛋白質(zhì)分子在修飾在碳納米管的表面。具體過程如圖1-1 所示。圖 1-1 碳納米管表面修飾蛋白質(zhì)過程Wohlstadter 等人[26]用同樣的方法,用 EDC/NHS 活化處理之后的碳納米管,再將鏈霉親和素固定在碳納米管的表面,然后加入標(biāo)記了生物素的抗體,通過鏈霉親和素和生物素的特異性結(jié)合間接地把抗體固定在碳納米管的表面,這樣的標(biāo)記方法的優(yōu)點(diǎn)就是避免了抗體捕獲抗原的能力受到影響。二抗標(biāo)記在納米金上,當(dāng)有抗原存在的時(shí)候,碳納米管表面就會(huì)形成一個(gè)三明治夾心復(fù)合物,如果沒有抗原存在,則碳納米管表面就檢測(cè)不到二抗標(biāo)記的納米金。

過程圖,表面修飾,碳納米管,抗體


圖 1-2 碳納米管表面修飾抗體過程在 Song 等人[27]的工作中,通過種子生長(zhǎng)法制得金納米棒(GNR),用 3-巰基丙酸(MPA)進(jìn)行表面預(yù)處理,由于 MPA 一端帶巰基,一端帶有羧基,巰基與金可以形成穩(wěn)定的 Au-S 鍵,這樣 GNR 表面的羧基數(shù)量就會(huì)增多,再通過 EDC 和 NHS 處理,納米金棒上的羧基就會(huì)與抗體上的氨基發(fā)生縮合反應(yīng)得到納米金棒信號(hào)探針,該探針結(jié)合棉線免疫傳感器和電化學(xué)分析,實(shí)現(xiàn)了對(duì)人鐵蛋白的快速檢測(cè)。

免疫層析,巰基,羧基,抗體


第一章 緒論圖 1-2 碳納米管表面修飾抗體過程[27]的工作中,通過種子生長(zhǎng)法制得金納米棒(GNR),面預(yù)處理,由于 MPA 一端帶巰基,一端帶有羧基,巰基這樣 GNR 表面的羧基數(shù)量就會(huì)增多,再通過 EDC 和 N會(huì)與抗體上的氨基發(fā)生縮合反應(yīng)得到納米金棒信號(hào)探針,電化學(xué)分析,實(shí)現(xiàn)了對(duì)人鐵蛋白的快速檢測(cè)。

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本文編號(hào):2766016

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