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基于金磁復(fù)合微粒和熒光納米粒子的肌紅蛋白檢測方法

發(fā)布時間:2017-03-26 17:13

  本文關(guān)鍵詞:基于金磁復(fù)合微粒和熒光納米粒子的肌紅蛋白檢測方法,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:免疫檢測技術(shù)是基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測技術(shù),已普遍用于臨床檢測,食品安全檢測,環(huán)境監(jiān)測等多個領(lǐng)域。本文以肌紅蛋白為研究對象,將金磁復(fù)合微粒和熒光納米硅小球引入到免疫檢測中,在研究制備金磁復(fù)合微粒的基礎(chǔ)上,建立了基于金磁復(fù)合微粒和熒光納米小球的免疫分析技術(shù),進(jìn)一步拓展了納米粒子在免疫檢測中的應(yīng)用。主要研究結(jié)果如下:1.通過層層組裝的方法制備金磁復(fù)合微粒,以溶劑熱法制備Fe3O4納米粒子(MNPs),對MNPs進(jìn)行硅包埋和羧基功能化。在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行表面BSA修飾和金包埋,制得金磁復(fù)合微粒。透射電鏡(TEM)結(jié)果表明,金磁復(fù)合微粒是由一層20nm左右的金納米粒子吸附在Fe3O4納米粒子表面所形成的,其粒徑均一,分散性良好;2.制備三種熒光納米粒子,熒光硅納米粒子,熒光聚丙烯酰胺聚烯酸共聚物納米粒子,熒光PAAAM包埋的納米硅小球。先采用St?ber法制備硅納米小球,硅納米小球偶聯(lián)Rhodamine red X(Rh X)后羧基功能化制備基功能化的熒光硅納米小球(SNP@Rh X);用反相微乳法制備出PAAAM納米小球后偶聯(lián)Rh X后制得熒光聚丙烯酰胺聚烯酸共聚物納米粒子(PAAAM@Rh X);硅納米小球用3-(異丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MPS)修飾后,再在表面聚合一層PAAAM后偶聯(lián)Rh X制得聚丙烯酰胺聚烯酸共聚物包埋的熒光納米硅小球(SNP@PAAAM@Rh X)TEM結(jié)果表明三種熒光納米小球都具有很好的分散性;通過實驗確定熒光硅納米小球和PAAAM包埋的熒光納米硅小球的Rh X的最佳偶聯(lián)量為1%(W/W);對比三種熒光納米粒子后選擇了熒光硅納米粒子對肌紅蛋白進(jìn)行檢測;3.構(gòu)建了一種檢測肌紅蛋白的新方法,在這種方法中使用金磁復(fù)合微粒作為固相載體分離和富集肌紅蛋白,以熒光納米粒子作為定量檢測手段,對肌紅蛋白實現(xiàn)了快速檢測,該檢測方法的檢測時間不超過30 min,在濃度為0~250 ng/mL的范圍內(nèi)擁有良好的線性關(guān)系(R2=0.993),其理論最低檢測限達(dá)到0.28 ng/mL,并且擁有很好的重復(fù)性和選擇性。
【關(guān)鍵詞】:金磁復(fù)合微粒 熒光納米粒子 免疫檢測 肌紅蛋白 磁性納米粒子 硅納米粒子
【學(xué)位授予單位】:湖北工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:TB383.1;O657.3
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-10
  • 第一章 緒論10-25
  • 1.1 免疫檢測技術(shù)概述10-16
  • 1.1.1 標(biāo)記免疫檢測技術(shù)10
  • 1.1.2 標(biāo)記免疫檢測技術(shù)的原理10-12
  • 1.1.3 標(biāo)記免疫檢測技術(shù)的分類12-16
  • 1.2 納米粒子的性質(zhì)及其免疫檢測中的應(yīng)用16-24
  • 1.2.1 納米粒子的性質(zhì)16-17
  • 1.2.2 納米粒子在免疫檢測中的應(yīng)用17-24
  • 1.3 本論文的選題思路和研究內(nèi)容24-25
  • 第二章 金磁復(fù)合微粒的制備25-38
  • 2.1 前言25-26
  • 2.2 本章內(nèi)容26
  • 2.3 材料與方法26-30
  • 2.3.1 試劑26-27
  • 2.3.2 儀器27
  • 2.3.3 Fe_3O_4磁性納米粒子的制備27-28
  • 2.3.4 Fe_3O_4磁性納米粒子的硅包埋和羧基功能化28-29
  • 2.3.6 組裝制備金磁復(fù)合微粒29
  • 2.3.7 性能表征29-30
  • 2.4 結(jié)果與討論30-36
  • 2.4.1 Fe_3O_4磁性納米粒子的表征30-31
  • 2.4.2 羧基功能化的Fe_3O_4@SiO_2復(fù)合微粒的表征31-33
  • 2.4.3 FT-IR圖譜33
  • 2.4.4 考察BSA的修飾量33-34
  • 2.4.5 金磁復(fù)合微粒的UV-Vis圖譜34-35
  • 2.4.6 金磁復(fù)合微粒的形態(tài)表征35-36
  • 2.4.7 金磁復(fù)合微粒的磁性表征36
  • 2.5 本章總結(jié)36-38
  • 第三章 熒光納米粒子的制備38-49
  • 3.1 前言38-39
  • 3.1.1 熒光檢測技術(shù)38
  • 3.1.2 熒光納米粒子38-39
  • 3.2 本章內(nèi)容39-40
  • 3.3 材料與方法40-44
  • 3.3.1 試劑40
  • 3.3.2 儀器40-41
  • 3.3.3 硅納米粒子的制備41
  • 3.3.4 熒光硅納米粒子的制備41-42
  • 3.3.5 熒光PAAAM納米粒子的制備42
  • 3.3.6 熒光SNP@PAAAM納米粒子的制備42-43
  • 3.3.7 性能表征43-44
  • 3.4 結(jié)果與討論44-48
  • 3.4.1 三種熒光納米粒子的形態(tài)表征44-46
  • 3.4.2 三種熒光納米粒子的FT-IR圖譜46-47
  • 3.4.3 熒光分析47
  • 3.4.4 穩(wěn)定性考察47-48
  • 3.5 本章小結(jié)48-49
  • 第四章 肌紅蛋白的檢測49-56
  • 4.1 前言49
  • 4.2 本章內(nèi)容49-50
  • 4.3 實驗與材料50-52
  • 4.3.1 試劑50
  • 4.3.2 儀器50
  • 4.3.3 免疫金磁微粒的制備50-51
  • 4.3.4 免疫熒光硅納米粒子的制備51
  • 4.3.5 檢測全血樣中的肌紅蛋白51-52
  • 4.4 結(jié)果與討論52-55
  • 4.4.1 免疫金磁復(fù)合微粒和免疫熒光硅納米粒子的表征52-53
  • 4.4.2 建立檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線53-54
  • 4.4.3 評估最低檢測限54
  • 4.4.4 檢測方法的重復(fù)性分析54-55
  • 4.4.5 檢測方法的選擇性分析55
  • 4.5 本章小結(jié)55-56
  • 第五章 總結(jié)與展望56-57
  • 參考文獻(xiàn)57-61
  • 碩士期間的成果61-62
  • 致謝62

【相似文獻(xiàn)】

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1 顧仁敖;陳三朋;;伏安免疫檢測[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué));1991年03期

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7 孔濤;李小兵;劉國文;謝光洪;張志剛;張q

本文編號:269123


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