人血清白蛋白納米管的制備及其對(duì)核酸吸附與釋放性能的研究
發(fā)布時(shí)間:2019-10-02 18:37
【摘要】:蛋白質(zhì)納米管是一類具備生物活性、生物相容性、易降解和易于修飾特性的納米材料,在生物催化、分離和載藥等領(lǐng)域有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)及廣闊的應(yīng)用前景。本文在蛋白質(zhì)納米管制備基礎(chǔ)上討論了人血清白蛋白(HSA)微/納米管的制備及其影響因素;研究了HSA納米管對(duì)核酸的吸附與釋放。本文的主要研究成果如下:1.以人血清白蛋白(HSA)和聚乙烯亞胺(PEI)為組裝材料,采用徑跡刻蝕聚碳酸酯(PC)納米多孔膜為模板,利用層層自組裝(LbL assembly)技術(shù)制備了HSA微米管和納米管?疾炝薍SA微米管和納米管制備的影響因素,如溶液pH、離子強(qiáng)度、組裝層數(shù)、沉淀清洗次數(shù)和模板孔徑,并利用掃描電子顯微鏡(SEM)、透射電子顯微鏡(TEM)、傅立葉變換紅外光譜(FT-IR)和X射線能譜(EDS)表征其形態(tài)與組成。結(jié)果顯示:當(dāng)HSA和PEI溶液pH分別為7.4和10.3,且PEI溶液不加NaCl時(shí),組裝得到的管狀結(jié)構(gòu)較好;組裝層數(shù)影響管壁厚度,組裝層數(shù)越多管壁越厚,其中PEI/HSA雙分子層數(shù)應(yīng)不少于3;為使微/納米管從PC模板中充分釋放,N,N-二甲基甲酰胺(DMF)清洗沉淀次數(shù)應(yīng)不少于5次;微/納米管的外徑取決于PC模板的孔徑。2. 利用紫外光譜法研究了內(nèi)外管壁均修飾聚陽(yáng)離子電解質(zhì)PEI的HSA納米管(PEI/HSA)5PEI對(duì)DNA的吸附與釋放。以polyA25為模型ssDNA,探討了(PEI/HSA)5PEI納米管吸附DNA的影響因素,并利用動(dòng)力學(xué)和熱力學(xué)模型分析了吸附過程。結(jié)果顯示:(PEI/HSA)5PEI內(nèi)米管對(duì)DNA有高效的吸附性能(Q0=606.0 mg/g);吸附過程符合準(zhǔn)二級(jí)吸附動(dòng)力學(xué)模型、顆粒內(nèi)擴(kuò)散模型和Langmuir模型;可知DNA在(PEI/HSA)5PEI納米管上的吸附為單分子層吸附、(PEI/HSA)5PEI納米管對(duì)DNA有較強(qiáng)的作用力(b1)且吸附有利(RL1)。研究了溶液離子強(qiáng)度對(duì)DNA釋放的影響。結(jié)果顯示:DNA釋放率隨溶液的離子強(qiáng)度增加而增大;離子強(qiáng)度相同,pH 5.7的平衡釋放率高于pH 7.4,表明(PEI/HSA)5PEI納米管對(duì)DNA的釋放同時(shí)受pH影響。本研究對(duì)于了解DNA與蛋白質(zhì)納米管間的相互作用以及研究和發(fā)展蛋白質(zhì)納米管作為基因載體等具有十分重要的指導(dǎo)意義。
【圖文】:
溶酶體吞噬,為避免外源基因被溶酶體酶降解,要求能夠及時(shí)有效地從溶酶體內(nèi)逸出;逡逑復(fù)合物從內(nèi)含體釋放進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后釋放出DNA;隨后,DNA進(jìn)入細(xì)胞核并與染色質(zhì)基逡逑因組重組,使外源基因穩(wěn)定表達(dá)(圖1-1)。逡逑DNA邐mRNA邐siRNA邋or邋miRNA逡逑尊邐S緬危厘尾五蜸茫溴義細(xì)村澹ュ、八/、/、逦}鰨粒鄭粒鄭痢㈠義?邋?邋?辶x!逦1辶x!辶x希櫻螅簦澹恚椋沐澹洌澹歟椋觶澹潁義希俊、、*、逦∮z咤?_逦-逦-逦/逦艺d危咤巍巍鯳—一逡逑i.邐‘邐r."1,.,1,,,…,■邋.,,,,邋■邋>邋4逡逑K邐f逡逑S邐o邋0逡逑b邐y邐Serum逡逑J邐/邋^0/邐的邐eridonucleases逡逑s邐‘邋?邋o』逡逑I-邋Macrop一邐'邋4邐
本文編號(hào):2545056
【圖文】:
溶酶體吞噬,為避免外源基因被溶酶體酶降解,要求能夠及時(shí)有效地從溶酶體內(nèi)逸出;逡逑復(fù)合物從內(nèi)含體釋放進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后釋放出DNA;隨后,DNA進(jìn)入細(xì)胞核并與染色質(zhì)基逡逑因組重組,使外源基因穩(wěn)定表達(dá)(圖1-1)。逡逑DNA邐mRNA邐siRNA邋or邋miRNA逡逑尊邐S緬危厘尾五蜸茫溴義細(xì)村澹ュ、八/、/、逦}鰨粒鄭粒鄭痢㈠義?邋?邋?辶x!逦1辶x!辶x希櫻螅簦澹恚椋沐澹洌澹歟椋觶澹潁義希俊、、*、逦∮z咤?_逦-逦-逦/逦艺d危咤巍巍鯳—一逡逑i.邐‘邐r."1,.,1,,,…,■邋.,,,,邋■邋>邋4逡逑K邐f逡逑S邐o邋0逡逑b邐y邐Serum逡逑J邐/邋^0/邐的邐eridonucleases逡逑s邐‘邋?邋o』逡逑I-邋Macrop一邐'邋4邐
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