稻(Oryza sativa L.)是世界上最重要的糧食作物之一,供養(yǎng)了世界將近50%的人口。由子囊菌Magnaporthe oryzae (無性世代：Pyricularia oryzae)引起的稻瘟病,是水稻生產(chǎn)上最嚴(yán)重的病害之一,常常導(dǎo)致水稻產(chǎn)量嚴(yán)重?fù)p失。實(shí)踐證明增強(qiáng)水稻的稻瘟病抗性是防治稻瘟病最經(jīng)濟(jì)、有效的途徑。在常規(guī)的稻瘟病抗性育種中,需要通過不斷雜交和回交才能將多個抗病基因聚合到一個水稻材料中,時間往往需要十年甚至更長。但是,高度變異的稻瘟病菌致病性經(jīng)常導(dǎo)致抗性品種的抗性快速消失。通過RNAi (RNA interference)技術(shù)下調(diào)稻瘟病感病基因或感病相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)是提高水稻稻瘟病抗性的一種有效途徑。但不同的RNAi轉(zhuǎn)基因植株中表達(dá)量往往不一致,難以獲得穩(wěn)定的高表達(dá)轉(zhuǎn)入株系；且因?yàn)檗D(zhuǎn)基因安全問題,RNAi轉(zhuǎn)基因植株還面臨嚴(yán)格的管理流程。然而,TALENs (Transcription activator-like effector nucleases, TALENs) 和 CRISPR/Cas9 (Clustered regularly interspaced ...

【文章頁數(shù)】：149 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?ＤＳＢｓ修復(fù)途棒??ＳＳＮｓ在基因組特定位點(diǎn)產(chǎn)生ＤＮＡ巧鏈斷裂（ＤＳＢｓ），通過非同源末端連接（ＮＨＥＪ）修復(fù)途徑可實(shí)??現(xiàn)定點(diǎn)刪除（左）；在供體ＤＮＡ片段存在時，通過同源末端連接（ＨＲ）修復(fù)途徑可實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)脊換??

定的位置上切割ＤＮＡ雙鏈，造成ＤＮＡ雙鏈斷裂（ＤＮＡ?ｄｏｕｂｌｅ－ｓｔｒａｎｄ?ｂｒｅａｋｓ，?ＤＳＢｓ）！??而ＤＳＢｓ的發(fā)生能夠極大地提髙重組事件發(fā)生的概率（Ｃｏｈｅｎ－Ｔａｎｎｏｕｄｊｉｅｔａｌ．，１９９８）。在??真核生物中，ＤＳ化的修復(fù)機(jī)制高度保守，主要包括兩種途徑（....

圖１－２黃單胞桿菌ＴＡＬ效應(yīng)子功能結(jié)構(gòu)域（Ｂｏ油ａｎｄ?Ｂｏｎａｓ，２０１０）??

Ｌ３．２?ＴＡＬＥ?＾＾巧分布??經(jīng)序列分析發(fā)現(xiàn)，所有的ＴＡＬＥＳ都具有高度統(tǒng)一的結(jié)構(gòu)：即高度保守的Ｎ端和Ｃ??端、中間部分的重復(fù)區(qū)（圖１－２）。其中，Ｎ端含有Ｔ３Ｓ分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)信號結(jié)構(gòu)域，是ＴＡＬＥ??４??

圖1-3RVDs與核普酸堿基之間的識別密碼(Bochetal,2b09)

）?ＴＡＬ效應(yīng)子包含中的串聯(lián)重復(fù)結(jié)構(gòu)域、核定位信號結(jié)構(gòu)域和漱活結(jié)構(gòu)域。ＡｖｒＢｓ３的單元編碼的氣基酸序列如圖所示，第１２和第１３位氣基酸高度可變。化）ＡｖｒＢｓ３的１７．５元第１２和第１３位気基敵對應(yīng)一致的ＵＰＡ框核貫酸。（Ｃ）ＴＡＬ效應(yīng)子重復(fù)可變區(qū)氣基酸ＤＮＡ鏈核菩酸及其頻率。....

圖１－５?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９核酸酶剪切範(fàn)序列原理（Ｍａ?ｅｔ?ａｌ．，２０１沛）??ｇＲＮＡ結(jié)合到基因組把序列后，Ｃａｓ９蛋白的類ＲｕｖＣ結(jié)構(gòu)域在ＰＡＭ?（ＮＧＧ）上游的第３和第４個榜??普酸中間剪切ＤＮＡ鏈，ＨＮＨ結(jié)構(gòu)域在同一位置巧切互補(bǔ)ＤＮＡ鏈

圖１－５?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９核酸酶剪切範(fàn)序列原理（Ｍａ?ｅｔ?ａｌ．，２０１沛）??ｇＲＮＡ結(jié)合到基因組把序列后，Ｃａｓ９蛋白的類ＲｕｖＣ結(jié)構(gòu)域在ＰＡＭ?（ＮＧＧ）上游的第３和第４個榜??普酸中間剪切ＤＮＡ鏈，ＨＮＨ結(jié)構(gòu)域在同一位置巧切互補(bǔ)ＤＮＡ鏈。??Ｆｉｇ．?１－５?Ｐｒ....

本文編號：3955077