本文關(guān)鍵詞： 腎母細(xì)胞瘤 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 差異表達(dá)基因 缺氧誘導(dǎo)因子1α 侵襲性　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：一、研究背景隨著經(jīng)濟(jì)社會(huì)的發(fā)展,小兒各類(lèi)疾病的病因、診斷和治療研究不斷完善,感染性疾病、先天性疾病的發(fā)病率和病死率明顯降低。然而,兒童惡性腫瘤的發(fā)病率明顯提高,成為兒童死亡的主要病因之一。在已經(jīng)到來(lái)的分子生物學(xué)時(shí)代和精準(zhǔn)醫(yī)療模式下,與成人比較,兒童惡性腫瘤病因、早期診斷及治療的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用明顯滯后,影響了兒童腫瘤的精準(zhǔn)診斷與治療。因此明確兒童惡性腫瘤的發(fā)病進(jìn)展機(jī)制,明確突變基因,找到有效腫瘤標(biāo)記物,提高診治水平,改善患兒生存率,減少治療中近遠(yuǎn)期副作用的影響,已經(jīng)成為目前社會(huì)迫切關(guān)注和需要解決的問(wèn)題。腎母細(xì)胞瘤(Wilms Tumor)是一種腎臟的胚胎性惡性腫瘤,也是兒童最常見(jiàn)的泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤,其發(fā)病率約占兒童實(shí)體腫瘤的14%,發(fā)病高峰年齡在1-5歲。雖然經(jīng)過(guò)近50年手術(shù)、化療及放療等綜合治療方案的不斷改進(jìn),Wilms Tumor生存率有明顯提高,治療后5年生存率達(dá)到了87%,但是一定數(shù)量的病例因腫瘤細(xì)胞間變、較晚的臨床分期以及腫瘤破潰,表現(xiàn)出較高的復(fù)發(fā)率和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率,導(dǎo)致了較差的預(yù)后。另外,由于缺乏有效的腫瘤標(biāo)志物可能導(dǎo)致低危險(xiǎn)度病例過(guò)度治療以及高危險(xiǎn)度病例治療不足帶來(lái)的嚴(yán)重并發(fā)癥和不良后果。因此研究Wilms Tumor進(jìn)展的發(fā)病機(jī)制,尋找密切相關(guān)的生物學(xué)指標(biāo)是細(xì)化治療方案、減少不良反應(yīng)的重要步驟,也是改善患兒生存率和生活質(zhì)量的關(guān)鍵。腫瘤的調(diào)控是一個(gè)龐大復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò),涉及到許多調(diào)控通路。近年來(lái),腫瘤的基礎(chǔ)研究不斷拓展,發(fā)現(xiàn)了許多與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)的調(diào)控通路,而且這些調(diào)控通路在早期診斷、腫瘤的分期和分級(jí)、治療藥物的開(kāi)發(fā)以及預(yù)后的判斷上提供了更加準(zhǔn)確的標(biāo)志,不僅更加深入的了解腫瘤發(fā)生的機(jī)制,更好地評(píng)估腫瘤的分級(jí),提供了精準(zhǔn)的治療方案,增加了治療方法,減少了并發(fā)癥。但是目前,在Wilms Tumor中已經(jīng)研究清楚的信號(hào)通路甚少,特別是信號(hào)通路下游的重要調(diào)控基因和元件,因此了解更多的信號(hào)通路的下游突變基因有助于掌握Wilms Tumor致病的機(jī)制和準(zhǔn)確判斷的標(biāo)記物。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(Transforming growth factor beta,TGF-β)是目前已知的一類(lèi)具有多種功能的生物學(xué)活性的細(xì)胞因子,也是其調(diào)控傳導(dǎo)通路的起始因子,參與腫瘤的形成。作用的相關(guān)機(jī)制包括通過(guò)促進(jìn)VEGF表達(dá)增強(qiáng)參與腫瘤新生微血管的生成；誘導(dǎo)免疫抑制和免疫逃避現(xiàn)象；在腫瘤轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中誘發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化,提高了腫瘤細(xì)胞的侵襲性和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力。TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族是已知的最重要的參與機(jī)體多種生物學(xué)調(diào)控過(guò)程的信號(hào)通路之一,作用非常廣泛,包括細(xì)胞增殖、分化、遷移和凋亡。在一些腫瘤研究中表明TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族的各個(gè)生物學(xué)機(jī)制需要下游復(fù)雜的信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程,也需要各個(gè)基因、分子之間的協(xié)同作用,因此研究下游信號(hào)通路的改變和相互作用,能夠更準(zhǔn)確地了解腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。實(shí)體瘤組織內(nèi)普遍存在低氧的情況,腫瘤因過(guò)度生長(zhǎng)導(dǎo)致其血管供血和供氧能力相對(duì)不足而產(chǎn)生缺氧狀態(tài),然而惡性腫瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中,可以通過(guò)自身的調(diào)節(jié)增加新生血管,擴(kuò)張血管,提高細(xì)胞糖酵解,克服低氧和營(yíng)養(yǎng)不足的情況繼續(xù)生長(zhǎng),因此腫瘤的生長(zhǎng)、增殖和轉(zhuǎn)移必然和其能夠通過(guò)一系列細(xì)胞因子復(fù)雜的作用,克服缺氧的狀態(tài)和環(huán)境有關(guān)。Wilms Tumor的腫瘤位于腹膜后,位置較為隱匿,早期沒(méi)有特異性的癥狀和體征,生長(zhǎng)較為迅速,發(fā)現(xiàn)時(shí)往往比較大,直徑常常大于10cm,較多病例的腫瘤組織表現(xiàn)為囊性和實(shí)性相間,內(nèi)部有明顯缺氧液化的情況,并且部分出現(xiàn)壞死灶,腫瘤內(nèi)部明顯存在缺氧微環(huán)境。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外開(kāi)始對(duì)HIF-1α在Wilms Tumor中的作用機(jī)制進(jìn)行初步的研究。結(jié)果表明HIF-1α在Wilms Tumor組織中表達(dá)明顯增高,可能是Wilms Tumor的正向調(diào)節(jié)因子,并且與臨床分期和預(yù)后有密切的相關(guān)性,對(duì)指導(dǎo)臨床治療和判斷預(yù)后有一定幫助。Wilms Tumor組織中HIF-1α可能會(huì)刺激血管上皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)的表達(dá),保證腫瘤內(nèi)部的血液供應(yīng),這也可能是以后治療的一個(gè)靶點(diǎn)。缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor 1α, HIF-1α)在Wilms Tumor中是目前發(fā)現(xiàn)的介導(dǎo)細(xì)胞低氧反應(yīng)中關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子之一。HIF-1α是在缺氧條件下傳遞缺氧的信號(hào)、介導(dǎo)缺氧效應(yīng)的重要轉(zhuǎn)錄因子,通過(guò)結(jié)合缺氧反應(yīng)因子激活下游眾多靶基因從而參與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移、血管生成、能量代謝以及放化療抵抗等多個(gè)環(huán)節(jié)。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial mesenchymal transition, EMT)的發(fā)生是在胚胎發(fā)育、腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到關(guān)鍵作用的機(jī)制。而HIF-1α在腫瘤低氧微環(huán)境中通過(guò)介導(dǎo)的低氧信號(hào)傳導(dǎo)作用啟動(dòng)和EMT的發(fā)生,多種機(jī)制參與其中,已知的相關(guān)信號(hào)通路有Notch信號(hào)通路、Wnt信號(hào)通路、干細(xì)胞生長(zhǎng)因子/干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路(HGF/Met)和刺猬信號(hào)通路。但是在Wilms Tumor中的HIF-1α具體的調(diào)控機(jī)制如何仍然不甚清楚,是否參與到’Wilms Tumor細(xì)胞的侵襲性和轉(zhuǎn)移能力增加也不清楚。二、研究目的本研究的目的是通過(guò)收集Wilms Tumor病人的臨床病理資料、病理組織標(biāo)本和隨訪情況,采用分子生物學(xué)的方法檢測(cè)病人腎母細(xì)胞瘤標(biāo)本TGF-β信號(hào)通路超家族中84個(gè)重要基因中的突變差異情況,并且進(jìn)行篩選和驗(yàn)證,最后與臨床病理學(xué)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性的分析,以期建立更加精確診斷、預(yù)測(cè)腎母細(xì)胞瘤病人預(yù)后情況的方法。另外利用SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞株在低氧環(huán)境中培養(yǎng),模擬建立體外低氧環(huán)境下腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的模型,對(duì)比正常氧濃度環(huán)境下的結(jié)果,分析SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞的形態(tài)變化、生長(zhǎng)情況。檢測(cè)HIF-1α表達(dá)量,用以說(shuō)明SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞在兩種環(huán)境中表達(dá)水平的變化。另外檢測(cè)SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞中上皮細(xì)胞的標(biāo)志性蛋白,即上皮鈣粘蛋白(E-cadherin),間質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志性蛋白,即波形蛋白(Vimentin)的表達(dá)量,從而分析HIF-la在Wilms Tumor中是否通過(guò)EMT轉(zhuǎn)化的作用機(jī)制增加腫瘤侵襲性和遷移能力。最后推測(cè)我們進(jìn)一步治療可能的靶點(diǎn)和逆轉(zhuǎn)途徑。三、材料與方法1、臨床WT組織標(biāo)本的收集、分組本研究通過(guò)廣州市婦女兒童醫(yī)療中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn),可以進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)。收集本中心治療的,2010年1月至2012年12月符合單側(cè)Wilms Tumor病理診斷的臨床病例28例。所有術(shù)前化療及雙側(cè)Wilms Tumor的病例均排除在本實(shí)驗(yàn)之外。手術(shù)中分別取了28例病人瘤體標(biāo)本作為腫瘤組(28例)和癌旁腎組織作為癌旁組(28例)。2、臨床腫瘤標(biāo)本組織處理及RNA的提取和檢測(cè)Wilms Tumor腫瘤組織作為腫瘤組,癌旁腎組織作為癌旁組,分別提取總的RNA。用核酸蛋白定量?jī)x(NanoDrop 2000/2000 ultra-micro uv-vis分光光度計(jì))檢測(cè)OD260/OD280,判斷提取RNA的濃度；為了排除RNA有降解或基因組DNA有污染,取溶解好的RNA溶液置于1%的瓊脂糖凝膠上電泳檢測(cè),以RIN (RNA Integrity Number)的值、28S和18S的比例及條帶清晰程度,用以觀察樣品總RNA的純度和完整性。3、TGF-β/BMP信號(hào)通路突變的差異基因的初步篩查隨機(jī)抽取前述Wilms Tumor腫瘤的Ⅰ期、Ⅱ期組織標(biāo)本各1例,Ⅲ期組織標(biāo)本2例,予以混合RNA,用于初步篩查,利用Human TGF-β/BMP Signaling Pathway PCR Array標(biāo)準(zhǔn)試劑盒檢測(cè)信號(hào)通路84個(gè)基因的突變差異情況。4、利用RT-PCR的方法在28例組織標(biāo)本上驗(yàn)證TGF-β信號(hào)通路超家族中突變明顯的差異基因根據(jù)Human TGF-β/BMP Signaling Pathway PCR Array初篩的檢測(cè)結(jié)果,分析和篩選可能突變的差異基因,提示84個(gè)基因中出現(xiàn)7個(gè)腫瘤組相較癌旁組增加10倍以上的差異突變基因,分別是AMH(12倍)、BMPR1A(27倍)、CHRD (43倍)、COL1A2(10倍)、GDF2(27倍)、IGF(14倍)、NROB1(11倍)�？紤]TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族突變差異基因可能存在于這7個(gè)基因里,利用RT-PCR方法在全部28個(gè)病例的腫瘤組和癌旁組的標(biāo)本中進(jìn)行檢測(cè)驗(yàn)證。5、Wilms Tumor組織TGF-β信號(hào)通路超家族突變差異基因與臨床病理因素的相關(guān)性分析本研究臨床病理的各項(xiàng)因素,包括性別、年齡、分期、病理分型和侵襲／遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,隨訪時(shí)間3至5年,患者有無(wú)復(fù)發(fā),這些指標(biāo)與BMPR1A mRNA表達(dá)是否升高進(jìn)行比較。差異表達(dá)基因表達(dá)量與臨床病理因素的比較采用Chi-Square檢驗(yàn)。P0.05被認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6、SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤在不同氧濃度下細(xì)胞培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)評(píng)估SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞株(中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞庫(kù))在兩種氧濃度下培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)組,即缺氧誘導(dǎo)組20份,將培養(yǎng)液氧濃度調(diào)整至1%,37攝氏度條件下培養(yǎng)6小時(shí)。對(duì)照組,即正常組20份,為正常氧濃度21%,37攝氏度條件下培養(yǎng)6小時(shí)。分別在顯微鏡下觀察腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的形態(tài)。7、正常組及缺氧誘導(dǎo)組腫瘤細(xì)胞RNA的提取和RT-PCR方法的檢測(cè)HIF-1α的mRNA量8、Transwell侵襲性實(shí)驗(yàn)和Transwell遷移性實(shí)驗(yàn)將正常組及缺氧誘導(dǎo)組兩組培養(yǎng)細(xì)胞置入Transwell板中,分別進(jìn)行侵襲性實(shí)驗(yàn)和遷移性實(shí)驗(yàn),染色膠膜上的腫瘤細(xì)胞,并在倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行配對(duì)的T檢驗(yàn),比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。9、利用Western blotting方法檢測(cè)正常組及缺氧誘導(dǎo)組中人Wilms Tumor SK-NEP-1細(xì)胞的HIF-1α、Vimentin、E-cadherin以及B-actin蛋白表達(dá)量四、研究結(jié)果1、TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族差異基因的篩選和驗(yàn)證對(duì)臨床Wilms Tumor組織標(biāo)本提取的總RNA數(shù)量、質(zhì)量及完整性進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果符合進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)。Human TGF-β/BMP Signaling Pathway PCR Array標(biāo)準(zhǔn)試劑盒檢測(cè)TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族中84個(gè)基因的突變差異情況,初步篩選出7個(gè)腫瘤組與癌旁組比較,mRNA表達(dá)量大于10倍的可能的突變差異基因,分別是AMH(抗苗勒氏管激素)(12.07倍)、BMPR1A(骨形態(tài)生成蛋白1A型受體)(27.15倍)、CHRD(腱蛋白)(43.40倍)、COL1A2(I型膠原)(10.45倍)、GDF2(生長(zhǎng)分化因子2)(27.84倍)、IGF(胰島素樣生長(zhǎng)因子1)(14.54倍)、NROB1(核受體家族)(11.18倍)。RT-PCR方法在28例Wilms Tumor病人的腫瘤組織和癌旁腎組織中驗(yàn)證的結(jié)果是BMPR1A(p=0.0360.05)和NROB1(p=0.0390.05)是突變的差異基因。2、BMPR1A基因表達(dá)與Wilms Tumor病人臨床病理資料的相關(guān)性分析BMPR1A基因的表達(dá)在臨床病理資料各因素內(nèi)(性別、年齡、分期、侵襲和轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)、病理類(lèi)型)比較,P均大于0.05,各組內(nèi)沒(méi)有明顯差異。3, SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤在不同氧濃度下細(xì)胞培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)評(píng)估在正常組中,腫瘤細(xì)胞顯示多邊形,排列規(guī)則緊密。在低氧誘導(dǎo)組中,腫瘤細(xì)胞顯示橢圓形或紡錘形,排列松散且不規(guī)則。4、缺氧誘導(dǎo)組及正常組人Wilms Tumor SK-NEP-1細(xì)胞HIF-1α mRNA水平的比較對(duì)SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞株培養(yǎng)的正常組及缺氧誘導(dǎo)組中分別提取RNA數(shù)量、質(zhì)量及完整性進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示符合進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示缺氧誘導(dǎo)組(6.36±0.76)中HIF-1α mRNA表達(dá)水平明顯上升,并且顯著高于正常組(2.69±0.86)(p0.05)。5、缺氧誘導(dǎo)組及正常組上皮細(xì)胞-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白水平表達(dá)的比較利用Western blotting方法分別檢測(cè)]HIF-1α、Vimentin、E-cadherin及Actin蛋白的表達(dá),結(jié)果顯示HIF-1α和Vimentin的蛋白水平在缺氧誘導(dǎo)組中明顯上升并高于正常組(0.96±0.15 vs 0.51±0.06；1.01±0.13 Vs 0.81±0.06,p0.05),而E-cadherin的蛋白水平在缺氧誘導(dǎo)組中下降并明顯低于正常組(1.03±0.13 vs 1.15±0.11,p0.05)。6、缺氧誘導(dǎo)組和正常組SK-NEP-1人Wilms Tumor細(xì)胞侵襲性和遷移性能力利用Transwell遷移實(shí)驗(yàn)和侵襲性實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)結(jié)果：兩組WT細(xì)胞數(shù)目檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種膠膜中腫瘤細(xì)胞數(shù)在缺氧誘導(dǎo)組中顯著高于正常組。(P0.05)五、討論1、利用PCR芯片的方法在臨床腎母細(xì)胞瘤腫瘤組織標(biāo)本中篩選出TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族中突變差異基因?yàn)锽MPR1A和NROB1TGF-p/BMP信號(hào)傳導(dǎo)通路PCR芯片檢測(cè)并在大樣本中驗(yàn)證出突變差異基因?yàn)锽MPR1A和NROB1。BMPR1A(骨形態(tài)生成蛋白1A型受體)基因位于人染色體10q23,又稱(chēng)ALK3。它在TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族中屬于TGF-β細(xì)胞因子超家族受體的類(lèi)別。文獻(xiàn)證實(shí)在乳腺腫瘤中,BMPR1A的缺乏不僅影響腫瘤細(xì)胞增殖的啟動(dòng),而且會(huì)影響腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化作用,其高表達(dá)會(huì)明顯增加乳腺癌的侵襲性。利用小鼠敲除BMPR1A模型能夠證實(shí)干預(yù)BMP的受體能夠給治療高分期的神經(jīng)膠質(zhì)瘤更好的幫助。miR-656能夠抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)和進(jìn)展,是通過(guò)抑制BMPR1A的表達(dá)。而在本研究中,BMPR1A基因mRNA在WT腫瘤組織中明顯升高,可以說(shuō)明其在Wilms Tumor的發(fā)生和進(jìn)展中起到了重要作用,進(jìn)而影響了TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族在腫瘤中的作用,可能促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移。但是具體的的影響機(jī)制不明確,是否對(duì)其進(jìn)行干預(yù)能夠延緩腫瘤的生長(zhǎng)等還有待進(jìn)一步的體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)。NROB1目前與腫瘤的相關(guān)研究較少,擬進(jìn)一步明確表達(dá)的臨床相關(guān)性后再對(duì)NROB1的表達(dá)升高與Wilms Tumor關(guān)系進(jìn)行討論。2、TGF-β/BMP信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族突變差異基因BMPR1A表達(dá)的增加與臨床病理特點(diǎn)的相關(guān)分析暫時(shí)無(wú)明顯意義,需要進(jìn)一步增加病例數(shù)后明確相關(guān)關(guān)系我們對(duì)病人的術(shù)前信息、術(shù)后腫瘤的分期、侵襲和轉(zhuǎn)移(淋巴結(jié)、輸尿管、腎盂、腎內(nèi)和腎外血管)、復(fù)發(fā)和病理類(lèi)型(預(yù)后良好型和預(yù)后差型),分別和BMPR1A mRNA的檢測(cè)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)分析的比較。結(jié)果顯示BMPR1A mRNA升高在這些臨床因素中沒(méi)有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。這可能與本次研究的病例數(shù)不足有關(guān),應(yīng)該聯(lián)合多家中心,擴(kuò)大病例數(shù)。增加比較的因素,如存活率和無(wú)瘤存活率等,可能可以找到有價(jià)值的臨床意義。3、缺氧誘導(dǎo)條件下腎母細(xì)胞瘤腫瘤SK-NEP-1細(xì)胞生長(zhǎng)的模型是研究HIF-1α的一個(gè)很好的體外模型4、HIF-1α在人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)模型中是通過(guò)介導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用機(jī)制,在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中起到重要作用缺氧微環(huán)境能夠上調(diào)人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞表達(dá)HIF-1α,促進(jìn)了該腫瘤細(xì)胞的形態(tài)轉(zhuǎn)變,提高了其組織侵襲性和遷移性的能力。Vimentin蛋白表達(dá)的上調(diào)和E-cadherin蛋白的下調(diào)也提示腫瘤細(xì)胞的EMT能夠促進(jìn)其轉(zhuǎn)移。如果能夠通過(guò)阻斷HIF-1α下游信號(hào)通路的傳導(dǎo)來(lái)改善腫瘤微環(huán)境,這樣可能是一個(gè)有效抑制腫瘤侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的方案。盡管這需要明確更多的機(jī)制和進(jìn)一步的研究,但是這能夠給我們控制腫瘤的快速生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移提供了思路,給一些臨床病人的手術(shù)治療帶來(lái)更多的希望。六、結(jié)論1、腎母細(xì)胞瘤中TGF-p信號(hào)傳導(dǎo)通路超家族中突變差異基因?yàn)锽MPR1A和NROB1。BMPR1A表達(dá)的增加暫時(shí)未發(fā)現(xiàn)與臨床病理學(xué)因素有相關(guān)性,需要進(jìn)一步增加病例數(shù)驗(yàn)證。2、缺氧誘導(dǎo)條件下建立腎母細(xì)胞瘤腫瘤SK-NEP-1細(xì)胞生長(zhǎng)的模型是研究HIF-1α的一個(gè)很好的體外模型。3、HFI-1α在人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)模型中是通過(guò)介導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用機(jī)制,在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中起到重要作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.11

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2 郭心杰,馮全森,馬法仲;成人腎母細(xì)胞瘤1例[J];菏澤醫(yī)專(zhuān)學(xué)報(bào);2000年02期

3 張福丙,王孝廉,賈守道,穆春來(lái),郭海峰,王力;巨大成人腎外腎母細(xì)胞瘤2例[J];臨床泌尿外科雜志;2000年07期

4 龍德云,陳明安,陳和平;原發(fā)性腎母細(xì)胞瘤轉(zhuǎn)移肺內(nèi)1例[J];中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)影像雜志;2000年S1期

5 陳登永,王勇;腎母細(xì)胞瘤1例[J];中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2000年08期

6 李文杰,劉和平;成人腎母細(xì)胞瘤1例[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2000年09期

7 譚秋,李梅;腎母細(xì)胞瘤8例誤診分析[J];臨床醫(yī)學(xué);2000年05期

8 劉成文,李平,婁彥艷,李甘地;成人腎母細(xì)胞瘤1例報(bào)告[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年01期

9 王洪燕,焦順昌,林雁,王秀芹;成人腎母細(xì)胞瘤3例[J];中國(guó)腫瘤臨床;2001年09期

10 楊春,王勇,史靜;小兒Ⅳ期腎母細(xì)胞瘤一例[J];河南腫瘤學(xué)雜志;2001年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 劉志剛;耿玲玲;束玉萍;吳紅艷;何敏;;小兒腎母細(xì)胞瘤30例臨床診療分析[A];第八屆全國(guó)兒童腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 王勇;王兆陽(yáng);閆軍美;;小兒腎母細(xì)胞瘤的綜合治療(附20例報(bào)告)[A];第八屆全國(guó)兒童腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 翟欽;柴憶歡;周云;嚴(yán)向明;;腎母細(xì)胞瘤18例臨床分析[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

4 陸鵬;何大維;林濤;李旭良;魏光輝;劉俊宏;;小兒腎母細(xì)胞瘤術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的臨床診療分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

5 宋宏程;黃澄如;白繼武;孫寧;張濰平;田軍;謝向輝;李明磊;李寧;;腎母細(xì)胞瘤病(附5例病例分析)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

6 張小安;;腎母細(xì)胞瘤螺旋CT征象與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)間關(guān)系的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

7 張應(yīng)權(quán);安妮妮;何國(guó)慶;唐應(yīng)明;唐仕忠;范霞;劉迪;;小兒腎母細(xì)胞瘤的手術(shù)治療[A];中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)第七屆全國(guó)小兒腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

8 壽建忠;李瑞乾;肖振東;肖澤均;田軍;王棟;畢新剛;管考鵬;魯力;韓蘇軍;石泓哲;趙欣;關(guān)有彥;馬建輝;李長(zhǎng)嶺;;成人腎母細(xì)胞瘤的臨床分析[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

9 倪雙雙;吳道珠;林益怡;;小兒腎母細(xì)胞瘤的超聲診斷價(jià)值[A];2008年浙江省超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

10 盛琦;張勤;袁曉軍;吳貽明;蔣馬偉;李玉華;;兒童晚期腎母細(xì)胞瘤的治療[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十七次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前9條

1 ;小兒腎母細(xì)胞瘤血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)及臨床意義[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

2 陳錦屏 常保東 宋海霞;切除巨大腎母細(xì)胞瘤[N];健康報(bào);2006年

3 天津腫瘤醫(yī)院兒童腫瘤科 閆杰;洗澡時(shí)多摸摸孩子肚子[N];健康時(shí)報(bào);2008年

4 段文利 黃鐘明 郭毅;巨大腎母細(xì)胞瘤被切除[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

5 段文利 黃鐘明 郭毅;北京協(xié)和醫(yī)院成功切除成人巨大腎母細(xì)胞瘤[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

6 謝欣;幼女何以懷“怪胎”[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2000年

7 劉永平邋岳麗穎;兒童腹部包塊要當(dāng)心[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2007年

8 葛秋芳;英國(guó)最新研究表明,干細(xì)胞療法可能引發(fā)癌癥[N];新華每日電訊;2007年

9 王炳輝;小兒癌癥如何治療[N];家庭醫(yī)生報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張謙;蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在小兒腎母細(xì)胞瘤臨床中的應(yīng)用研究[D];鄭州大學(xué);2010年

2 王政;小兒腎母細(xì)胞瘤免疫治療的初步研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2007年

3 曹戌;miR-370在Stat3的轉(zhuǎn)錄調(diào)控下通過(guò)WTX促進(jìn)腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖的研究[D];蘇州大學(xué);2015年

4 賈煒;腎母細(xì)胞瘤中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β信號(hào)通路差異表達(dá)基因的篩選、臨床意義及缺氧誘導(dǎo)因子1α介導(dǎo)侵襲性的機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

5 李凱;腎母細(xì)胞瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中端粒酶的表達(dá)和維生素A的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

6 牛之彬;促血管生成因子及其部分相關(guān)因子在腎母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及臨床意義的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

7 賈占奎;腎母細(xì)胞瘤血清標(biāo)記物的篩選與鑒定[D];鄭州大學(xué);2012年

8 王磊;腎母細(xì)胞瘤血清非炎癥性標(biāo)記物的篩選、鑒定及驗(yàn)證[D];鄭州大學(xué);2012年

9 郭鋒;Astrocyte elevated gene-1對(duì)腎母細(xì)胞瘤生物學(xué)行為的影響及分子機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2014年

10 張俊杰;腎母細(xì)胞瘤血清及瘤體組織剔除炎癥因子干擾后標(biāo)記物的篩選、鑒定及驗(yàn)證[D];鄭州大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 盧海超;兒童復(fù)發(fā)性腎母細(xì)胞瘤臨床特點(diǎn)與治療的探討[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 陳新讓;腎母細(xì)胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物檢測(cè)與分期模型構(gòu)建研究[D];鄭州大學(xué);2007年

3 胡超;不同治療模式對(duì)小兒腎母細(xì)胞瘤預(yù)后的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2008年

4 高雪翔;STAT3信號(hào)通路在腎母細(xì)胞瘤腫瘤干細(xì)胞發(fā)生發(fā)展及凋亡中的作用[D];蘭州大學(xué);2016年

5 徐瑞;兒童腎母細(xì)胞瘤73例臨床分析與隨訪[D];山東大學(xué);2016年

6 鄭娜;促血管生成素2在小兒腎母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及與血管生成關(guān)系的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

7 田俊嚴(yán);腎母細(xì)胞瘤中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和一氧化氮合酶表達(dá)與血管生成的關(guān)系及臨床意義[D];鄭州大學(xué);2002年

8 劉德忠;凋亡調(diào)控基因與小兒腎母細(xì)胞瘤多藥耐藥關(guān)系和意義[D];南昌大學(xué);2006年

9 張蛟;小兒腎母細(xì)胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物檢測(cè)及意義[D];鄭州大學(xué);2007年

10 張謙;抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體對(duì)腎母細(xì)胞瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的抑制[D];鄭州大學(xué);2004年

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本文編號(hào)：1470035