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西瓜噬酸菌越冬能力及兩菌群在同一寄主定殖動(dòng)態(tài)差異研究

發(fā)布時(shí)間:2018-01-17 22:30

  本文關(guān)鍵詞:西瓜噬酸菌越冬能力及兩菌群在同一寄主定殖動(dòng)態(tài)差異研究 出處:《沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:西瓜細(xì)菌性果斑病(Watermelon bacterial fruit blotch)是世界范圍廣泛分布的西、甜瓜細(xì)菌性病害,病原菌為西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli, Aac)。該病原菌可侵染西瓜和甜瓜等多種葫蘆科作物,侵染植株或種子,可引起寄主發(fā)病,進(jìn)而造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量損失。病原菌特性及生存特征是防治該病害的基礎(chǔ)。本論文以西瓜噬酸菌為對(duì)象,研究其越冬能力;利用第二代測(cè)序技術(shù)對(duì)西瓜噬酸菌亞群Ⅰ菌株和亞群Ⅱ菌株進(jìn)行基因組測(cè)序及組裝;通過定量分析研究西瓜噬酸菌亞群Ⅰ菌株和亞群Ⅱ菌株在西、甜瓜植株組織上的定殖動(dòng)態(tài)差異;對(duì)新發(fā)現(xiàn)的1株解淀粉芽孢桿菌進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證性試驗(yàn),同時(shí)檢測(cè)該菌株對(duì)西瓜噬酸菌的室內(nèi)抑菌活性及其對(duì)兩個(gè)亞群菌株的防效差異。本文研究?jī)?nèi)容為科學(xué)有效的防控西瓜細(xì)菌性果斑病提供了重要的科學(xué)理論依據(jù)和技術(shù)支撐。主要研究結(jié)果如下:1.以西瓜噬酸菌野生菌株Aac-5為研究對(duì)象,測(cè)定西瓜噬酸菌在不同低溫條件及各地區(qū)不同地表深度的黃土和花卉土中的存活能力。經(jīng)過對(duì)不同條件處理的土壤進(jìn)行分離回收培養(yǎng),平板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)量,將結(jié)果進(jìn)行比較分析得出:西瓜噬酸菌可在4℃、-20℃、-50℃下存活,在各地區(qū)的地表、地下10 cm及地下20 cm處均可越冬存活;總體西瓜噬酸菌在花卉土中的存活量高于在黃土中的存活量;西瓜噬酸菌在南方地區(qū)的越冬存活量高于在北方地區(qū)的越冬存活量,相應(yīng)回收到的西瓜噬酸菌的致病力也相對(duì)強(qiáng)于北方地區(qū)處理后回收菌株的致病力。2.利用第二代測(cè)序技術(shù),Illumina公司的Miseq 2000平臺(tái)對(duì)西瓜噬酸菌亞群Ⅰpslb65菌株和亞群Ⅱ pslbtw6菌株的全基因組進(jìn)行測(cè)序并拼接組裝,最終得出西瓜噬酸菌亞群Ⅰpslb65菌株為一個(gè)4903,443 bp的環(huán)狀染色體,共包含4532個(gè)ORF,基因編碼率為88.61%,GC含量平均為68.8%,其中注釋到54個(gè)RNA;西瓜噬酸菌亞群Ⅱpslbtw6菌株為一個(gè)5080,614 bp的環(huán)狀染色體,共包含4759個(gè)ORF,基因編碼率為88.41%,GC含量平均為68.7%,其中注釋到51個(gè)RNA;西瓜噬酸菌亞群Ⅰ pslb65菌株與Ⅰ組測(cè)序菌株M6進(jìn)化關(guān)系近,分于一組。3.在溫室條件下,用標(biāo)記GFP的亞群Ⅰ pslb3菌株和亞群Ⅱ pslbtw43菌株接種西、甜瓜種子,播種后定期回收下胚軸、根、莖稈、子葉和葉片,分離回收西瓜噬酸菌并用平板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)量。結(jié)果表明亞群Ⅰ pslb3菌株和亞群Ⅱpslbtw43菌株均可在西、甜瓜各組織中定殖,在子葉上的定殖能力最強(qiáng),在葉片上的定殖能力最弱。亞群Ⅰ pslb3菌株在甜瓜組織中的定殖能力強(qiáng)于亞群Ⅱ pslbtw43菌株,而亞群Ⅱ pslbtw43菌株在西瓜組織中的定殖能力強(qiáng)于亞群Ⅰ pslb3菌株。4.分離篩選出1株對(duì)西瓜噬酸菌有拮抗功能的生防菌株,經(jīng)鑒定該菌株為解淀粉芽孢桿菌,命名為JD001。通過室內(nèi)抑菌試驗(yàn)驗(yàn)證了其對(duì)西瓜噬酸菌有較好的抑制效果。同時(shí)測(cè)定了JD001菌株分別對(duì)西瓜噬酸菌兩個(gè)亞群菌株的抑制效果及其在西、甜瓜植株上對(duì)西瓜噬酸菌兩個(gè)亞群菌株的防效比較,得出菌株JD001對(duì)西瓜噬酸菌亞群Ⅰ pslb3菌株和亞群Ⅱ pslbtw43菌株均有較好的室內(nèi)抑菌效果,在西瓜植株上對(duì)亞群Ⅰ pslb3菌株的防治效果高于對(duì)亞群Ⅱ pslbtw43菌株的防效,而在甜瓜植株上對(duì)亞群Ⅱ pslbtw43菌株的防效高于對(duì)亞群Ⅰ pslb3菌株的防治效果。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S436.5

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本文編號(hào):1438289

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