本文關(guān)鍵詞：丙氨酰谷氨酰胺對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠小腸屏障功能的保護(hù)作用及其機(jī)制

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【摘要】：目的：探討低氧暴露、大強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練以及低氧聯(lián)合運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠小腸黏膜屏障功能的作用和交互作用,并探討Ala-Gln或Gin對(duì)小腸屏障功能的干預(yù)作用及其可能機(jī)制,比較Ala-Gln和Gin干預(yù)效果的差異,為高原訓(xùn)練的科學(xué)實(shí)施以及采用有效營(yíng)養(yǎng)措施保護(hù)腸道屏障功能提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：將雄性5周齡SD大鼠111只隨機(jī)分為常氧對(duì)照組(C組,n=20)、常氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(E組,n=20)、低氧對(duì)照組(HC組,n=21)、低氧+運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(HE組,n=20)、低氧+運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練+Gln組(HEG組,n=20)、低氧+運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練Ala-Gln組(HEAG組,n=20)6組,對(duì)大鼠進(jìn)行13.6%的低氧暴露或/和90% LT強(qiáng)度的負(fù)重游泳訓(xùn)練,分別觀察2周后以及6周后大鼠小腸黏膜的組織結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu),同時(shí),通過Elisa檢測(cè)血漿中二胺氧化酶、D-乳酸以及腸組織中TNF-α、NF-κB的含量,通過RT-PCR檢測(cè)小腸黏膜中緊密連接蛋白o(hù)ccludin mRNA表達(dá)的變化。結(jié)果：(1) C、E、HC和HE4組之間進(jìn)行雙因素方差分析發(fā)現(xiàn),2周的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可極顯著減少大鼠小腸絨毛數(shù)量(P0.01),顯著升高血漿DAO、D-乳酸含量(P0.05),和小腸組織中NF-κB含量(P0.01)；運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練雖然能夠降低小腸組織occludin mRNA表達(dá),增加TNF-α含量,但并無顯著差異(P0.05)；而2周的低氧暴露可使小腸絨毛數(shù)量減少、高度降低,但無顯著性差異,但可顯著降低小腸組織occludin mRNA表達(dá)(P0.01),顯著升高血漿DAO、D-乳酸含量(P0.05)和小腸組織TNF-α (P＜.05)、NF-κB含量(P0.01)；且低氧暴露和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)進(jìn)一步減少小腸絨毛數(shù)量、高度和occludin mRNA表達(dá)以及升高血漿DAO、D-乳酸以及小腸組織TNF-α、NF-κB含量均無顯著的交互作用。(2)實(shí)驗(yàn)2周后,與HE組相比,HEG組小腸絨毛數(shù)量和高度有所增加,但無顯著性差異,而HEAG組大鼠小腸絨毛數(shù)量和高度顯著增加(P0.05)。 HEG組和HEAG組大鼠血漿DAO和D-乳酸含量有所降低,但均無顯著性差異(P0.05),而小腸組織occludin mRNA表達(dá)(P0.01)顯著增加,TNF-α和NF-κB含量顯著降低(P0.05,P0.01)。與HEG組相比,HEAG組大鼠除了小腸組織中occludin mRNA表達(dá)顯著增加外,其余指標(biāo)均無顯著性差異。(3) C、E、HC和HE4組之間進(jìn)行雙因素方差分析發(fā)現(xiàn),6周的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練和低氧暴露均使大鼠小腸絨毛數(shù)量極顯著性減少(P0.01),使大鼠小腸絨毛高度縮短,但無顯著性差異；且低氧和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)進(jìn)一步減少大鼠小腸絨毛的數(shù)量和高度具有顯著的交互作用(P0.01,P0.05)。與此同時(shí),6周的低氧暴露和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練均能顯著升高大鼠血漿DAO、 D-乳酸(P0.01)和小腸組織中TNF-α (P0.01, P0.05)和NF-κB含量(P0.01),顯著降低小腸組織中occludin mRNA的表達(dá)(P0.05),且低氧暴露和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)進(jìn)一步增加血漿中DAO、D-乳酸含量具有顯著的交互作用(P0.01),但對(duì)進(jìn)一步增加小腸組織中TNF-α和NF-κB含量無顯著的交互作用(P0.05)。(4)實(shí)驗(yàn)6周后,通過透射電鏡觀察,C組大鼠黏膜微絨毛排列緊密,規(guī)則整齊；上皮細(xì)胞間連接緊密；胞質(zhì)中線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富,形態(tài)結(jié)構(gòu)正常。E組大鼠小腸微絨毛較稀疏,且排列不整齊；線粒體數(shù)量明顯減少,嵴模糊且部分線粒體存在變性的現(xiàn)象；部分細(xì)胞出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象,細(xì)胞間的連接松弛。HC組大鼠小腸微絨毛長(zhǎng)度顯著縮短,排列較為紊亂；上皮細(xì)胞之間的間隙變寬,有些細(xì)胞基質(zhì)空泡化、密度減低。HE組大鼠小腸微絨毛數(shù)量明顯減少,長(zhǎng)度明顯降低,出現(xiàn)倒伏；上皮細(xì)胞之間的間隙變寬,細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清晰,有些細(xì)胞核染色質(zhì)邊集,出現(xiàn)細(xì)胞調(diào)亡現(xiàn)象；線粒體變性,部分線粒體嵴模糊、甚至消失。HEG組大鼠小腸微絨毛排列整齊,密集,長(zhǎng)度明顯增加；胞質(zhì)中線粒體數(shù)量顯著增多且嵴清晰。HEAG組小腸上皮細(xì)胞微絨毛排列緊湊整齊,長(zhǎng)度較HE組明顯增加,絨毛數(shù)量明顯增多；細(xì)胞間連接緊密；胞質(zhì)中線粒體數(shù)量顯著增多且嵴清晰；粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較為豐富,核糖體附著較多,形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,上皮細(xì)胞連接正常,且細(xì)胞間隔清晰可見。(5)6周后,與HE組相比,HEG組小腸絨毛數(shù)量有所增加,但無顯著性差異,絨毛高度顯著增加(P0.01),血漿DAO和D-乳酸含量顯著降低(P0.05,P0.01),小腸組織中occludin mRNA的表達(dá)顯著增加(P0.01), TNF-α和NF-κB的含量顯著降低(P0.05,P＜0.01); HEAG組大鼠小腸絨毛數(shù)量和高度顯著增加(P0.05,P0.01),血漿D-乳酸含量顯著降低(P0.01),而DAO含量有所降低,但無顯著性差異。小腸組織中occludin mRNA的表達(dá)顯著增加(P0.01),TNF-α和NF-κB含量顯著降低(P0.01)。與HEG組相比,HEAG組大鼠小腸絨毛數(shù)量和occludin mRNA的表達(dá)顯著增加(P0.05)。結(jié)論：(1)大強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練以及低氧暴露均能夠?qū)е履c道黏膜屏障功能受損,其損害程度與訓(xùn)練及低氧暴露時(shí)間有關(guān)。(2)補(bǔ)充Gln與Ala-Gln均能夠改善高原訓(xùn)練所引起的腸道黏膜屏障損傷,且Ala-Gin的效果更好。(3)低氧暴露以及大強(qiáng)度訓(xùn)練可能是通過增加小腸內(nèi)TNF-α、NF-κB的含量從而降低TJ蛋白o(hù)ccludin的表達(dá),最終導(dǎo)致小腸通透性增加,腸道黏膜受損。(4)補(bǔ)充Gln及其二肽Ala-Gln可使小腸內(nèi)TNF-α、NF-κB的含量降低,TJ蛋白o(hù)ccludin的表達(dá)增加,這可能是其干預(yù)高原訓(xùn)練導(dǎo)致的小腸屏障損傷的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：高原訓(xùn)練 腸道屏障 谷氨酰胺 丙氨酰谷氨酰胺
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：G804.2
【目錄】：

• 中文摘要3-6
• ABSTRACT6-13
• 中英文對(duì)照表13-14
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述14-28
• 1 高原訓(xùn)練的概述14-15
• 1.1 高原訓(xùn)練的發(fā)展14-15
• 1.2 高原訓(xùn)練的作用15
• 1.3 高原訓(xùn)練的不良影響及其副作用15
• 2 腸道屏障功能的研究進(jìn)展15-18
• 2.1 機(jī)械屏障16
• 2.2 免疫屏障16-17
• 2.3 化學(xué)屏障17
• 2.4 生物屏障17-18
• 3 高原訓(xùn)練對(duì)腸道黏膜屏障的影響及其可能機(jī)制18-23
• 3.1 高原低氧環(huán)境對(duì)腸道黏膜的影響18-20
• 3.1.1 高原環(huán)境對(duì)腸道功能的影響18
• 3.1.2 高原缺氧與腸黏膜屏障功能的關(guān)系18-19
• 3.1.3 高原低氧影響腸黏膜屏障功能的可能機(jī)制19-20
• 3.2 運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)腸道黏膜的影響20-22
• 3.2.1 運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)腸道黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響20
• 3.2.2 運(yùn)動(dòng)性胃腸易激綜合癥20-21
• 3.2.3 不同強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)腸道黏膜屏障功能的影響21-22
• 3.3 高原訓(xùn)練對(duì)腸黏膜屏障的影響機(jī)制22-23
• 4 丙氨酰谷氨酰胺與谷氨酰胺概況23-27
• 4.1 丙氨酰谷氨酰胺的特點(diǎn)及功能23-24
• 4.1.1 丙氨酰谷氨酰胺的特點(diǎn)23
• 4.1.2 Aln-Gln對(duì)腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響23-24
• 4.1.3 Aln-Gln對(duì)腸黏膜屏障功能的影響24
• 4.2 谷氨酰胺24-25
• 4.2.1 Gin的生理功能24
• 4.2.2 運(yùn)動(dòng)與Gln的關(guān)系24-25
• 4.3 谷氨酰胺對(duì)腸屏障功能的保護(hù)作用25-27
• 4.3.1 谷氨酰胺對(duì)腸道結(jié)構(gòu)功能的影響26
• 4.3.2 谷氨酰胺對(duì)腸黏膜屏障功能的保護(hù)機(jī)制26-27
• 4.4 高原訓(xùn)練后補(bǔ)充谷氨酰胺對(duì)腸黏膜功能的影響27
• 5 小結(jié)27-28
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究28-69
• 1 前言28-29
• 2 材料與方法29-37
• 2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與飼養(yǎng)29
• 2.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象分組29
• 2.3 訓(xùn)練方案29-30
• 2.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器30-31
• 2.5 實(shí)驗(yàn)取材以及樣本處理31
• 2.6 指標(biāo)的測(cè)定31-36
• 2.6.1 回腸組織石蠟切片的制備31
• 2.6.2 回腸組織透射電鏡切片的制作31-32
• 2.6.3 大鼠回腸組織occludin的檢測(cè)32-35
• 2.6.4 腸組織蛋白總量測(cè)定35
• 2.6.5 血漿中D-乳酸、DAO以及小腸組織中NF-κB、TNF-α的含量測(cè)定35-36
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析36-37
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-61
• 3.1 實(shí)驗(yàn)大鼠的一般表現(xiàn)及體重變化37-38
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)大鼠的一般表現(xiàn)37
• 3.1.2 大鼠的體重變化37-38
• 3.2 大鼠小腸絨毛高度和數(shù)量的變化38-42
• 3.2.1 大鼠小腸絨毛數(shù)量的變化38-40
• 3.2.2 大鼠小腸絨毛高度40-42
• 3.3 腸道黏膜形態(tài)學(xué)變化42-46
• 3.3.1 第3周大鼠小腸黏膜形態(tài)學(xué)變化42-44
• 3.3.2 第7周大鼠小腸黏膜形態(tài)學(xué)變化44-46
• 3.4 腸道黏膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化46-52
• 3.5 大鼠血漿DAO、D-乳酸含量的變化52-55
• 3.5.1 大鼠血漿DAO含量52-53
• 3.5.2 大鼠血漿D-乳酸含量53-55
• 3.6 大鼠小腸組織TNF-α、NF-κB含量以及occludin mRNA表達(dá)的變化55-61
• 3.6.1 大鼠小腸組織中occludin mRNA表達(dá)的變化55-57
• 3.6.2 大鼠腸組織中TNF-α的含量57-59
• 3.6.3 大鼠腸組織中NF-κB的含量59-61
• 4 討論與分析61-68
• 4.1 低氧和大負(fù)荷訓(xùn)練對(duì)大鼠腸道黏膜屏障功能的影響61-65
• 4.1.1 低氧和大負(fù)荷訓(xùn)練對(duì)大鼠小腸形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)的影響61-62
• 4.1.2 低氧和大負(fù)荷訓(xùn)練對(duì)大鼠血漿DAO及血漿D-乳酸含量的影響62-63
• 4.1.3 低氧和大負(fù)荷訓(xùn)練對(duì)大鼠小腸occludin mRNA活性的影響63-65
• 4.2 補(bǔ)充谷氨酰胺及其二肽對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠腸道黏膜屏障功能的影響65-67
• 4.2.1 Gin對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠腸道黏膜屏障功能的影響65
• 4.2.2 Ala-Gln對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠腸道黏膜屏障功能的影響65-66
• 4.2.3 Gin與Ala-Gln對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠腸道黏膜屏障功能干預(yù)效果比較66-67
• 4.3 補(bǔ)充谷氨酰胺及其二肽對(duì)小腸黏膜屏障的可能保護(hù)機(jī)制67-68
• 5 結(jié)論68-69
• 參考文獻(xiàn)69-79
• 致謝79-80
• 攻讀學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目和發(fā)表論文80-81

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本文編號(hào)：762230