本文關(guān)鍵詞：基于NADPH氧化酶途徑的運(yùn)動(dòng)性蛋白尿機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： NADPH氧化酶 運(yùn)動(dòng)性蛋白尿 活性氧 過(guò)氧亞硝基陰離子 一氧化氮 足細(xì)胞 nephrin

【摘要】：研究目的：運(yùn)動(dòng)氧應(yīng)激是運(yùn)動(dòng)性蛋白尿產(chǎn)生的重要原因,但運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的腎臟活性氧的來(lái)源及其作用機(jī)制尚不清楚。以大鼠力竭性跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)為模型,并為大鼠尾部注射NADPH氧化酶抑制劑apocynin,研究運(yùn)動(dòng)性蛋白尿產(chǎn)生的機(jī)制。并根據(jù)力竭運(yùn)動(dòng)后大鼠腎組織形態(tài)和足細(xì)胞裂孔蛋白nephrin的變化,進(jìn)一步探索蛋白尿形成的機(jī)制。研究方法：實(shí)驗(yàn)一：32只SD雄性大鼠隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(C組)、對(duì)照+藥物組(CA組)、力竭運(yùn)動(dòng)組(E組)、力竭運(yùn)動(dòng)+藥物組(EA組),每組8只。藥物注射按10mg/kg體重,每天一次,連續(xù)三天,并在EA組末次藥物注射一小時(shí)后進(jìn)行一次性力竭運(yùn)動(dòng)。測(cè)定運(yùn)動(dòng)后尿UP、血液BUN水平、腎臟ROS濃度、NOS活性、NOS與3-NT蛋白表達(dá)。實(shí)驗(yàn)二：14只SD雄性大鼠隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(C組)、力竭運(yùn)動(dòng)組(E組),每組七只。連續(xù)三天力竭性運(yùn)動(dòng),以20m/min開始,坡度5%,5min；逐漸增加至24m/min,坡度10%,直到力竭。測(cè)定運(yùn)動(dòng)后尿UP、尿液尿酸、尿液葡萄糖、血液尿酸、血液葡糖糖、血BUN、腎臟ROS濃度、腎臟iNOS、3-NT、NOX4和nephrin蛋白表達(dá)、腎組織形態(tài)變化。研究結(jié)果：實(shí)驗(yàn)一：(1)一次性力竭運(yùn)動(dòng)后,E組大鼠尿蛋白含量較C組相比有顯著性升高(P0.01),EA組與E組相比下降明顯(P0.05),E組、EA組血液BUN也顯著升高。(2)一次性力竭運(yùn)動(dòng)后,E組腎組織ROS生成量與C組相比明顯升高(P0.05),EA組較E組ROS生成量亦顯著性降低(P0.05)。(3)E組和EA組腎iNOS活性較C組明顯增高(P0.05),而nNOS和eNOS的活性未見變化。同時(shí),也僅見E組和EA組腎iNOS蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05),而nNOS和eNOS未見變化。(4)E組較C組腎3-NT生成量顯著增高(P0.01),而EA組與E組相比明顯降低(P0.05)。實(shí)驗(yàn)二：(1)力竭運(yùn)動(dòng)后,E組大鼠尿液較C組相比尿蛋白(P0.01)、尿酸(P0.01)、尿糖(P0.05)含量明顯增高。(2)力竭運(yùn)動(dòng)后,E組大鼠血清尿酸、血BUN水平明顯升高(P0.01)、血糖(P0.01)含量顯著性降低。(3)力竭運(yùn)動(dòng)后,E組大鼠腎臟ROS較C組相比明顯身高(P0.01)。(4)力竭運(yùn)動(dòng)后,E組大鼠腎組織iNOS、3-NT含量明顯升高(P0.01),nephrin蛋白表達(dá)明顯降低(P0.05)(5)腎組織蘇木精染色發(fā)現(xiàn),C組大鼠腎小球形態(tài)正常均勻,排列規(guī)則,E組大鼠可見腎小球球體肥大,腎小球形態(tài)改變且分布減少,毛細(xì)血管基底膜增厚,系膜基質(zhì)增生。研究結(jié)論：(1)力竭運(yùn)動(dòng)可明顯增加大鼠尿蛋白、BUN、尿酸及尿液尿糖水平,同時(shí)降低血糖含量。(2)力竭運(yùn)動(dòng)可明顯增加大鼠腎組織NADPH氧化酶活性,并產(chǎn)生大量O2-,通過(guò)注射apocynin可明顯抑制該酶活性。(3)力竭運(yùn)動(dòng)可明顯增加腎組織iNOS活性和蛋白表達(dá)。(4)力竭運(yùn)動(dòng)后,腎組織3-NT表達(dá)明顯增高,推測(cè)是力竭運(yùn)動(dòng)所致NADPH氧化酶途徑的02.產(chǎn)生增加,大量的02-.與NO反應(yīng)生成ONOO-(5)力竭運(yùn)動(dòng)可誘導(dǎo)腎組織足細(xì)胞裂孔蛋白nephrin蛋白表達(dá)減少,提示力竭運(yùn)動(dòng)可改變大鼠腎組織濾過(guò)結(jié)構(gòu)。(6)顯微鏡觀察到力竭運(yùn)動(dòng)后大鼠腎組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損,濾過(guò)屏障受破壞,進(jìn)而我們推測(cè)力竭運(yùn)動(dòng)可通過(guò)增加大鼠腎組織ONOO濃度,誘導(dǎo)足細(xì)胞裂孔蛋白nephrin表達(dá)降低,導(dǎo)致腎濾過(guò)功能結(jié)構(gòu)改變,從而引發(fā)運(yùn)動(dòng)性蛋白尿的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：NADPH氧化酶 運(yùn)動(dòng)性蛋白尿 活性氧 過(guò)氧亞硝基陰離子 一氧化氮 足細(xì)胞 nephrin
【學(xué)位授予單位】：湖南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：G804.2
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-14
• 縮略詞14-15
• 第1章 緒論15-25
• 1.1 運(yùn)動(dòng)性蛋白尿概述15-17
• 1.1.1 運(yùn)動(dòng)性蛋白尿簡(jiǎn)介15
• 1.1.2 運(yùn)動(dòng)性蛋白尿在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中的研究進(jìn)展15-16
• 1.1.3 運(yùn)動(dòng)性蛋白尿的形成機(jī)制16-17
• 1.2 力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)腎組織損傷的研究進(jìn)展17-19
• 1.2.1 力竭運(yùn)動(dòng)與腎組織結(jié)構(gòu)損傷18
• 1.2.2 力竭運(yùn)動(dòng)與腎組織功能損傷18-19
• 1.2.3 力竭運(yùn)動(dòng)與腎組織細(xì)胞凋亡19
• 1.3 NADPH氧化酶的研究進(jìn)展19-22
• 1.3.1 NADPH氧化酶的分子構(gòu)成19-20
• 1.3.2 NADPH氧化酶的活性及其抑制劑apocynin的研究進(jìn)展20-21
• 1.3.3 運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)腎組織NADPH氧化酶途徑的ONOO-的研究進(jìn)展21-22
• 1.4 腎組織結(jié)構(gòu)損傷的研究進(jìn)展22-24
• 1.4.1 腎裂孔膜損傷的病理性研究進(jìn)展23
• 1.4.2 運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的腎裂孔膜損傷的研究進(jìn)展23-24
• 1.5 本文構(gòu)想24-25
• 第2章 NADPH氧化酶途徑的運(yùn)動(dòng)性蛋白尿的研究25-39
• 2.1 引言25
• 2.2 材料與方法25-30
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物25
• 2.2.2 運(yùn)動(dòng)分組、運(yùn)動(dòng)方案、藥物方案25-26
• 2.2.3 樣本的采集與處理26-27
• 2.2.4 指標(biāo)測(cè)定27-30
• 2.2.5 主要實(shí)驗(yàn)儀器30
• 2.2.6 數(shù)據(jù)分析30
• 2.3 NADPH氧化酶途徑的大鼠蛋白尿?qū)嶒?yàn)結(jié)果30-34
• 2.3.1 運(yùn)動(dòng)負(fù)荷相關(guān)指標(biāo)30-32
• 2.3.2 腎組織ROS變化32
• 2.3.3 腎組織NOS的變化32-33
• 2.3.4 腎ONOO-的變化33-34
• 2.4 NADPH氧化酶途徑的運(yùn)動(dòng)性蛋白尿生成機(jī)制的討論34-38
• 2.4.1 一次性力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠UP及BUN的影響34-35
• 2.4.2 腎組織ROS的變化35-36
• 2.4.3 腎組織ONOO~-的變化36-38
• 2.5 本章小結(jié)38-39
• 第3章 力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠腎臟裂孔膜蛋白nephrin的影響39-54
• 3.1 引言39-40
• 3.2 材料與方法40-44
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物40
• 3.2.2 運(yùn)動(dòng)分組、運(yùn)動(dòng)方案40
• 3.2.3 樣本的采集與處理40-41
• 3.2.4 指標(biāo)測(cè)定41-43
• 3.2.5 主要實(shí)驗(yàn)儀器43-44
• 3.2.6 數(shù)據(jù)分析44
• 3.3 力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠腎臟裂孔膜蛋白nephrin影響的結(jié)果分析44-49
• 3.3.1 運(yùn)動(dòng)負(fù)荷相關(guān)指標(biāo)44-46
• 3.3.2 腎組織ROS、NOX4變化46-47
• 3.3.3 腎組織iNOS蛋白含量47
• 3.3.4 腎組織3-NT蛋白表達(dá)47-48
• 3.3.5 腎組織nephrin蛋白表達(dá)48
• 3.3.6 各組大鼠腎組織冷凍切片48-49
• 3.4 力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠腎臟裂孔膜蛋白nephrin影響的討論49-53
• 3.4.1 力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠血、尿生化指標(biāo)的影響49-50
• 3.4.2 腎組織ROS含量及NOX4蛋白表達(dá)的變化50-51
• 3.4.3 腎組織iNOS蛋白表達(dá)的變化51
• 3.4.4 腎組織3-NT蛋白表達(dá)的變化51-52
• 3.4.5 腎組織nephrin蛋白表達(dá)的變化52-53
• 3.4.6 腎組織形態(tài)變化53
• 3.5 本章小結(jié)53-54
• 結(jié)論54-55
• 參考文獻(xiàn)55-62
• 附錄A 攻讀學(xué)位期間所發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄62-63
• 致謝63

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本文編號(hào)：647567