本文關(guān)鍵詞：CETP基因rs708272與運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)血脂效果的關(guān)聯(lián)性研究

  更多相關(guān)文章： CETP 基因多態(tài)性 血脂 運(yùn)動(dòng)減脂 分子機(jī)制

【摘要】：目的：探討CETP基因rs708272多態(tài)位點(diǎn)與運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)肥胖青少年血脂效果的關(guān)聯(lián)性,并通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)研究其分子調(diào)控機(jī)理,闡明不同等位基因在表達(dá)調(diào)控上的作用。對(duì)象和方法：(1)對(duì)象：50名中國(guó)北方肥胖青少年,平均年齡14.9±3.35歲。其中,男生23人,女生27人,均知情同意；(2)方法：受試者進(jìn)行為期一個(gè)月的運(yùn)動(dòng)減脂實(shí)驗(yàn),以有氧運(yùn)動(dòng)為主,輔以力量和拉伸訓(xùn)練,統(tǒng)一飲食。于實(shí)驗(yàn)前后取空腹肘靜脈血測(cè)定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C等4個(gè)指標(biāo),用PCR-RFLP法對(duì)CETP基因rs708272位點(diǎn)進(jìn)行分型,觀察rs708272位點(diǎn)與肥胖青少年運(yùn)動(dòng)降血脂效果的關(guān)聯(lián)性；以CETP基因rs708272位點(diǎn)為B1B1型純合子的基因組DNA為模板,通過(guò)PCR獲得野生型和突變型兩個(gè)片段,分別插入到pGL3-Promoter中構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞后檢測(cè)重組質(zhì)粒中熒光素酶報(bào)告基因的相對(duì)表達(dá)活性。結(jié)果：(1)50名肥胖青少年的CETP基因rs708272位點(diǎn)分布特征是：B1B1基因型頻率為0.26,B1B2基因型頻率為0.56,B2B2基因型頻率為0.18,符合H-W平衡,具有群體代表性；(2)經(jīng)過(guò)一個(gè)月的運(yùn)動(dòng)減脂,B1B2基因型組血清△TC(0.64±0.51 mmol/L)、△LDL-C(0.51±0.41 mmol/L)顯著大于B1B1基因型組(△TC: 0.20±0.53 mmol/L; △LDL-C:0.24±0.35 mmol/L); B2B2基因型組(-0.10±0.15 mmol/L)和B1B1基因型組(-0.18±0.26 mmol/L)血清△HDL-C顯著小于B1B2基因型組(0.03±0.16mmol/L);(3)兩個(gè)重組載體中報(bào)告基因的活性顯著高于對(duì)照組載體pGL3-Promoter (3.78±0.11),并且CETP基因rs708272位點(diǎn)為B2等位基因的重組載體中報(bào)告基因相對(duì)活性(31.19±1.50)顯著高于B1等位基因(11.40±0.26)。結(jié)論：(1)CETP基因rs708272位點(diǎn)為B2等位基因的肥胖青少年對(duì)本研究制定的運(yùn)動(dòng)計(jì)劃更加敏感；(2) CETP基因第一內(nèi)含子對(duì)基因表達(dá)具有正向調(diào)控作用,并且rs708272位點(diǎn)處由B1→B2的突變是功能性突變,能顯著提高CETP基因的表達(dá)活性。
【關(guān)鍵詞】：CETP 基因多態(tài)性 血脂 運(yùn)動(dòng)減脂 分子機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：北京體育大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：G804.7
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 前言10-11
• 1 文獻(xiàn)綜述 膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因rs708272多態(tài)性的研究進(jìn)展11-23
• 1.1 內(nèi)含子的定義及位置11-12
• 1.2 內(nèi)含子的分類12-13
• 1.3 內(nèi)含子在基因表達(dá)調(diào)控中的作用13-14
• 1.3.1 內(nèi)含子對(duì)基因表達(dá)的正調(diào)控作用13-14
• 1.3.2 內(nèi)含子對(duì)基因表達(dá)的負(fù)調(diào)控作用14
• 1.4 內(nèi)含子多態(tài)性的研究現(xiàn)狀14-15
• 1.5 CETP基因的結(jié)構(gòu)和功能15-18
• 1.6 CETP基因多態(tài)位點(diǎn)18-20
• 1.7 CETP基因rs708272多態(tài)性研究現(xiàn)狀20-22
• 1.8 小結(jié)22-23
• 2 研究對(duì)象與方法23-42
• 2.1 研究對(duì)象23
• 2.2 訓(xùn)練計(jì)劃23
• 2.3 測(cè)試指標(biāo)23
• 2.4 主要試劑23-24
• 2.5 主要試劑配制24-25
• 2.6 菌株和細(xì)胞株25
• 2.7 主要儀器25-26
• 2.8 基因提取及分型26-28
• 2.8.1 基因組提取26-27
• 2.8.2 膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白rs708272位點(diǎn)多態(tài)性分析27-28
• 2.9 膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白rs708272位點(diǎn)的功能分析28-42
• 2.9.1 CETP基因第一內(nèi)含子序列擴(kuò)增28-30
• 2.9.2 CETP基因rs708272位點(diǎn)突變30-33
• 2.9.3 雙酶切33-34
• 2.9.4 目的片段與表達(dá)載體連接34
• 2.9.5 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化34-35
• 2.9.6 重組質(zhì)粒的提取與鑒定35-36
• 2.9.7 細(xì)胞培養(yǎng)36-37
• 2.9.8 細(xì)胞轉(zhuǎn)染37-41
• 2.9.9 雙熒光素酶報(bào)告基因表達(dá)檢測(cè)41-42
• 2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析42
• 3 結(jié)果42-56
• 3.1 CETP基因rs708272多態(tài)性與減脂訓(xùn)練效果的關(guān)聯(lián)性42-48
• 3.1.1 CETP基因rs708272位點(diǎn)PCR擴(kuò)增結(jié)果42-43
• 3.1.2 CETP基因rs708272位點(diǎn)分型結(jié)果43-44
• 3.1.3 CETP基因rs708272多態(tài)性分布特征44
• 3.1.4 CETP基因rs708272多態(tài)性與TC、TG、LDL-C、HDL-C的關(guān)聯(lián)性44-48
• 3.2 CETP基因rs708272位點(diǎn)的功能研究結(jié)果48-56
• 3.2.1 CETP基因第一內(nèi)含子的擴(kuò)增結(jié)果48-49
• 3.2.2 CETP基因rs708272位點(diǎn)突變結(jié)果49-51
• 3.2.3 雙酶切結(jié)果51-52
• 3.2.4 重組質(zhì)粒的鑒定52-53
• 3.2.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染53-55
• 3.2.6 雙熒光素酶報(bào)告基因表達(dá)活性檢測(cè)55-56
• 4 分析與討論56-61
• 4.1 CETP基因rs708272多態(tài)性的分布特征56-57
• 4.2 CETP基因rs708272多態(tài)性與運(yùn)動(dòng)減脂訓(xùn)練敏感性的關(guān)聯(lián)分析57-59
• 4.3 內(nèi)含子的調(diào)控功能59-60
• 4.4 不同等位基因調(diào)控功能的差異60-61
• 5 結(jié)論61-62
• 致謝62-63
• 參考文獻(xiàn)63-72
• 附錄72-77
• 1 中英文對(duì)照表72-73
• 2 訓(xùn)練計(jì)劃73-74
• 3 食譜74-75
• 4 知情同意書(shū)75-77
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷 在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果77

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：591098