本文關(guān)鍵詞：CETP基因rs708272與運動調(diào)節(jié)血脂效果的關(guān)聯(lián)性研究

  更多相關(guān)文章： CETP 基因多態(tài)性 血脂 運動減脂 分子機(jī)制

【摘要】：目的：探討CETP基因rs708272多態(tài)位點與運動調(diào)節(jié)肥胖青少年血脂效果的關(guān)聯(lián)性,并通過雙熒光素酶報告系統(tǒng)研究其分子調(diào)控機(jī)理,闡明不同等位基因在表達(dá)調(diào)控上的作用。對象和方法：(1)對象：50名中國北方肥胖青少年,平均年齡14.9±3.35歲。其中,男生23人,女生27人,均知情同意；(2)方法：受試者進(jìn)行為期一個月的運動減脂實驗,以有氧運動為主,輔以力量和拉伸訓(xùn)練,統(tǒng)一飲食。于實驗前后取空腹肘靜脈血測定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C等4個指標(biāo),用PCR-RFLP法對CETP基因rs708272位點進(jìn)行分型,觀察rs708272位點與肥胖青少年運動降血脂效果的關(guān)聯(lián)性；以CETP基因rs708272位點為B1B1型純合子的基因組DNA為模板,通過PCR獲得野生型和突變型兩個片段,分別插入到pGL3-Promoter中構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞后檢測重組質(zhì)粒中熒光素酶報告基因的相對表達(dá)活性。結(jié)果：(1)50名肥胖青少年的CETP基因rs708272位點分布特征是：B1B1基因型頻率為0.26,B1B2基因型頻率為0.56,B2B2基因型頻率為0.18,符合H-W平衡,具有群體代表性；(2)經(jīng)過一個月的運動減脂,B1B2基因型組血清△TC(0.64±0.51 mmol/L)、△LDL-C(0.51±0.41 mmol/L)顯著大于B1B1基因型組(△TC: 0.20±0.53 mmol/L; △LDL-C:0.24±0.35 mmol/L); B2B2基因型組(-0.10±0.15 mmol/L)和B1B1基因型組(-0.18±0.26 mmol/L)血清△HDL-C顯著小于B1B2基因型組(0.03±0.16mmol/L);(3)兩個重組載體中報告基因的活性顯著高于對照組載體pGL3-Promoter (3.78±0.11),并且CETP基因rs708272位點為B2等位基因的重組載體中報告基因相對活性(31.19±1.50)顯著高于B1等位基因(11.40±0.26)。結(jié)論：(1)CETP基因rs708272位點為B2等位基因的肥胖青少年對本研究制定的運動計劃更加敏感；(2) CETP基因第一內(nèi)含子對基因表達(dá)具有正向調(diào)控作用,并且rs708272位點處由B1→B2的突變是功能性突變,能顯著提高CETP基因的表達(dá)活性。
【關(guān)鍵詞】：CETP 基因多態(tài)性 血脂 運動減脂 分子機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：北京體育大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：G804.7
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 前言10-11
• 1 文獻(xiàn)綜述 膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白基因rs708272多態(tài)性的研究進(jìn)展11-23
• 1.1 內(nèi)含子的定義及位置11-12
• 1.2 內(nèi)含子的分類12-13
• 1.3 內(nèi)含子在基因表達(dá)調(diào)控中的作用13-14
• 1.3.1 內(nèi)含子對基因表達(dá)的正調(diào)控作用13-14
• 1.3.2 內(nèi)含子對基因表達(dá)的負(fù)調(diào)控作用14
• 1.4 內(nèi)含子多態(tài)性的研究現(xiàn)狀14-15
• 1.5 CETP基因的結(jié)構(gòu)和功能15-18
• 1.6 CETP基因多態(tài)位點18-20
• 1.7 CETP基因rs708272多態(tài)性研究現(xiàn)狀20-22
• 1.8 小結(jié)22-23
• 2 研究對象與方法23-42
• 2.1 研究對象23
• 2.2 訓(xùn)練計劃23
• 2.3 測試指標(biāo)23
• 2.4 主要試劑23-24
• 2.5 主要試劑配制24-25
• 2.6 菌株和細(xì)胞株25
• 2.7 主要儀器25-26
• 2.8 基因提取及分型26-28
• 2.8.1 基因組提取26-27
• 2.8.2 膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白rs708272位點多態(tài)性分析27-28
• 2.9 膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白rs708272位點的功能分析28-42
• 2.9.1 CETP基因第一內(nèi)含子序列擴(kuò)增28-30
• 2.9.2 CETP基因rs708272位點突變30-33
• 2.9.3 雙酶切33-34
• 2.9.4 目的片段與表達(dá)載體連接34
• 2.9.5 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化34-35
• 2.9.6 重組質(zhì)粒的提取與鑒定35-36
• 2.9.7 細(xì)胞培養(yǎng)36-37
• 2.9.8 細(xì)胞轉(zhuǎn)染37-41
• 2.9.9 雙熒光素酶報告基因表達(dá)檢測41-42
• 2.10 統(tǒng)計學(xué)分析42
• 3 結(jié)果42-56
• 3.1 CETP基因rs708272多態(tài)性與減脂訓(xùn)練效果的關(guān)聯(lián)性42-48
• 3.1.1 CETP基因rs708272位點PCR擴(kuò)增結(jié)果42-43
• 3.1.2 CETP基因rs708272位點分型結(jié)果43-44
• 3.1.3 CETP基因rs708272多態(tài)性分布特征44
• 3.1.4 CETP基因rs708272多態(tài)性與TC、TG、LDL-C、HDL-C的關(guān)聯(lián)性44-48
• 3.2 CETP基因rs708272位點的功能研究結(jié)果48-56
• 3.2.1 CETP基因第一內(nèi)含子的擴(kuò)增結(jié)果48-49
• 3.2.2 CETP基因rs708272位點突變結(jié)果49-51
• 3.2.3 雙酶切結(jié)果51-52
• 3.2.4 重組質(zhì)粒的鑒定52-53
• 3.2.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染53-55
• 3.2.6 雙熒光素酶報告基因表達(dá)活性檢測55-56
• 4 分析與討論56-61
• 4.1 CETP基因rs708272多態(tài)性的分布特征56-57
• 4.2 CETP基因rs708272多態(tài)性與運動減脂訓(xùn)練敏感性的關(guān)聯(lián)分析57-59
• 4.3 內(nèi)含子的調(diào)控功能59-60
• 4.4 不同等位基因調(diào)控功能的差異60-61
• 5 結(jié)論61-62
• 致謝62-63
• 參考文獻(xiàn)63-72
• 附錄72-77
• 1 中英文對照表72-73
• 2 訓(xùn)練計劃73-74
• 3 食譜74-75
• 4 知情同意書75-77
• 個人簡歷 在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果77

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 阮孟斌;于曉玲;彭明;;棉花蔗糖合成酶3基因第1個內(nèi)含子在基因表達(dá)中的作用[J];熱帶生物學(xué)報;2011年04期

2 宋利山;有氧運動對高密度脂蛋白代謝的影響[J];湖北體育科技;2005年03期

3 張靜;王思涵;楊印祥;姚海雷;陳琳;呂洋;南雪;岳文;李艷華;裴雪濤;;內(nèi)含子序列對CART基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用的初步研究[J];軍事醫(yī)學(xué);2011年04期

4 王悅冰;郎志宏;張杰;何康來;宋福平;黃大f ;;利用ubi1內(nèi)含子增強(qiáng)Bt cry1Ah基因在轉(zhuǎn)基因玉米中的表達(dá)[J];科學(xué)通報;2008年17期

5 朱燕林,嚴(yán)曉偉,鄢盛愷,朱文玲;膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白基因多態(tài)性與血脂的研究[J];中華老年心腦血管病雜志;2004年01期

6 李蕾,陳文鶴;肥胖癥與運動減肥的研究進(jìn)展[J];沈陽體育學(xué)院學(xué)報;2005年03期

7 趙斐,張勇;有氧運動改善飲食性高脂血癥分子機(jī)理的研究Ⅰ——有氧游泳運動對高脂血癥大鼠血清脂質(zhì)、脂蛋白和載脂蛋白水平的影響[J];天津體育學(xué)院學(xué)報;2000年01期

8 張坤;王玉;張永珍;石峰;王靜;;有氧運動減肥處方的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2009年01期

9 劉桂蘭,蔣思文,熊遠(yuǎn)著,鄭嶸,屈彥純;IGF2基因PCR-RFLP多態(tài)性與脂肪沉積相關(guān)性狀的關(guān)聯(lián)分析[J];遺傳學(xué)報;2003年12期

10 李華,王吉貴,劉維全,王蘋,董婉維,齊順章;第一內(nèi)含子對人胰島素基因在BHK細(xì)胞中表達(dá)的影響[J];中國實驗動物學(xué)雜志;2002年05期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張培珍;血脂異常的中老年人調(diào)脂運動處方的研究[D];北京體育大學(xué);2004年

2 王正珍;有氧運動對糖調(diào)節(jié)受損人群胰島素敏感性影響效果的研究[D];北京體育大學(xué);2006年

3 徐安莉;腎陽虛對實驗大鼠血脂的影響及其機(jī)制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2014年

，

本文編號：591098