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游泳運(yùn)動對TGF-β1轉(zhuǎn)基因小鼠空間認(rèn)知能力影響及可能調(diào)控機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-31 14:40
  適量運(yùn)動改善人和嚙齒類動物的學(xué)習(xí)記憶能力已被證實(shí),但不同強(qiáng)度的運(yùn)動對學(xué)習(xí)記憶將會產(chǎn)生不同影響。有文獻(xiàn)提出游泳運(yùn)動對學(xué)習(xí)記憶功能有一定的影響,本實(shí)驗(yàn)室相關(guān)研究也表明大鼠在不同強(qiáng)度游泳訓(xùn)練模型下,TGF-β1因子在海馬組織中的表達(dá)量有差異性。在此基礎(chǔ)上,本研究將初步探討影響小鼠學(xué)習(xí)記憶提高的最適負(fù)重及TGF-β1因子在運(yùn)動促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶功能改善中發(fā)揮的作用。本研究選取C57BL/6J品系的3月齡雄性小鼠,TGF-β1低表達(dá)轉(zhuǎn)基因組和野生型組各21只作為研究對象,兩組內(nèi)分別分為對照組,無負(fù)重游泳訓(xùn)練組,1%負(fù)重游泳訓(xùn)練組各7只。所有小鼠適應(yīng)性訓(xùn)練一周,對照組常規(guī)飼養(yǎng)8周不進(jìn)行游泳訓(xùn)練;游泳組堅(jiān)持為期8周的負(fù)重游泳訓(xùn)練,30min/6d/1w。試驗(yàn)完成后,采用Morris水迷宮對其進(jìn)行3天定向航行和1天空間探索能力檢測;并對海馬組織TGF-β1信號通路部分下游分子(PI3K、 AKT)基因表達(dá)水平進(jìn)行檢測,TGF-β1、PI3K、AKT蛋白及其磷酸化的表達(dá)水平進(jìn)行檢測。結(jié)果與分析:(1)Morris水迷宮定位檢測發(fā)現(xiàn):兩組小鼠潛伏期均顯示1%游泳負(fù)重組時(shí)間最短,與對照組對比有非常顯著性差異,P&... 

【文章來源】:云南師范大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

游泳運(yùn)動對TGF-β1轉(zhuǎn)基因小鼠空間認(rèn)知能力影響及可能調(diào)控機(jī)制研究


高鹽法提取鼠尾DNA,PCR檢測基因電泳條帶如3.1圖所示,左方條帶為mark條帶,TGF-β1基因條帶為490bp,在

示意圖,水迷宮,示意圖


3.3 主要試劑、儀器,配制與實(shí)驗(yàn)方法為學(xué)測試 MORISS 水迷宮(MWM)測試設(shè)備用 Digbehavior 動物行為分析系統(tǒng)、Morris 水迷宮視頻分量軟件科技有限公司提供。系統(tǒng)主要由水池、攝像頭和電腦組成(圖 3.1)。游泳池被第Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ4 象限),在池壁的東,南,西,北四水個(gè)不同的形狀被用來作為標(biāo)記,在中間的第三個(gè)象限安裝臺,高 38 厘米(即平臺),注水沒過平臺 2cm,水迷宮的。

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,灌膠,玻璃板


圖 3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制(2)SDS-PAGE 電泳調(diào)整樣品濃度至 10μg/μL 以下,每個(gè)樣品分裝吸取 40μL,加 10μL 5×loading buffer 置于 200ulEP 管中,吹打混勻,于沸水中變性 10min。瞬時(shí)離心 30 秒,-80℃保存。上樣前再次吹打混勻。沖洗玻璃板:一手扣緊玻璃板,另外一手蘸洗衣粉少許緩緩洗滌。自來水充分沖洗,雙蒸水沖洗干凈后晾干。灌膠與上樣:玻璃板對準(zhǔn)密封橡膠條后,從制膠架上豎卡;配制 10%分離膠:配制方法見試劑配制部分。加入 TEMED 后立即搖勻,用 1mL 加樣槍灌膠,每塊膠約 5mL。緩慢加雙蒸水液封;40min 后,當(dāng)水、膠之間出現(xiàn)清晰的折射線時(shí),倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。 配制 5%的濃縮膠:配制方法見試劑配制部分。加入 TEMED 后立即灌膠,每塊膠約需 2mL。將玻板空間灌滿后將梳子插入濃縮膠中;濃縮膠完全固化,雙手分別握住梳對垂直向上輕輕拔出。加足量的正負(fù)極電泳緩沖液,負(fù)極緩沖液沒過內(nèi)側(cè)玻璃板

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]游泳訓(xùn)練通過激活PI3K-Akt信號通路抑制2型糖尿病引起的心肌細(xì)胞凋亡[J]. 江紅軻.  湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào). 2012(03)
[2]PI3K/Akt/GSK-3β在去負(fù)荷及再負(fù)荷大鼠腓腸肌蛋白代謝中的作用[J]. 張飛鵬,吳金富,王晶.  北京體育大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(09)
[3]不同強(qiáng)度運(yùn)動對AMPKα2三種不同基因狀態(tài)鼠MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性的影響[J]. 龔豪杰,謝謹(jǐn),張楠,姚璐,張纓.  體育科學(xué). 2011(02)
[4]TGF-β對T細(xì)胞發(fā)育分化的影響與運(yùn)動性免疫抑制[J]. 張琳,郝選明.  中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志. 2011(01)
[5]低氧和低氧訓(xùn)練對AMPKα2轉(zhuǎn)基因小鼠骨骼肌CPT-1表達(dá)的影響[J]. 姚璐,謝謹(jǐn),李松波,張纓.  北京體育大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[6]中等強(qiáng)度運(yùn)動對大鼠海馬CA3區(qū)椎體細(xì)胞樹突棘數(shù)量的影響[J]. 王芳媛,劉恩芝,郭層城.  中國體育科技. 2009(02)
[7]游泳訓(xùn)練對大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力及海馬、紋狀體內(nèi)c-fos、c-jun mRNA表達(dá)的影響[J]. 張春美,徐波,楊毅飛.  中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志. 2008(08)
[8]腦靈湯對阿爾茨海默病模型大鼠TGF-β1表達(dá)的影響[J]. 蘇南湘,葛小平,何明大,王哲.  湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(04)
[9]Morris圓形水迷宮的應(yīng)用及其相關(guān)檢測指標(biāo)分析[J]. 陳羅西,郭玲玲,李亮.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(08)
[10]運(yùn)動影響學(xué)習(xí)與記憶能力的分子生物學(xué)機(jī)制[J]. 謝敏,褚昕宇,王澤軍.  中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志. 2008(02)

博士論文
[1]運(yùn)動對大鼠骨骼PI3K/AKt/mTor與MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響[D]. 曹師承.中國醫(yī)科大學(xué) 2007

碩士論文
[1]腦靈湯對阿爾海默病大鼠TGFβ1及TNFα的影響[D]. 葛小平.中南大學(xué) 2007
[2]體格鍛煉對毀損大鼠海馬后齒狀回神經(jīng)發(fā)生和學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制[D]. 陳琳.蘇州大學(xué) 2005



本文編號:3560435

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