發(fā)布時間：2020-08-07 17:59

【摘要】：研究目的:為探尋黑龍江省雪上項目運動員基因選材分子標記,本論文對我國單板坡面障礙、單板U型場地技巧、單板平行大回轉(zhuǎn)、單板追逐、北歐兩項和越野滑雪項目運動員ace基因I/D多態(tài)性、cntf基因A/G多態(tài)性和actn3基因R/X多態(tài)性的分布情況進行統(tǒng)計,根據(jù)實驗結(jié)果分析以上基因多態(tài)性與黑龍江省雪上項目運動員的專項運動能力是否存在關聯(lián),從而判斷能否將以上基因作為黑龍江省部分雪上項目運動員早期選材分子標記,為我國雪上項目運動員科學選材體系提供參考,同時為同類項群基因選材體系的完善提供更多基礎數(shù)據(jù)。研究方法:本研究依據(jù)雪上項目特點,將所選取的68名黑龍江省部分雪上項目優(yōu)秀運動員分成兩大類:雪上技巧型及雪上耐力型項目運動員;同時隨機抽取158名普通大學生作為對照組。采用聚合酶鏈式反應法對受試者的ace基因I/D多態(tài)性進行檢測,運用限制性片段長度多態(tài)技術(shù)對受試者的cntf基因A/G多態(tài)性和actn3基因R/X多態(tài)性進行檢測,得出不同組別此三種基因多態(tài)性頻率分布及等位基因頻率。對實驗結(jié)果進行遺傳學平衡定律檢驗,判斷所選取人群是否具有群體代表性。將實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,根據(jù)卡方檢驗結(jié)果判斷以上基因與所選取項目杰出運動能力是否存在關聯(lián),最終對以此三種基因作為黑龍江省部分雪上項目選材用分子標記的可行性進行分析。研究結(jié)果:1、本研究中各組ace基因I/D多態(tài)性、cntf基因A/G多態(tài)性、actn3基因R/X多態(tài)性分布均符合Hardy-Weinberg遺傳定律(P0.05),具有群體代表性,可用作群體樣本進行研究。2、各實驗組ace基因I/D多態(tài)性基因型及等位基因頻率分布在組間及與對照組的統(tǒng)計學對比中均無顯著性差異(P0.05)。但實驗結(jié)果顯示耐力型項目組II基因型頻率分布(40.91%)高于技巧型項目組(32.61%)和對照組(29.11%)。3、cntf基因A/G多態(tài)性在技巧型雪上項目組與對照組間、在單板坡面障礙與越野滑雪運動員間基因型頻率分布呈現(xiàn)顯著性差異(P0.05),等位基因頻率分布呈現(xiàn)極其顯著性差異(P0.01)。在單板坡面障礙與單板追逐運動員間呈現(xiàn)顯著性差異(P0.05);在單板坡面障礙與對照組間呈現(xiàn)極其顯著性差異(P0.01)。技巧項目組GG基因型頻率及G等位基因頻率(63.05%;75.00%)顯著高于耐力項目組(40.91%;59.09%)及對照組(38.61%;59.49%)。4、各實驗組actn3基因R/X多態(tài)性基因型及等位基因頻率分布在組間及與對照組的統(tǒng)計學對比中均無顯著性差異(P0.05),且分布極為相似。研究結(jié)論:1、不建議將ace基因I/D多態(tài)位點作為黑龍江省雪上項目基因選材分子標記參考指標,但不排除該基因II基因型與I等位基因與雪上耐力型項目相關的可能,應在后續(xù)研究中加大樣本量驗證。2、cntf基因A/G多態(tài)位點有作為黑龍江省部分技巧型雪上項目,特別是單板坡面障礙項目運動員基因選材分子標記的可能,該基因GG基因型及G等位基因與杰出爆發(fā)力素質(zhì)相關。3、不建議將actn3基因R/X多態(tài)位點作為黑龍江省雪上項目基因選材分子標記參考指標,但不排除該結(jié)果有實驗樣本量不足的影響,應在后續(xù)研究中加大樣本量,補充實驗數(shù)據(jù)。
【學位授予單位】：哈爾濱體育學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：G863
【圖文】：

4.1.1 ace 基因 I/D 多態(tài)性判斷ace 基因位于第 17 號染色體長臂 2 區(qū) 3 帶第 3 亞帶（17q23.3），全長為共有 26 個外顯子、25 個內(nèi)含子和兩個啟動子，其中外顯子 7 和外顯子 20 有的同源性，外顯子 8 和外顯子 21 有 68%的同源性，該信息提示 ace 基因有的可能[64]。同時 ace 基因具有高度多態(tài)性，目前已發(fā)現(xiàn)的多態(tài)標記就多達在這些多態(tài)標記中，針對第 16 內(nèi)含子存在的 287bpAlu 插入/缺失（I/D）片究的最多。由于 Alu 的插入或缺失，當目標片段經(jīng) PCR 擴增后再經(jīng)瓊脂糖凝膠電測，即可出現(xiàn)兩種不同長度的片段：490bp 的插入（I）片段和 190bp 的缺失片段；在紫外燈下可呈現(xiàn)出三種帶型：單一 490bp 條帶的 II 插入型、單一條帶的 DD 缺失型和有兩個條帶 490bp+190bp 的 ID 雜合型[33]。因此，ac在此多態(tài)位點可分為 DD、ID 和 II 三種不同的基因型。本研究部分 ace 基因多態(tài)性檢測結(jié)果如下（圖 4）：

ace、cntf、actn3 多態(tài)位點作為黑龍江省雪上項目運動員分子選材標記可行性研究94bp 和 40bp，定義為 G；而不含酶切位點的 134bp 片段即是 A 等位基因。該酶切產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后，在紫外燈下即可呈現(xiàn)出三種帶型：單一 134bp 條帶的 AA 純合型、94bp+40bp 兩條條帶的 GG 純合型、134bp+94bp+40bp 三條條帶的 AG 雜合型。因此，cntf 基因在此多態(tài)位點可分為 AA、AG 和 GG 三種不同的基因型。本研究部分 cntf 基因多態(tài)性檢測結(jié)果如下（圖 5）：

核苷酸有從 C 突變?yōu)?T 位點的可能。如果無突變發(fā)生，則為 RR 純合子；若點發(fā)生突變，則為 XX 突變純合型；若既有 C 又有 T 則為 RX 雜合型。在目標 DNA 中，加入根據(jù) actn3 基因特點及實驗目的所設計的引物后PCR 擴增，出現(xiàn)長度為 291bp 的 DNA 片段。如果為 RR 型，擴增出來的片有一個 Dde I 酶切位點；若帶有 1747C 到 T 突變，則會產(chǎn)生一個新的酶切actn3 基因 PCR 擴增片段經(jīng) Dde I 限制性內(nèi)切酶切割后，存在一個酶切位點被酶切反應切割為 205bp 和 86bp 兩種片段；存在兩個酶切位點的可被酶切切割為 108bp、97bp 和 86bp 三種片段。于是該酶切產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳在紫外燈下即可呈現(xiàn)出三種帶型：205bp+86bp 兩條條帶的 RR 純合108bp+97bp+86bp 三條條帶的 XX 純合型、205bp+108bp+97bp+86bp 四條條RX 雜合型。因此，actn3 基因在此多態(tài)位點可分為 RR、XX 和 RX 三種不基因型。本研究部分 actn3 基因多態(tài)性檢測結(jié)果如下（圖 6）：

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本文編號：2784329