本文選題：8-羥基鳥嘌呤 + 小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞��； 參考：《吉林大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：骨骼肌占人體體重的40%,其在運(yùn)動(dòng)、呼吸、動(dòng)作維持、體溫調(diào)節(jié)、代謝調(diào)節(jié)等功能中有著不可替代的作用。肌肉生成是一系列復(fù)雜而精細(xì)的過程,主要由四個(gè)方面,即活化肌肉干細(xì)胞、肌細(xì)胞增殖分化、形成肌細(xì)胞、細(xì)胞相互融合繼而形成多核的肌管。大負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)促使骨骼肌生成活性氧,其可促進(jìn)骨骼肌肌肉生成,但是直接的證據(jù)很少。本文探究運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的8-羥鳥嘌呤對(duì)小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞C2C12增值分化的影響。首先進(jìn)行分組訓(xùn)練,一組為安靜組,一組為進(jìn)行下坡跑運(yùn)動(dòng)的運(yùn)動(dòng)組,運(yùn)動(dòng)組保持其運(yùn)動(dòng)速度為16m/min,運(yùn)動(dòng)坡度為-16o,運(yùn)動(dòng)的時(shí)間為持續(xù)100分鐘運(yùn)動(dòng),5分鐘休息,再運(yùn)動(dòng)100分鐘,實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過免疫組化的方法,驗(yàn)證運(yùn)動(dòng)與氧化損傷的正相關(guān)性,在此基礎(chǔ)之上,基于C2C12增值分化模型,通過有無添加8-羥鳥嘌呤,建立刺激組和未加刺激組。顯微鏡觀察各時(shí)期細(xì)胞形態(tài),計(jì)算各時(shí)期細(xì)胞數(shù);通過實(shí)驗(yàn),檢測(cè)相關(guān)成肌分子MyoD、M-Cadherin和MyoG在mR NA方面的表達(dá)水平。通過研究得出以下結(jié)論:1.通過進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)組的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物骨骼肌產(chǎn)生大量的8-oxo G,表明大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)下,骨骼肌產(chǎn)生的運(yùn)動(dòng)損傷程度較為嚴(yán)重。2.通過對(duì)刺激組和未加刺激組的兩組細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、發(fā)現(xiàn)了刺激組和未加刺激組在細(xì)胞密度為80%時(shí),刺激組細(xì)胞產(chǎn)生的分裂相較之未加刺激組明顯增多(P0.01),這說明了運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的8-oxoG能明顯地促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞的增殖。3.通過對(duì)刺激組和未加刺激組的細(xì)胞進(jìn)行RT-PCR,發(fā)現(xiàn)了刺激組在加入刺激物8-oxoG后,對(duì)應(yīng)的三種成肌分子MyoD、M-Cadherin和MyoG的mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)(P0.05),這些說明了運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的8-oxoG對(duì)骨骼肌成肌細(xì)胞的分化具有顯著地促進(jìn)作用。
[Abstract]:Skeletal muscle accounts for 40% of body weight, which plays an irreplaceable role in the functions of exercise, respiration, movement maintenance, thermoregulation, metabolic regulation, and so on. Muscle generation is a series of complex and fine processes, which mainly consist of four aspects, namely, activating muscle stem cells, proliferating and differentiation of muscle cells, forming myocytes, and forming multicore cells to form each other. Myotubes. Heavy load movement causes skeletal muscle to produce reactive oxygen species, which can promote skeletal muscle formation, but there is little direct evidence. This article explores the effect of 8- hydroxyguanine on the C2C12 increment and differentiation of skeletal myoblasts in mice. First, group training, a group of quiet groups, and a group for downhill running In the dynamic group, the movement group keeps its speed of 16m/min, the motion slope is -16o, the time of the movement is 100 minutes, 5 minutes rest and then 100 minutes. The experimental results verify the positive correlation between the movement and the oxidative damage through the immunohistochemical method. On this basis, it is based on the C2C12 value-added differentiation model, through the addition of 8- hydroxyl birds Purine, set up the stimulation group and the non stimulation group. The cell morphology of each period was observed by microscope and the number of cells in each period was calculated. Through the experiment, the expression level of MyoD, M-Cadherin and MyoG in mR NA was detected. Through the study, the following conclusions were obtained: 1. by the immunohistochemical experiment, the skeletal muscle production of the experimental animals was found. A large number of 8-oxo G showed that the degree of motor damage caused by skeletal muscle was more serious under the heavy load movement, and.2. was counted by the cell count of two groups of cells in the stimulation group and the non stimulation group. It was found that when the cell density was 80% in the stimulation group and the non stimulation group, the cells produced by the stimulation group were significantly more than those in the non stimulation group (P0.01 This shows that the 8-oxoG produced by the exercise can obviously promote the proliferation of skeletal muscle cells through the RT-PCR of the cells in the stimulation group and the non stimulation group. It is found that after the stimulation of 8-oxoG, the corresponding three kinds of myoblasts, MyoD, M-Cadherin and MyoG, are obviously enhanced (P0.05). These indicate the 8-o of the movement generated 8-o. XoG has a significant effect on the differentiation of skeletal myoblasts.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：G804.2

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本文編號(hào)：2083328