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谷氨酰胺補(bǔ)充和電刺激對(duì)C2C12肌管蛋白合成通路的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-05-14 06:25

  本文選題:谷氨酰胺補(bǔ)充 + mTOR�。� 參考:《中國(guó)體育科技》2017年01期


【摘要】:目的:C2C12肌管為細(xì)胞模型,探討電刺激模擬運(yùn)動(dòng)與谷氨酰胺補(bǔ)充對(duì)C2C12肌管蛋白質(zhì)含量及mTOR通路的影響,進(jìn)一步探明谷氨酰胺補(bǔ)充與蛋白質(zhì)代謝之間的關(guān)系。方法:谷氨酰胺孵育分化5天的肌管48h后,給予一次電刺激(15 V,30ms,3Hz,90min)。分別在電刺激后0h、6h、18 h和24 h收樣。實(shí)驗(yàn)共10組,單獨(dú)對(duì)照組(Con);單獨(dú)谷氨酰胺組(Gln);單獨(dú)電刺激后不同時(shí)間點(diǎn)取樣組(Es0、Es6、Es18、Es24);谷氨酰胺孵育加電刺激后不同時(shí)間點(diǎn)取樣組(Gln+Es0、Gln+Es6、Gln+Es18、Gln+Es24)。BCA法測(cè)定各組肌管蛋白含量;RT-PCR法測(cè)定各組mTOR mRNA表達(dá)量及其下游因子S6K1 mRNA表達(dá)量。結(jié)果:1)與Con相比,Gln組的蛋白含量、mTOR及S6K1 mRNA均顯著升高(P0.05)。2)單獨(dú)電刺激(Es)后,隨收樣時(shí)間延長(zhǎng),肌管蛋白含量呈現(xiàn)先下降后上升趨勢(shì)。Es6極顯著下降(P0.01),Es18極顯著上升(P0.01)。而mTOR和S6K1 mRNA的表達(dá)沒(méi)有下降,呈現(xiàn)先上升后恢復(fù)正常的趨勢(shì)。3)谷氨酰胺和電刺激(Gln+Es)聯(lián)合作用后,無(wú)論是蛋白含量,還是mTOR及S6K1 mRNA表達(dá),具有與單獨(dú)電刺激相似的作用趨勢(shì),且Gln+Es各組數(shù)值均高于Es各組(P0.05)。此外,Es組mTOR表達(dá)在電刺激后18h達(dá)高峰,而Gln+Es組在6h達(dá)高峰。結(jié)論:1)單獨(dú)電刺激、單獨(dú)補(bǔ)充谷氨酰胺、兩者的聯(lián)合作用,均可通過(guò)mTOR通路中mTOR mRNA和S6K1 mRNA表達(dá)上升,增加蛋白合成,促進(jìn)蛋白含量上升及肌管恢復(fù)。2)谷氨酰胺使電刺激后C2C12肌管mTOR mRNA表達(dá)提前,S6K1mRNA表達(dá)穩(wěn)定處于高水平。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of simulated exercise and glutamine supplementation on the protein content and mTOR pathway in C2C12 myotubes and to explore the relationship between glutamine supplementation and protein metabolism. Methods: after incubation with glutamine for 5 days, myotubes were incubated for 48 hours. The samples were collected at 0 h, 6 h, 18 h and 24 h after electrical stimulation, respectively. There were 10 groups, The content of myotube protein in each group was determined by RT-PCR at different time points after single electrical stimulation. The content of myotube protein was determined by RT-PCR in the sampling group at different time points after incubation with glutamine and at different time points after electric stimulation. The content of myotube protein in each group was determined by RT-PCR with the method of Gln Es0Gln Es6Gln Es18Gln Es24).BCA after glutamine incubation and electrical stimulation. The expression of mTOR mRNA and its downstream factor S6K1 mRNA. Results compared with Con, the protein content of Con group was significantly higher than that of Con group (P 0.05N 路2). With the prolongation of collecting time, the content of myotube protein decreased first and then increased. Es6 decreased significantly (P 0.01) and Es18 increased significantly (P 0.01). However, the expression of mTOR and S6K1 mRNA did not decrease, showing a tendency of rising first and then returning to normal. After the combination of glutamine and Glutamine, the protein content, mTOR and S6K1 mRNA expression were similar to those of electrical stimulation alone. The values of Gln es in each group were higher than that in es group (P 0.05). In addition, the expression of mTOR reached the peak at 18 h after electrical stimulation and reached the peak at 6 h in Gln es group. ConclusionThe combined effects of single electrical stimulation and glutamine supplementation can increase the expression of mTOR mRNA and S6K1 mRNA in the mTOR pathway and increase the protein synthesis. Glutamine promoted the increase of protein content and the recovery of myotube. 2) Glutamine stabilized the expression of S6K1 mRNA at a high level after electrical stimulation in the myotube of C2C12.
【作者單位】: 暨南大學(xué)體育學(xué)院;華南師范大學(xué)體育科學(xué)學(xué)院;
【分類(lèi)號(hào)】:G804.32

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1886700

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