本文關鍵詞：妊娠期小鼠肝臟脂質(zhì)代謝特點以及高果糖飲食對其的影響

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【摘要】：目的探討妊娠晚期小鼠肝臟脂質(zhì)代謝變化特點以及妊娠對孕鼠肝臟脂肪酸合成、轉(zhuǎn)運和氧化相關基因表達和相應核受體的影響;探討妊娠期高果糖飲食對孕鼠肝臟脂質(zhì)代謝的影響及其機制。方法研究一:為觀察妊娠晚期小鼠肝臟脂質(zhì)代謝變化,將小鼠分為孕鼠及非孕鼠兩組,自由進食標準飼料,禁食9小時后于孕第17天(GD17)取材,檢測兩組小鼠空腹血糖值,血清及肝臟甘油三酯(TG)、膽固醇(TCH)、高密度脂蛋白(HDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)含量,用油紅O染色法檢測小鼠肝臟組織脂質(zhì)沉積情況;為進一步了解妊娠對肝臟脂肪酸合成、轉(zhuǎn)運和氧化的影響,使用q PCR技術及Western bloting技術檢測肝臟脂肪酸合成、轉(zhuǎn)運及氧化相關基因表達和核受體。研究二:為觀察高果糖飲食對妊娠晚期小鼠肝臟脂質(zhì)代謝的影響,將小鼠分為果糖孕鼠(FP)、普通孕鼠(CP)兩組,分別飲用果糖水溶液及普通自來水,喂養(yǎng)至受孕第18天(GD18)后剖殺,檢測血糖、血清甘油三酯(TG)、膽固醇(TCH)及肝臟甘油三酯(TG)、膽固醇(TCH)、高密度脂蛋白(HDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)含量,制備冰凍切片用于油紅O染色檢測小鼠肝臟組織脂質(zhì)沉積情況;為進一步了解高果糖飲食對妊娠期小鼠肝臟脂肪酸合成、轉(zhuǎn)運和氧化的影響,使用q PCR技術及Western bloting技術檢測肝臟脂肪酸合成、轉(zhuǎn)運及氧化相關基因表達和核受體。結果研究一:與非孕鼠相比,孕鼠血清TG水平明顯升高(1.04±0.38mmol/l,2.30±0.84mmol/l;P0.01),VLDL水平顯著上升(0.38±0.14mmol/l,0.85±0.31 mmol/l;P0.01)。提取兩組小鼠肝臟脂質(zhì)進行檢測,結果顯示孕鼠肝臟TG水平為156.67±27.06mmol/l,VLDL水平為6.77±1.00 mmol/l,非孕鼠血清TG水平為108.31±50.20mmol/l,VLDL水平為4.98±1.86mmol/l,兩組相比,孕鼠肝臟TG及VLDL水平均顯著上升,差異有統(tǒng)計學意義。油紅O染色顯示孕鼠肝臟脂質(zhì)沉積明顯。q PCR及Western bloting結果顯示,妊娠晚期小鼠肝臟孕烷X受體(PXR)核蛋白水平顯著上升,其靶基因肝臟脂肪酸轉(zhuǎn)位酶(cd36)m RNA水平顯著上調(diào);妊娠晚期小鼠肝臟核蛋白固醇調(diào)節(jié)元件結合蛋白-1c(SREBP-1c)激活,上調(diào)靶基因肝臟脂肪酸合成酶(fas)和乙酰輔酶A羧化酶(acc)等m RNA水平;此外,肝臟核蛋白過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)受到明顯抑制,其靶基因肝臟肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1α(cpt1α)、細胞色素P450酶(cyp)4A10和4A14 m RNA水平均下調(diào)。研究二:與普通孕鼠相比,果糖孕鼠血糖水平變化差異無統(tǒng)計學意義(1.99±0.95mmol/l,2.21±0.77mmol/l),血清TG水平有上升趨勢(2.31±0.52mmol/l,2.75±1.10mmol/l),TCH水平無明顯變化(2.07±0.43mmol/l,1.99±0.48 mmol/l)。提取兩組小鼠肝臟脂質(zhì)進行檢測,結果顯示果糖孕鼠肝臟TG水平為100.40±19.41mmol/l,VLDL水平為1.88±0.31mmol/l,普通孕鼠血清TG水平為72.25±12.83mmol/l,VLDL水平為1.47±0.03mmol/l,兩組相比,果糖孕鼠肝臟TG及VLDL水平均上升,其中TG明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義。油紅染色顯示孕鼠肝臟出現(xiàn)明顯脂質(zhì)沉積。q PCR及Western bloting結果顯示,SREBP-1c的核蛋白水平顯著上升,其靶基因肝臟脂肪酸合成酶(fas)和乙酰輔酶A羧化酶(acc)水平均有上升趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義。結論研究一:妊娠可能通過激活PXR上調(diào)肝細胞脂肪酸攝取關鍵酶、激活SREBP-1c上調(diào)從頭合成脂肪酸關鍵酶、以及抑制PPARα下調(diào)肝臟脂肪酸氧化關鍵酶,引起妊娠晚期肝臟脂質(zhì)合成增加和脂質(zhì)沉積。研究二:高果糖飲食可加重孕鼠肝臟TG沉積,可能與肝臟脂質(zhì)合成相關轉(zhuǎn)錄因子SREBP-1c激活有關。
【關鍵詞】：妊娠 果糖 肝臟 甘油三酯 脂質(zhì)代謝
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R473.71
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-14
• 研究一 妊娠對肝臟脂質(zhì)代謝相關基因表達和核受體的影響14-35
• 1 引言14
• 2 材料與方法14-21
• 3 結果21-31
• 4 討論31-35
• 研究二 高果糖飲食對妊娠期小鼠肝臟脂質(zhì)代謝的影響35-46
• 1 引言35
• 2 材料與方法35-37
• 3.結果37-43
• 4 討論43-46
• 創(chuàng)新之處46
• 局限之處46
• 結論46-47
• 參考文獻47-54
• 附錄54-56
• 致謝56-57
• 綜述57-69
• 參考文獻63-69

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本文編號：681963