【摘要】：目的:評(píng)價(jià)基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)VITEK MS對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和耐萬古霉素屎腸球菌的快速鑒別能力。方法:收集279株金黃色葡萄球菌臨床分離株,應(yīng)用VITEK MS質(zhì)譜儀鑒定菌種,苯唑西林和頭孢西丁紙片擴(kuò)散法初篩耐藥菌株,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè)mec A基因。采用VITEK MS建立甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)的數(shù)據(jù)庫(Super Spectra),獲得兩組用于區(qū)分的特征峰,并應(yīng)用臨床菌株對(duì)新建立的Super Spectra進(jìn)行驗(yàn)證。同樣收集196株屎腸球菌臨床菌株,VITEK MS進(jìn)行菌種鑒定,萬古霉素和替考拉寧紙片擴(kuò)散法初篩耐藥菌株,PCR檢測(cè)萬古霉素耐藥基因(包括van A、van B和van M)。采用VITEK MS建立萬古霉素耐藥屎腸球菌(VRE)和萬古霉素敏感屎腸球菌(VSE)的Super Spectra,獲得兩組用于區(qū)分的特征峰,并應(yīng)用臨床菌株對(duì)新建立的Super Spectra進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:收集的279株金黃色葡萄球菌臨床菌株中275株經(jīng)VITEK MS確認(rèn)為金黃色葡萄球菌,其中143株經(jīng)紙片法藥物敏感性和PCR擴(kuò)增試驗(yàn)證實(shí)為甲氧西林耐藥且攜帶mec A基因,132株為甲氧西林敏感菌株且不攜帶mec A基因,紙片擴(kuò)散法和mec A基因檢測(cè)符合率為100%。隨機(jī)采集66株MRSA臨床菌株和1株標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC43300的質(zhì)譜指紋圖譜建立MRSA Super Spectra,隨機(jī)采集64株MSSA臨床菌株和2株標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC25923、ATCC29213)的質(zhì)譜指紋圖譜建立MSSA Super Spectra,比對(duì)MRSA和MSSA Super Spectra得到兩個(gè)質(zhì)荷比為2305.6Da和3007.3Da的MRSA特征峰,而質(zhì)荷比為6816.7Da的峰為MSSA特有的響應(yīng)值較高的峰,驗(yàn)證結(jié)果顯示該方法對(duì)MRSA鑒定準(zhǔn)確率達(dá)84.21%,對(duì)MSSA的鑒定準(zhǔn)確率達(dá)90.91%,對(duì)于金黃色葡萄球菌是否耐藥的鑒定總的準(zhǔn)確率為87.32%。收集的196株屎腸球菌臨床菌株經(jīng)質(zhì)譜鑒定均為屎腸球菌,其中105株經(jīng)紙片法藥物敏感性和PCR擴(kuò)增試驗(yàn)證實(shí)為VRE(66株攜帶van A基因,39株攜帶van M基因),91株為敏感菌株,紙片擴(kuò)散法和PCR結(jié)果符合率為100%。隨機(jī)采集62株臨床耐藥株和58株臨床敏感株的質(zhì)譜指紋圖譜分別建立VRE Super Spectra和VSE Super Spectra,比對(duì)兩個(gè)Super Spectra發(fā)現(xiàn),6601.4 Da處的峰為VRE特征峰,而3723.9 Da和3883.1 Da處的峰為VSE的兩個(gè)特征峰,臨床菌株驗(yàn)證表明該方法對(duì)VRE的鑒定準(zhǔn)確率為88.37%,VSE準(zhǔn)確率為75.76%,對(duì)于屎腸球菌是否耐藥的總鑒定準(zhǔn)確率為82.89%。結(jié)論:VITEK MS可以通過采集耐藥菌株和敏感菌株的質(zhì)譜指紋圖譜從而建立耐藥和敏感菌株Super Spectra,得到耐藥株和敏感株的特征峰,激活后的Super Spectra即可實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)菌株的耐藥性的快速鑒別,該方法快速準(zhǔn)確,將對(duì)臨床耐藥菌株鑒定產(chǎn)生革命性影響。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：浙江工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R446.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃蓉;;如何快速鑒定臨床標(biāo)本中的糞腸球菌和屎腸球菌[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2010年04期

2 王雨萍;林宏;;93株兒童屎腸球菌感染病例分析[J];天津醫(yī)藥;2011年01期

3 舒蕊華;盧士玲;徐幸蓮;;糞腸球菌(Enterococcus faecalis)和屎腸球菌(Enterococcus faecium)產(chǎn)生物胺交互作用研究[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2011年06期

4 李梅花;王芳;孫婷;張家超;孫春玲;劉文俊;包秋華;孫天松;;自然發(fā)酵乳中糞腸球菌和屎腸球菌的4種鑒定方法的比較[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2011年09期

5 陳名霞;;糞腸球菌和屎腸球菌感染調(diào)查分析[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年24期

6 華文久,耿民新,邱國璜,黃書明,章幼奕,翁心華,尹有寬,盧洪洲;接觸病豬引起屎腸球菌感染暴發(fā)流行40例臨床報(bào)告[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1999年04期

7 李爽,張正;糞腸球菌與屎腸球菌藥敏表型和耐藥基因的比較[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2005年03期

8 盧洪洲,翁心華,章幼弈,龐茂銀,尹有寬,湯一葦,李海靜,孟淑芳,華文久,聞?dòng)衩?一起由屎腸球菌引起的人、豬敗血癥暴發(fā)流行的相關(guān)性[J];中華傳染病雜志;2003年03期

9 常紀(jì);王成英;杜靜;付寶慶;;157株屎腸球菌耐藥分析[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2007年01期

10 黃源春;姚芬;錢元恕;蔡應(yīng)木;黃文祥;華德興;焦曉陽;;屎腸球菌透明質(zhì)酸酶基因致病意義的研究[J];中國感染與化療雜志;2009年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 劉穎斌;唐U，

本文編號(hào)：2488617